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核酸提取儀原理和注意事項(xiàng)
核酸提取儀核酸提取儀是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來使得樣本核酸提取工作自動完成的儀器。其在環(huán)境微生物檢測、食品安全檢測、輸血安全、法醫(yī)學(xué)鑒定、疾病控制中心、臨床疾病...[查看全部]
核酸提取儀原理和注意事項(xiàng) ： 核酸提取儀應(yīng)用核酸提取儀介紹和特點(diǎn)核酸提取儀特點(diǎn)以及應(yīng)用領(lǐng)域核酸提取方法介紹DNA提取中實(shí)驗(yàn)試劑作用原理
核酸提取儀核酸提取儀是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來使得樣本核酸提取工作自動完成的儀器。其在環(huán)境微生物檢測、食品安全檢測、輸血安全、法醫(yī)學(xué)鑒定、疾病控制中心、臨床疾病診斷、生物學(xué)研究以及畜牧業(yè)等多種領(lǐng)域得到廣泛地應(yīng)用。
磁珠法核酸提取儀的基本原理
磁珠法核酸提取儀通常包括磁棒法和抽吸法。
1. 磁棒法
磁棒法是利用磁珠的轉(zhuǎn)移，液體的固定來使核酸的分離得以實(shí)現(xiàn)。其和抽吸法的原理和過程相同。磁珠和液體分離的方式有差異。磁棒法是通過磁棒對磁珠的吸附從廢液中分離開磁珠，在下一步的液體中將其放入，使核酸的提取得以實(shí)現(xiàn)。
2.抽吸法
抽吸法又稱為移液法，，是利用液體的轉(zhuǎn)移或者磁珠的固定來使核酸的提取得以實(shí)現(xiàn)的。通常利用對系統(tǒng)控制機(jī)械臂的操作來實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)移，有如下提取過程：
1) 裂解：
將裂解液加入到樣品中，利用機(jī)械運(yùn)動及加熱來混勻反應(yīng)液和使反應(yīng)充分。裂解細(xì)胞，使核酸釋放出來。
2) 吸附：
將磁珠加入到樣品裂解液中，充分混勻，通過磁珠在高鹽低PH值下對核酸親和力很強(qiáng)的特點(diǎn)，對核酸吸附，在外加磁場作用下，分離磁珠與溶液，通過吸頭轉(zhuǎn)移到廢液槽中，棄掉吸頭。
3) 洗滌：
將外加磁場撤去，使用新吸頭將洗滌緩沖液加入，充分混勻，將雜質(zhì)去除，在外加磁場作用下，移出液體。
4) 洗脫：
將外加磁場撤去，使用新吸頭將洗脫緩沖液加入，充分混勻，結(jié)合的核酸就和磁珠分離，從而使純化的核酸獲得。
注意事項(xiàng)
1.核酸提取儀至少離其他豎直面10cm。
2.儀器的輸入電源線必須接地以防止觸電事故。
3.操作人員不可以擅自對儀器進(jìn)行拆解，必須有持證的專業(yè)維修人員完成更換元件或進(jìn)行機(jī)內(nèi)調(diào)節(jié)等操作，當(dāng)接通電源時，不要更換元件。
4.相對濕度10%-80%、暢通流入的空氣為35℃或以下，正常的大氣壓(海拔高度應(yīng)該低于3000m)、溫度20-35℃、典型使用溫度25℃為儀器的安裝環(huán)境。
5.不要在如電暖爐等靠近熱源的地方放置儀器應(yīng)當(dāng)防止將水或者其他液體濺入電子元件中以避
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核酸提取儀核酸提取儀是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來使得樣本核酸提取工作自動完成的儀器。其在環(huán)境微生物檢測、食品安全檢測、輸血安全、法醫(yī)學(xué)鑒定、疾病控制中心、臨床疾病診斷、生物學(xué)研究以及畜牧業(yè)等多種領(lǐng)域得到廣泛地應(yīng)用。
分類
1.按照儀器型號大小不同來分
1) 小型自動核酸提取儀
小型的自動化儀器能夠任何實(shí)驗(yàn)室得到應(yīng)用，其利用特殊的運(yùn)行結(jié)構(gòu)來使得自動提取核酸的目的達(dá)到。
2) 自動液體工作站
自動液體工作站有著非常強(qiáng)大的功能，可以自動完成液體分液、吸液等，甚至于能夠通過對擴(kuò)增、檢測等功能進(jìn)行整合完成標(biāo)本的提取、擴(kuò)增。其功能的其中一個應(yīng)用是提取，常規(guī)實(shí)驗(yàn)室提取核酸其不太適合，通常均在單一類標(biāo)本并且一次提取標(biāo)本量非常大(至少96個，一般幾百個)的實(shí)驗(yàn)需求上應(yīng)用。需要比較大的資金花費(fèi)在自動工作站的平臺建立及平臺的運(yùn)作。
2.按照提取原理不同來分
1) 采用磁珠法的儀器
將磁珠作為載體，利用磁珠在低鹽高PH值下與核酸分離，在高鹽低PH值下吸附核酸的原理，再通過對磁珠移動或者將液體轉(zhuǎn)移使核酸的整個提取純化過程得以實(shí)現(xiàn)。因?yàn)槠洫?dú)特的原理，因此，能夠設(shè)計(jì)成很多種通量，除了能夠單管提取，還能夠提取8-96個樣本，并且其操作簡便，只需要30-45min就能夠提取96個樣本，使得實(shí)驗(yàn)效率大大提高了，并且有著低廉的成本，所以能夠應(yīng)用在不同實(shí)驗(yàn)室，就目前市場來說，其是主流的機(jī)器。
2) 采用離心柱法的儀器
離心柱法核酸提取儀主要采用離心機(jī)和自動移液裝置相結(jié)合的方法，通量通常為1-12個樣本。和手工提取相比，操作時間差不多，并不會使得實(shí)際工作效率提高，而且有著昂貴的價格，不同型號儀器的耗材也不能通用，只在經(jīng)費(fèi)充足的大型實(shí)驗(yàn)室適合使用。
磁珠法核酸提取儀的特點(diǎn)
1.純度高，得率高。
2.沒有污染，并且有著穩(wěn)定的結(jié)果。
3.有著低廉的成本，廣泛地應(yīng)用很方便。
4.不同類型的樣本能夠同時處理。
5.自動化、高通量操作 能夠?qū)崿F(xiàn)。
6.操作快速、簡
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核酸提取系統(tǒng)是經(jīng)多年研制開發(fā)而成，用于高質(zhì)量核酸的提取，以低成本，小投入來使核酸提取純化得以實(shí)現(xiàn)的自動操作系統(tǒng)。
簡介
分子生物學(xué)研究以核酸提取純化為起點(diǎn)，若要進(jìn)行分子生物學(xué)研究的下一步工作，還必須將高質(zhì)量的核酸提取到。最初核酸提取實(shí)驗(yàn)的操作技術(shù)難度高，經(jīng)過不斷地演化發(fā)展，到目前為止，常規(guī)的核酸提取實(shí)驗(yàn)已經(jīng)基本沒有任何技術(shù)含量。 核酸提取儀的系統(tǒng)可以使一天20－200個標(biāo)本的提取純化工作輕松地實(shí)現(xiàn)。
創(chuàng)新：
1.試劑管條設(shè)計(jì)大容量，最大處理液體體積達(dá)到2ml。
2.8連管條獨(dú)立設(shè)計(jì)，并且可以封裝，除了能夠使所有核酸提取純化所需要的步驟及分裝試劑得到滿足，而且能夠按照實(shí)驗(yàn)要求對提取標(biāo)本數(shù)量進(jìn)行確定。
特點(diǎn)：
1、 工作范圍廣：
提取標(biāo)本能夠從從幾微升至1ml，能夠在一個平臺上實(shí)現(xiàn)質(zhì)粒、細(xì)菌、血液、組織、血清等所有標(biāo)本的核酸提取。
2、 操作簡單：
儀器內(nèi)內(nèi)置核酸提取純化程序，實(shí)驗(yàn)時僅需要對所需要的運(yùn)行程序進(jìn)行選擇就行。在試管條內(nèi)封裝提取純化所需要的試劑。試劑不需要手工加入。
3、 投資成本最低：
不管儀器、試劑、耗材，在同行業(yè)成本都是最低。
4、 通量高：
系統(tǒng)配置二臺核酸提取儀，和一個小型自動液體工作站的工作量相當(dāng)。
5、 標(biāo)準(zhǔn)化、自動化：
所有核酸提取純化工作由儀器自動完成，獲得標(biāo)準(zhǔn)、統(tǒng)一的提取結(jié)果。
應(yīng)用領(lǐng)域：
商檢、疾控中心、血站、質(zhì)檢等應(yīng)用領(lǐng)域
科研院所、高等院校等應(yīng)用領(lǐng)域
法醫(yī)應(yīng)用領(lǐng)域
醫(yī)院、婦幼保健、計(jì)生科研等應(yīng)用領(lǐng)域
核酸提取儀CTAB法 ： DNA提取過程中細(xì)胞裂解原理和方法DNA提取常見問題（二）DNA提取常見問題（一）DNA提取中實(shí)驗(yàn)試劑作用原理核酸提取方法介紹
CTAB法是提取DNA主要的方法，其他方法還有生物方式：酶法，化學(xué)方式如異硫氰酸胍法、堿裂解法，物理方式如玻璃珠法、超聲波法、研磨法、凍融法。
分類
細(xì)胞器DNA、細(xì)胞核DNA。
單鏈環(huán)狀、雙鏈線性、雙鏈環(huán)狀。
組織DNA、細(xì)胞懸液DNA、、病毒DNA、質(zhì)粒DNA、真核生物DNA、細(xì)菌DNA。
提取原則
1.應(yīng)當(dāng)將如蛋白質(zhì)、多糖和脂類分子等其他生物大分子的污染應(yīng)降低到最低程度。
2.應(yīng)當(dāng)盡可能去除如RNA的其他核酸分子。
3.使核酸一級結(jié)構(gòu)的完整性得以保證。
4.不應(yīng)當(dāng)有對酶有抑制作用的有機(jī)溶劑和過高濃度的金屬離子存在于核酸樣品中。
提取方法
1.表面活性劑快速制備法
使用Triton X-100A或NP40表面活性劑對細(xì)胞破碎，然后使用蛋白酶K或酚將蛋白去除，使用乙醇沉淀或透析。
2.加熱法快速制備
溫度96℃-100℃加熱5min，之后離心后取上清，能夠在PCR反應(yīng)時使用。
3.堿變性快速制備
首先使用NaOH作用20min，再將HCI加入中和，離心后取上清，含有少量DNA。
4.玻璃棒纏繞法
使用鹽酸胍對細(xì)胞進(jìn)行裂解，在乙醇上鋪上裂解物，然后在界面使用帶鉤或U型玻璃棒輕攪，在玻棒繞DNA沉淀液，使得80kbDNA生成。
5.異丙醇沉淀法
6.酚抽提法
首先使用蛋酶K、SDS對細(xì)胞進(jìn)行破碎，化蛋白，然后用酚和酚-氯萃取，高速離心后取上清，所得DNA大小為100-150kb。
7.甲酰胺解聚法
和上面方法一樣先將細(xì)胞破碎，然后用高濃度甲酰胺解聚蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合，再透析獲得200kb左右DNA。
核酸提取儀應(yīng)用 ： 核酸提取儀特點(diǎn)以及應(yīng)用領(lǐng)域核酸提取方法介紹DNA提取中實(shí)驗(yàn)試劑作用原理DNA提取常見問題（一）DNA提取常見問題（二）
核酸提取系統(tǒng)需要應(yīng)用配套的核酸提取試劑來使得核酸的提取工作自動完成。核酸提取儀，又被稱為核酸純化儀，是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來使核酸的提取工作自動完成的儀器。此儀器最近幾年才得到應(yīng)用和推廣。
應(yīng)用
1.臨床樣品的分子診斷
自動核酸提取儀能夠?qū)εR床樣品快速高通量的處理，提取的核酸能夠被用來后續(xù)的分子診斷，對于福 爾 馬 林固定石蠟包埋(Formalin-Fixed and Parrffin-Embedded, FFPE)的組織樣品同樣適合。
2.畜牧獸醫(yī)
能夠?qū)α⒖舜误w(Coxiella burnetii)，牛病毒性瀉病毒(Bovine viral diarrhea virus)，豬瘟病毒（Classical swine fever virus,CSFV），新城疫病毒(Newcastledisease virus)，禽流感病毒(Avian influenza virus)高效、高靈敏度地提取。
3.法醫(yī)學(xué)的應(yīng)用
對于法醫(yī)工作而言，注重的是核酸提取的效率和穩(wěn)定性，自動核酸提取儀配合門的法醫(yī)樣品核酸提取磁珠試劑使用，能夠從包括煙蒂、毛根、軟骨、指甲、血痕等不同來源的材料中對高質(zhì)量的DNA進(jìn)行純化。
4.核酸提取儀應(yīng)用領(lǐng)域
與生物分子相關(guān)的分離純化工作幾乎在每個實(shí)驗(yàn)室均是必不可少且十分重要的。然而多個樣品的純化還是十分困難的，不但選擇的純化技術(shù)要合適，并且有著特別大的工作量。當(dāng)前飛速發(fā)展對高通量樣品進(jìn)行提取純化的需求很難得到滿足。磁珠自動核酸提取純化系統(tǒng)是使用磁珠法技術(shù)，能夠在食品安全、法醫(yī)鑒定、疾控醫(yī)療、基因組學(xué)等領(lǐng)域得到廣泛地應(yīng)用。
5.基因組學(xué)
對于基因組學(xué)的研究，自動核酸提取儀非常適合，微生物、動物、植物或是病毒均是能夠取樣本的來源。動物組織/細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒、白細(xì)胞層全血基因組提取試劑盒、全血基因組DNA提取試劑盒能夠使得足夠數(shù)量和純度的DNA或RNA快速的純化出來。對于如North
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