印跡法（blotting）指的是往固相載體上轉(zhuǎn)移樣品，之后通過相應(yīng)的探測(cè)反應(yīng)來進(jìn)行樣品的檢測(cè)的一種方法。

1975年，往硝酸纖維素膜（NC膜）上轉(zhuǎn)移DNA，并且通過DNA－RNA雜交來對(duì)特定的DNA片段進(jìn)行檢測(cè)的方法被Southern建立了，被叫做Southern印跡法。在此之后，對(duì)雙向電泳后蛋白質(zhì)分子的印跡分、對(duì)單向電泳后的蛋白質(zhì)分子的印跡分析以及對(duì)RNA的印跡分析也被使用了類似的方法，這些方法分別叫做Eastern印跡法、Western印跡法以及Northern印跡法。

蛋白質(zhì)印跡法首先是從凝膠中向硝酸纖維素膜上轉(zhuǎn)移電泳后分離的蛋白質(zhì)，一般分為毛細(xì)管印跡法和電泳印跡法兩種方法。

毛細(xì)管印跡法

毛細(xì)管印跡法是在由緩沖液浸濕的濾紙上放置凝膠，將一片硝酸纖維素膜放置在凝膠上，然后再將一層吸水物質(zhì)（如濾紙等）放在上面并且使用重物將其壓好，那么在過毛細(xì)作用下緩沖液就會(huì)從凝膠流過，當(dāng)緩沖液從凝膠經(jīng)過的時(shí)候，蛋白質(zhì)就會(huì)被其帶到硝酸纖維素膜上，通過疏水，硝酸纖維素膜能夠和蛋白質(zhì)相互作用使得不可逆的結(jié)合形成。這個(gè)過程持續(xù)過夜，就能夠往硝酸纖維素膜上轉(zhuǎn)移凝膠中的蛋白質(zhì)，然而這種方法具有比較低的效率，一般僅僅有10%～20%蛋白質(zhì)從凝膠中被轉(zhuǎn)移。

電泳印跡法

若想要更快速有效的進(jìn)行轉(zhuǎn)移，就可以使用電泳印跡法。這種方法是凝膠和硝酸纖維素膜被有孔的塑料和有機(jī)玻璃板夾成“三明治”形狀，在此之后往兩個(gè)平行電極中間的緩沖液中浸入，進(jìn)行電泳。為了使得蛋白質(zhì)從凝膠離開在硝酸纖維素膜結(jié)合，需要對(duì)電泳方向進(jìn)行適當(dāng)?shù)倪x擇。

印跡（blot）就是轉(zhuǎn)移后的硝酸纖維素膜的一個(gè)稱謂，被用來進(jìn)一步檢測(cè)蛋白質(zhì)。首先用蛋白溶液（如10%的BSA）對(duì)印跡進(jìn)行處理，從而將硝酸纖維素膜上剩余的疏水結(jié)合位點(diǎn)封閉掉，之后處理使用所要研究的蛋白質(zhì)的抗血清（一抗），在印跡中，其它蛋白質(zhì)不與一抗結(jié)合，與一抗結(jié)合的只有待研究的蛋白質(zhì)，如此，將未結(jié)合的一抗清洗去除之后，印跡中結(jié)合著一抗的就僅有待研究的蛋白質(zhì)的位置。進(jìn)一步用適當(dāng)標(biāo)記的二抗來對(duì)處理過的印跡進(jìn)行處理，一抗的抗體指的就是二抗，就相當(dāng)于如果是從鼠中獲得的一抗，那么抗鼠IgG的抗體就是二抗，在處理之后，一抗的位置，也就是待研究的蛋白質(zhì)的位置能夠通過帶有標(biāo)記的二抗與一抗結(jié)合被指示出來。