熒光顯微鏡的物鏡盡可能采用較大的數(shù)值孔徑NA

標本的特點為了增強熒光顯微鏡的使用效果，在設(shè)置熒光標本切片
時，應(yīng)具備以下特點：
  載玻片應(yīng)選用能透過短波紫外光的石英玻璃。厚度約為0．8—
1．2mm。過厚的玻片吸收紫外光較多，而且對暗視場聚光鏡效果有
影響。載玻片應(yīng)當光潔，無油跡，無劃痕。
  蓋玻片宜采用鍍膜玻璃。一般表面鍍有氟化鎂等若干層對不同
波長的光起不同干涉作用的物質(zhì)，這樣可以透過熒光而反射激發(fā)光
。反回的激發(fā)光能再次激發(fā)標本，增強熒光的能量。
  標本取樣不能太厚，盡量薄一些，散開要均勻，這樣能使標本
得到充分、均勻的激發(fā)。盡量減少標本重疊，互相掩蓋，否則因激
發(fā)不均勻，影響判斷。
  標本封載劑必須采用無熒光性能，無色透明的物質(zhì)。通常使用
分析純甘油緩沖液，其中甘油體積90％，磷酸鹽緩沖水10％，pH值
為7．2—8．5。固定蓋玻片時，可用含量1％的明膠水，蓋上玻片
后，以10％的福爾馬林凝固。使用油鏡觀察時，注意不能使用普通
的香柏油。因為香柏油在紫外光照射下有輕微熒光效應(yīng)，干涉觀察
。此時可在香柏油中拌入適量的熒光熄滅劑如硝基苯，減少香柏油
的熒光效應(yīng)。有條件時，最好使用純檀香油，本身無固有熒光。用
純甘油緩沖液也可代用，但折射率略低一些，宜配用甘油浸液物鏡
。
  對鏡頭的要求
  為了提高熒光圖像的亮度，熒光顯微鏡的物鏡盡可能采用較大的
數(shù)值孔徑NA，同時，物鏡和高倍目鏡中，透鏡膠合不能使用加拿大
樹脂膠。因為加拿大樹脂膠主要成分冷杉樹脂在紫外線光激發(fā)下會
發(fā)生輕度的熒光效應(yīng)，干擾觀察效果。所以熒光顯微鏡所用鏡頭的
透鏡膠合，一般用聚乙烯醇一類的合成膠。這種鏡頭在普通顯微鏡
均可應(yīng)用。

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