熒光顯微鏡通過適當(dāng)熒光染色可常直接而方便觀察

熒光染料就是能發(fā)出熒光的染料。在吸收可見光和紫外光后，能把
紫外光轉(zhuǎn)變?yōu)椴ㄩL較長的可見光波并反射出來，呈閃亮的鮮艷色彩。熒
光染料由其本身的吸收(激發(fā))和發(fā)光譜來表征。熒光染料吸收高能量(
短波長)的光子后，發(fā)射出低能量(長波長)的光子。在傳統(tǒng)的光學(xué)顯微
鏡中，光譜是由分子在So和s。兩個量子態(tài)的能量差異決定的，譜線的
形狀則依賴于分子的振動狀態(tài)。

在熒光染料的分子當(dāng)中，并不是所有的原子和基團(tuán)都可以吸收光并
發(fā)出熒光。熒光染料之所以能發(fā)出熒光是因?yàn)樗旧砗幸环N特殊的基
團(tuán)熒光團(tuán)。熒光團(tuán)是分子中的一種功能基團(tuán)，可以吸收特定波長的能量
并發(fā)射出不同波長的熒光。熒光團(tuán)的吸收光和發(fā)射光波長依賴于熒光團(tuán)
的化學(xué)結(jié)構(gòu)和化學(xué)環(huán)境。從化學(xué)角度來講，我們可以通過引入熒光基團(tuán)
到有機(jī)化學(xué)物的方法來合成熒光染料。例如熒光抗體是一種熒光素衍生
物，這是一種最為常見的熒光團(tuán)，可以化學(xué)吸附在非熒光分子上從而合
成有廣泛應(yīng)用的新熒光分子。

很多樣品在顯微鏡下觀察時都是透明的，比如細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)部的器
官在顯微鏡下往往是難以觀察到的。另外聚合物樣品經(jīng)常是沒有顏色的
，當(dāng)兩個或更多聚合物混合在一起就更難以區(qū)分了。為了使它們能在顯
微鏡下被觀察到，往往采用熒光染色的方法，比如說通過適當(dāng)?shù)臒晒馊?br>料對非熒光的生物樣品或是聚合物樣品進(jìn)行染色使其發(fā)出熒光從而便于
觀察。

通過對樣品加入熒光染料為其進(jìn)行染色的示意圖，這是一種使樣品
發(fā)出熒光的非常直接而方便的方法。染色過程更像是染料分子物理吸附
在樣品表面或染料分子和樣品分子之間的相互吸引。在這個過程中樣品
與染料之間同時可能會發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，如果染料與樣品之間發(fā)生了化學(xué)
反應(yīng)，那么染色過程本身僅僅是物理過程而不是永久的染色。

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