生物類似藥，抗體-藥物偶聯(lián)物(ADC)和糖原工程蛋白都可以被認(rèn)為是下一代生物藥物。

　　ADC藥物包括與細(xì)胞毒藥物通過賴氨酸和半胱氨酸殘基共價(jià)結(jié)合的單克隆抗體。ADC既具有大分子藥物的特異性，又具有小分子藥物的細(xì)胞毒性，由于它們具有將化學(xué)治療性細(xì)胞毒藥物直接遞送至腫瘤抗原位點(diǎn)的能力，因此具有特別的腫瘤學(xué)意義。ADC中的抗體用于靶向識別和大量靶標(biāo)表達(dá)和內(nèi)化，而藥物則應(yīng)高度有效，并具有明確的作用機(jī)制，二者件的連接子則應(yīng)在血漿中保持穩(wěn)定并且在內(nèi)化時(shí)穩(wěn)定釋放藥物。

　　當(dāng)前，已上市的ADC藥物共有四個(gè)。Gemtuzumab ozogamicin(Mylotarg，Pfizer / Wyeth)是2001年批準(zhǔn)用于治療急性骨髓性白血病的第一個(gè)ADC藥物; 然而，它于2014年退出市場(雖然仍在日本銷售)，并于2017年重新進(jìn)入美國市場。Brentuximab vedotin(Adcetris，Seattle Genetics and Millenial/Takeda)于2011年被批準(zhǔn)用于霍奇金淋巴瘤。曲妥珠單抗(Kadcyla, Roche/Genentech)則是在2013年被批準(zhǔn)用于HER2陽性乳腺癌。

　　ADC藥物的表征包括單克隆抗體的許多關(guān)鍵質(zhì)量屬性(如氨基酸序列，電荷異質(zhì)性，翻譯后修飾(PTM)等)，以及獨(dú)特的表征如藥物與抗體的比例(DAR)、藥物分布，藥物結(jié)合位點(diǎn)和游離藥物性質(zhì)(如游離及結(jié)合的細(xì)胞毒藥物的量，毒性和生物利用度等;參見表I)。

表1 ADC藥物標(biāo)準(zhǔn)方法質(zhì)量屬性方法歸屬鑒別質(zhì)譜、肽譜圖、測序單抗及ADC大小異質(zhì)性SDS-PAGE、SEC、MALS、MS單抗及ADC電荷異質(zhì)性IEF、陽離子交換單抗及ADC翻譯后修飾LC-MS單抗及ADC載藥量（DAR）UV，HIC，HPLCADC載藥量分布HIC，MSADC效力（藥物）毒性ADC效力（單抗）抗原結(jié)合ELISA單抗及ADC

　　DAR的測定可以使用很多方法，其中之一就是疏水相互作用色譜(HIC)。HIC是反相高效液相色譜法(HPLC)的較溫和形式，因此即使在鏈間二硫鍵不存在的情況下也能保留ADC的完整性。流動相由含鹽試劑組成，其濃度高時(shí)通過增加物質(zhì)和固定相之間的疏水相互作用來保留蛋白質(zhì)，而后，保留的蛋白質(zhì)通過降低鹽濃度而被洗脫。典型的HIC洗脫液包括流動相A：2.0M硫酸銨，用0.1M磷酸鈉調(diào)節(jié)pH7.0; 流動相B：0.1M磷酸鈉(pH7.0)。HIC特別適合于ADC的分離，因?yàn)榇蠖鄶?shù)細(xì)胞毒藥物是疏水性的; ADC的疏水性取決于偶聯(lián)藥物的數(shù)量，因此可以使用HIC來分離具有不同DAR比率的ADC藥物。

　　使用半胱氨酸殘基簡化連接的ADC藥物可以使用天然質(zhì)譜技術(shù)測量，結(jié)果也證明HIC與MS技術(shù)的結(jié)果一致。使用LC-MS技術(shù)對ADC藥物的DAR進(jìn)行測定，這種方法應(yīng)用到糖基化以及去糖基化的ADC藥物上。所獲得的圖譜可以被解卷積，從而計(jì)算DAR，這種計(jì)算通常使用軟件來集成所有的DAR峰值，用最少的用戶輸入并報(bào)告最終的DAR值。