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色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此可以說擔負分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。能否找到合適的色譜柱，關系到整個分析工作的成敗。目前市場上反相色譜柱有C18、C4、C8、C30、氰基柱、硅膠柱、氨基柱、苯基柱等。本文主要介紹C18柱。
C18色譜柱簡稱ODS柱（十八烷基鍵合硅膠填料）是一種長鏈烷基鍵合相有較高的碳含量和更好的疏水性，對各種類型的生物大分子有更強的適應能力。但因鍵合方式不同、粒徑不同、長短不同，內徑差異等方面因素，呈現出不同的選擇性，分離效果也參差不齊。分析化學中可以根據pH環(huán)境、流動相極性、色譜柱的分類系統(tǒng)、藥物極性等來選擇合適的C18色譜柱。
選擇C18色譜柱時應注意：
1）在pH值正常范圍內（2~8）可選用現代高純硅膠色譜柱，具有峰形好，重現性高和壽命長的特點，選用較短的柱子可以提高分離效率，選用較長的柱子可以增加保留，選用小顆粒度的填料可以提高分離度，對分子量大的組分宜選用大孔徑填料的色譜柱。
2）分離極性大的組分（流動相水相過大）采用AQ類似的色譜柱。
3）分離生物堿類的化合物選用經過烷基化處理封口的填料可防止堿性化合物的拖尾現象。
4）極端酸性條件下（pH小于2）選用Zorbax Stable Bond C18類色譜柱或者寬pH值色譜柱。
5）低端堿性條件下（pH大于8）選用Zorbax Extend-C18、XBridge，XSelect，Atlantis，Symmetry，XTerra，SunFire等色譜柱。
6）選用含碳量高的柱子可以增加保留。
