熒光顯微鏡使用的重要注意事項(xiàng)
一、操作指南:
(1)一般需要關(guān)掉實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的電燈,開顯微鏡汞燈。需要延長(zhǎng)汞燈的使用壽命,就要汞燈開啟不到請(qǐng)?jiān)?5-30分鐘后再關(guān)閉汞燈。
下一次打開汞燈電源的距離這次關(guān)閉相隔時(shí)間應(yīng)該30分鐘以上,最好要禁止反復(fù)開關(guān)。
(2)根據(jù)樣品熒光素來挑選適合的熒光組件。利用減光片對(duì)熒光強(qiáng)度靈活進(jìn)行調(diào)整(熒光強(qiáng)度是不可調(diào),
需要利用各種減光片來實(shí)時(shí)的調(diào)整觀測(cè)效果)
(3)不同的激發(fā)光波長(zhǎng)應(yīng)該選擇不同的濾光片,常有綠、藍(lán)、紫、紫外等
(4)放置染色切片,調(diào)整好合適視野,可以先在明場(chǎng)下調(diào)校要觀察的位置再使用熒光。一般熒光狀態(tài)觀測(cè)標(biāo)本,
標(biāo)本熒光會(huì)很快的的衰減,所以避免較長(zhǎng)時(shí)間的熒光下觀測(cè),
(5)在實(shí)驗(yàn)前確認(rèn)好是否需要拍片,并且確認(rèn)照相機(jī)實(shí)驗(yàn)前已裝好節(jié)省時(shí)間。
(6)使用熒光顯微鏡結(jié)束后,關(guān)掉所有電源,而且需做好使用記錄。
二、主要事項(xiàng):
(1)嚴(yán)格遵循熒光顯微鏡使用說明書要求使用,禁止隨意改變使用步驟。
(2)應(yīng)該在暗室中操作。在暗室內(nèi),等待眼睛完全適應(yīng)暗室,
再開始觀察標(biāo)本。,開啟電源,啟動(dòng)高壓汞燈5~15分鐘
(3)為避免紫外線對(duì)眼睛損害。再調(diào)校光源同時(shí)佩戴防護(hù)眼鏡。
(4)觀測(cè)時(shí)間每次以1~2小時(shí)最佳,超過100分鐘,熒光減弱;標(biāo)本受紫外線照射3~5min后,熒光也會(huì)明顯衰退或褪色;
激發(fā)光長(zhǎng)時(shí)間的照射,會(huì)發(fā)生熒光的衰減和淬滅現(xiàn)象;
(5)熒光顯微鏡的汞燈使用時(shí)間有限,實(shí)驗(yàn)標(biāo)本最好集中檢測(cè),延長(zhǎng)光源使用時(shí)間。溫度高時(shí),應(yīng)配備降溫系統(tǒng),
新?lián)Q燈泡要進(jìn)行記錄使用記錄。
(6)觀測(cè)立刻觀測(cè)在標(biāo)本染色后,熒光會(huì)隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸減弱。但是將標(biāo)本放置于聚乙烯塑料袋中4℃保存,
可延長(zhǎng)熒光減弱速度
(7)熒光亮度標(biāo)準(zhǔn):為四級(jí),即“—”——無或可見微弱自發(fā)熒光?!?”——僅能見明確可見的熒光。“++”——可見有明亮的熒光。“+++”——可見耀眼的熒光。
(8)使用玻片等載體,厚度必須均勻,沒有明顯自發(fā)熒光,如使用油鏡,保證鏡油必須是無熒光鏡油。
(9)裝穩(wěn)壓器,電壓的不穩(wěn)定將降低汞燈的的使用時(shí)間,并影響鏡檢結(jié)果。
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