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人鼻病毒（HRV）熒光定量PCR核酸檢測試劑盒適用于檢測的咽拭子標本等標本中人鼻病毒 RNA，適用于人鼻病毒感染的輔助診斷。其檢測結果僅供參考。
本試劑盒用一對人鼻病毒特異性引物，結合一條特異性熒光探針，用一步法熒光 RT-PCR 技術對人鼻病毒 RNA 進行體外擴增檢測，用于臨床上對可疑感染者的病原學診斷。

人鼻病毒（HRV）熒光定量PCR核酸檢測試劑盒說明書

【產(chǎn)品名稱】

商品名稱：人鼻病毒（HRV）核酸檢測試劑盒(RT-PCR 熒光探針法)

Name ：Diagnostic Kit for Human Rhinovirus RNA (RT-PCR Fluorescence Probing)

【包裝規(guī)格】48 份/盒

【預期用途】

本試劑盒適用于檢測的咽拭子標本等標本中人鼻病毒 RNA，適用于人鼻病毒感

染的輔助診斷。其檢測結果僅供參考。

【檢驗原理】

本試劑盒用一對人鼻病毒特異性引物，結合一條特異性熒光探針，用一步法熒

光 RT-PCR 技術對人鼻病毒 RNA 進行體外擴增檢測，用于臨床上對可疑感染者的

病原學診斷。

【試劑組成】

名 稱 規(guī) 格

酶液 50 l 1 管

HRV 反應液 1.0ml 1 管

HRV 陽性質(zhì)控品 50 l 1 管

陰性質(zhì)控品 250 l 1 管

說明：不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

0431霍亂弧菌(O139)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0421霍亂弧菌(O1)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0411霍亂弧菌(VC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0311志賀氏菌(SH)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0211沙門氏菌(Spp)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0171致病性大腸桿菌(EPEC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0161產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌(ETEC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0151侵襲性大腸桿菌(EIEC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0141粘附性大腸桿菌(EAEC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0131出血性大腸桿菌(EHEC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

【儲存條件及有效期】

-20℃ 5℃，避光保存、運輸、反復凍融少于 5 次，

有效期 12 個月。

【適用儀器】

ABI 7300、7500、ABI stepone / stepone plus 、安捷倫 MX3000P/3005P、MJ

Opticon2 等其他熒光定量 PCR 檢測儀。

【標本采集】

采集病人的咽拭子標本，應使用專用采樣拭子，適度拭抹咽后壁和兩側扁桃體部

位，應避免觸及舌部；迅速將拭子放入標本采集管中，旋緊管蓋并密封，以防干燥。

【保存和運輸】

上述標本短期內(nèi)可保存于-20℃，長期保存可置-70℃，但不能超過 6 個月，標

本運送應采用 2~8℃冰袋運輸，嚴禁反復凍融。

【使用方法】

1. 樣品處理（樣本處理區(qū)）

1.1樣本前處理

取 100uL 拭子標本于 1.5mL 滅菌離心管中。

 

4. PCR 擴增（核酸擴增區(qū)）

4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內(nèi)；

4.2設置好通道、樣品信息，反應體系設置為 25ul；熒光通道選擇：

檢測通道（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE，請勿

選擇 ROX 參比熒光。

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設置：

步驟 循環(huán)數(shù) 溫度 時間 收集熒光信號

1 1cycle 42℃ 20min 否

2 1 cycle 95℃ 10min 否

3 40 cycle

94℃ 15sec 否

55℃ 30sec 是

1.2RNA 提取

推薦采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的 RNA 提取試劑盒（離心柱提取

法），請按照試劑盒說明書進行操作。

2. 試劑配制（試劑準備區(qū)）

根據(jù)待檢測樣本總數(shù)，設所需要的 PCR 反應管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性

對照+1 管陽性對照；樣品每滿 7 份，多配制 1 份)，每測試反應體系配制如下表：

試劑 HRV 反應液 酶液

用量 20 l 1 l

3. 加樣（樣本處理區(qū)）

將步驟 1 提取的 RNA、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4 l，分別加入相應的反

應管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。

5. 結果分析判定

5.1結果分析條件設定

設置 baseline 和 Threshold：一般直接按機器自動分析的結果分析，當曲

線出現(xiàn)整體傾斜時，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) baseline 的 start 值(一般可在 3~15

范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))，以及 Threshold 的 Value

值(上下拖動閾值線至高于陰性對照)，重新分析結果。

1011難難梭狀芽胞桿菌(Cd)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0911金黃色葡萄球菌(SA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0811副傷寒桿菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0711傷寒桿菌(ST)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0611甲型副傷寒沙門氏菌(SPA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0511副溶血性弧菌(VP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0441霍亂弧菌CTX基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

7. 質(zhì)控標準

陰性質(zhì)控品：無明顯擴增曲線或無 Ct 值顯示；

陽性質(zhì)控品：擴增曲線有明顯指數(shù)生長期，且 Ct 值 32；

以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效。

8. 產(chǎn)品性能指標

陰陽性參考品符合率：5 份陽性參考品符合率為 100％；10 份陰性參考品符合率

為 100％。

最低檢測限：5.0 102copies/ml。

精密度：批內(nèi)、批間精密度檢測 Ct 值的變異系數(shù)（CV）均小于等于 3%。

 

人鼻病毒（HRV）熒光定量PCR核酸檢測試劑盒相關產(chǎn)品：

1921肉毒桿菌(E/F型)1911肉毒桿菌(A/B型)1811空腸彎曲菌(CJ)1711產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌(CP)1611創(chuàng)傷弧菌(VV)1511溶藻弧菌(VA)1411嗜水氣單胞菌(AH)1311小腸結腸炎耶爾森氏菌(YE)1211蠟樣芽孢桿菌(BC)1111單增李斯特菌(LM)
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