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檢測(cè)高密度脂蛋白對(duì)于血清和組織樣本的處理方法匯總-技術(shù)文章-上海信帆生物科技有限公司

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-09-02  來(lái)源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):906
核心提示:檢測(cè)高密度脂蛋白對(duì)于血清和組織樣本的處理方法匯總?!上海信帆生物代理銷售低密度脂蛋白檢測(cè)試劑盒和高密度脂蛋白檢測(cè)試劑盒,產(chǎn)品現(xiàn)貨供應(yīng),提供實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù),歡迎大家!樣本處理:血清(漿):直接測(cè)定,如超過(guò)線性范圍用生理鹽水稀釋后測(cè)定。 #9313;、培養(yǎng)液樣本:吸取培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,取上清測(cè)定。[注]:一般建議細(xì)胞密度在100萬(wàn)個(gè)/ml以上。 #9314;、組織樣本:準(zhǔn)確稱取組織重量,按重量(g):體積(ml)=1:9的比例,加入9倍體積的勻漿介質(zhì),冰水浴條件下機(jī)械勻漿,2500轉(zhuǎn)/分,離

檢測(cè)高密度脂蛋白對(duì)于血清和組織樣本的處理方法匯總?!

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 樣本處理:

血清(漿):直接測(cè)定,如超過(guò)線性范圍用生理鹽水稀釋后測(cè)定。  #9313;、培養(yǎng)液樣本:吸取培養(yǎng)液,1000 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,取上清測(cè)定。

 [注]:一般建議細(xì)胞密度在 100萬(wàn)個(gè)/ml以上。  #9314;、組織樣本:準(zhǔn)確稱取組織重量,按重量(g):體積(ml)=1:9 的比例,加入 9 倍體積的勻漿介 質(zhì),冰水浴條件下機(jī)械勻漿,2500 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,取上清液待測(cè)。

 [注]:1、如組織樣本為非高脂樣本,勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用磷酸鹽緩沖液(0.1mol/L pH 7.4)或生理鹽水進(jìn)行提取。

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 2、如組織樣本為高脂樣本或部分為高脂樣本,勻漿介質(zhì)可統(tǒng)一用無(wú)水乙醇進(jìn)行提取。 

細(xì)胞樣本: A、細(xì)胞收集:將制備好的細(xì)胞懸液取出,1000 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,棄上清液,留細(xì)胞沉 淀;用等滲緩沖液(推薦0.1mol/L 、pH7~7.4 磷酸鹽緩沖液)清洗1~2 次,同樣1000 轉(zhuǎn)/分,離心10 分鐘,棄上清液,留細(xì)胞沉淀;

 B、細(xì)胞破碎:加入 0.2~0.3ml 的勻漿介質(zhì)(推薦 0.1mol/L、pH7~7.4磷酸鹽緩沖液或生理 鹽水)進(jìn)行勻漿,冰水浴條件下超聲破碎(功率:300W,3~5 秒/次,間隔 30 秒,重復(fù) 3~5 次)或手動(dòng)勻漿,制備好的勻漿液不離心直接測(cè)定。也可采用裂解液裂解(推薦 TritonX-100,1~2%,裂解 30~40分鐘),裂解好的液體不離心直接測(cè)定。 

[注]:一般建議細(xì)胞密度在 100萬(wàn)個(gè)/ml以上。破碎好的液體可顯微鏡觀察細(xì)胞是否破碎完全 

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