? 近期， 歐洲毒雞蛋事件備受關注。據報道，雞蛋被污染的情況主要發(fā)生在歐洲，源于比利時、法國、德國和荷蘭等四國的農場，受到污染的雞蛋已經波及奧地利、英國、丹麥、愛爾蘭等國?？瓷先ゾ嚯x遙遠，但是香港地區(qū)也進口了歐洲受到污染的雞蛋。

這批雞蛋主要的問題在于殺蟲劑氟蟲腈超標。氟蟲腈是一種廣譜殺蟲劑，曾作為代替高毒有機磷農藥的首選品種。但是，由于其在作物中半衰期長、對環(huán)境不友好、殘留物在生物體內富集等毒副作用，世界衛(wèi)生組織將它列為“對人類有中度毒性”的化學品，已被多國禁止使用。

除氟蟲腈外，在正常使用下其代謝產物主要有MB45950（氟蟲腈硫醚）、MB46136（氟蟲腈砜）、MB46513（氟甲腈），都具有一定毒性，有的毒性甚至高于母體，也需要高度關注。

賽默飛方案

? 對于氟蟲腈及其代謝物的分析，無論是采用基于OrbitrapTM技術的高分辨質譜還是三重四極桿質譜檢測，賽默飛都有成熟的方法可供用戶直接使用。在歐洲毒雞蛋事件爆發(fā)前，我們的應用工程師就已和用戶合作發(fā)表了針對氟蟲腈及其代謝物分析的文章。該方法利用TurboflowTM在線凈化技術與液相色譜串聯質譜技術聯用測定氟蟲腈及其代謝產物在蔬菜中的殘留。

? TurboflowTM（渦流色譜技術）是一種針對復雜基質樣品的在線凈化技術，該技術結合了體積排阻和反相保留原理，在捕獲目標化合物的同時能夠快速凈化基質樣品。

? 賽默飛基于TurboflowTM技術的Transcend系統(tǒng)可以幫助用戶進行全自動化的樣品前處理，同時具備良好的凈化效果。通過Transcend系統(tǒng)和TSQ三重四極桿質譜儀的聯用，可以在保證高通量，高靈敏度、高準確度的基礎上，幫助用戶實現 Start To Finish 的輕松簡易的工作流程。

實驗方法

樣品制備和提取

? 樣品取可食部分，粉碎勻漿。準確稱取樣品5.0 g，置于50 mL塑料離心管中，加入10mL乙腈，于渦旋混合器上渦旋1min，6000r/min離心5min，取1mL上清液過0.22 μm濾膜，上機測定。

在線凈化條件

在線凈化柱：Cyclone-P (0.5×50 mm)；上樣溶劑（A）：5 mmol/L乙酸銨水溶液；洗脫溶劑（B）：甲醇；清洗溶劑（C）：異丙醇/乙腈/丙酮（1/1/1,v/v/v）,洗脫流速：2.0 mL/min，進樣體積：50 μL。

分析柱：Hypersil GOLD（100×2.0 mm，1.9 μm），流動相A相：5 mmol/L乙酸銨水溶液，流動相B相：乙腈。在線凈化程序見表1。

表1 ?Turboflow在線凈化和梯度洗脫程序

步驟

秒數

s

上樣泵

洗脫泵

目的

流速

mL/min

A??? %

B?

?%

C

%

目的

轉變? 模式

流速

mL/min

A

%

B

%

1

60

上樣

2.0

100

-

-

平衡

Step

0.4

95

5

2

60

轉移

0.06

100

-

-

轉移

Step

0.4

95

5

3

120

淋洗

2.0

-

-

100

洗脫

Ramp

0.4

65

35

4

180

淋洗

2.0

-

-

100

洗脫

Ramp

0.4

5

95

5

120

淋洗

2.0

-

100

-

洗脫

Step

0.4

5

95

6

60

充滿洗脫環(huán)

2.0

20

80

-

洗脫

Step

0.4

95

5

7

120

條件化

2.0

100

-

-

平衡

Step

0.4

95

5

?

?

質譜條件

電噴霧離子源（ESI），負離子掃描，電噴霧電壓：-2500 V，離子源溫度：400℃，鞘氣壓力：40 arb，輔助氣壓力：15 arb，源內誘導解離電壓：10 V，毛細管溫度：350℃，Q1，Q3單位分辨率：0.7 Da；選擇反應監(jiān)測（SRM）工作模式，SRM優(yōu)化參數列表見下表。

????? 表2 質譜參數

化合物

離子對

碰撞能量/(E/eV)

透鏡電壓/V

氟蟲腈

434.9/250.0

27

177

434.9/330.0*

17

177

氟甲腈

386.9/282.1

31

53

386.9/351.1*

15

53

氟蟲腈硫醚

418.9/262.0*

28

104

418.9/383.0

15

104

氟蟲腈砜

450.9/281.9

30

100

450.9/414.9*

16

100

注：*為定量離子

?

實驗結果

實驗在1-50 ng/mL濃度范圍內各組分均呈良好的線性。以目標物在空白樣品中3倍信噪比計算檢出限，氟蟲腈0.5 μg/kg、氟蟲腈硫醚0.1 μg/kg、氟蟲腈砜0.1 μg/kg、氟甲腈0.1 μg/kg。實驗回收率在84.8%-97.2%之間，空白樣品及添加樣品中氟蟲腈及其代謝物的SRM數據見下圖。

圖1? 空白樣品SRM色譜圖

?圖2? 添加50.0 μg/kg樣品MRM色譜圖

?
a 氟甲腈， b 氟蟲腈硫醚， c 氟蟲腈， d 氟蟲腈砜

實驗建立了在線凈化/液相色譜串聯質譜技術測定蔬菜中氟蟲腈及其代謝物的方法。本方法采用先進的TurboflowTM在線凈化技術，前處理簡單，試劑用量減少，可快速全自動處理分析樣品，并且可以降低基質干擾的影響。該方法靈敏度高，回收率穩(wěn)定，重現性良好，可用于雞蛋中氟蟲腈及其代謝物的日常檢測。