2月13日，湖北省衛(wèi)健委官網(wǎng)發(fā)布的最新疫情情況，將臨床診斷病例數(shù)納入確診病例數(shù)進行公布。通報顯示，湖北省新增新冠肺炎病例14840例(含臨床診斷病例13332例)。

何為臨床診斷病例?又為什么會有臨床確診病例?據(jù)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院院長王辰分析，現(xiàn)在對于病毒核酸的檢測能力在不斷提升，但不同的試劑之間精準程度有差別，并不是所有患者都能檢測出核酸陽性，所以有大量看著流行病學(xué)史上、接觸史上像是，臨床癥狀也像是，但是核酸未能得到確證的病人，現(xiàn)在被列為疑似病例，建議在武漢出現(xiàn)這樣的病人，應(yīng)當可以列為臨床診斷病例，因為核酸對于已確診的病人陽性率也只在30%~50%之間，因此設(shè)出臨床診斷這個檔級是非常有必要的。

為什么核酸檢測結(jié)果會出現(xiàn)假陰性?不同企業(yè)的試劑檢測產(chǎn)品有何異同?今天的科技日報也發(fā)表文章：《新冠病毒核酸檢測出現(xiàn)假陰性到底是什么影響了準確率》，詳細分析了為什么核酸檢測結(jié)果會出現(xiàn)假陰性?不同企業(yè)的試劑檢測產(chǎn)品有何異同?

擴增讓新冠病毒現(xiàn)形

大多數(shù)生物體的遺傳物質(zhì)是DNA，只有少數(shù)病毒的遺傳物質(zhì)是RNA，例如這次的新冠病毒。為了知道人體內(nèi)是否含有新冠病毒，需要采集人體樣本進行檢測。根據(jù)《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案(試行第五版)》，在鼻咽拭子、痰、下呼吸道分泌物、血液、糞便等標本中可檢測出新冠病毒的RNA。

但實際上，樣本中病毒的遺傳物質(zhì)極其微量。而且與DNA相比，RNA極易降解。問題來了，樣本中的RNA病毒量少又不穩(wěn)定，怎樣才能逼這只妖怪“現(xiàn)形”呢?

逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(RT-PCR技術(shù))就是“照妖鏡”。該技術(shù)能將病毒的RNA合成為DNA，然后對合成DNA進行擴增，再通過熒光探針檢測這些擴增產(chǎn)物。熒光探針就像雷達一樣，一旦鎖定目標就會發(fā)出信號。

擴增產(chǎn)物越多，累積的熒光信號就越強。核酸檢測就是通過檢測熒光信號的累積來確定樣本中是否有病毒核酸。目前，獲批的新冠病毒核酸檢測試劑使用的均是RT-PCR技術(shù)。

中國工程院院士、清華大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程系講席教授程京接受采訪時表示，除RT-PCR這一熱循環(huán)擴增技術(shù)之外，等溫核酸序列擴增技術(shù)(NASBA技術(shù))和環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)(LAMP技術(shù))等恒溫擴增技術(shù)也在分子診斷領(lǐng)域中扮演著重要角色。

“目前，獲批的核酸檢測試劑產(chǎn)品都是單一指標的，即只能用于檢測新冠病毒這一種病毒?！背叹┨寡裕瑢τ诖罅恳伤撇∪藖碚f，這類檢測試劑作用有限，臨床上急需能一次性檢測多個病原體的檢測試劑產(chǎn)品。

為何核酸檢測結(jié)果會出現(xiàn)假陰性?

程京在采訪中表示，這可能由多種因素導(dǎo)致?！笆紫?，試劑盒研發(fā)需要十幾種關(guān)鍵化學(xué)原材料，比如酶、合成DNA等。不同企業(yè)選擇的原材料供貨方不同，酶的活性、DNA的純度就會有差別，這都會影響到核酸檢測試劑的準確度?！背叹┱f。

“而在試劑盒產(chǎn)品研發(fā)過程中，原材料制備、生產(chǎn)工藝選擇、研發(fā)人員能力、技術(shù)手段使用，每一個環(huán)節(jié)都有可能產(chǎn)生偏差，誤差累計起來也會導(dǎo)致試劑盒產(chǎn)品靈敏度出現(xiàn)差別。”程京說。

再者，取樣過程不規(guī)范也會影響后續(xù)的分離和測定結(jié)果。以使用最普遍、操作簡單的咽拭子采集為例，由于咽部的新冠病毒含量少，所以有可能造成漏檢?！半m然只是在咽部拿棉簽劃幾下，但如果沒有良好的專業(yè)實操技能，樣本的采集部位和手法可能不符合規(guī)范，就可能直接影響檢測結(jié)果?！背叹┍硎?，此外，剛被感染的病人因體內(nèi)帶毒數(shù)量有限，也可能出現(xiàn)檢測結(jié)果為陰性。

送樣本時必須采取冷鏈運輸，如果在運送過程中樣本受損，也會影響檢測結(jié)果。

核酸檢測出現(xiàn)假陰性的問題，一度引發(fā)用CT影像代替核酸檢測試劑確診新冠肺炎的呼聲。近日發(fā)布的《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案(試行第五版)》中，在“疑似病例”和“確診病例”之外新增了一個“臨床診斷病例”，并將“疑似病例具備肺炎影像特征者”作為其診斷標準(只限于湖北省之內(nèi))，這也意味著CT影像結(jié)果成了“臨床診斷病例”的判定依據(jù)。

浙江大學(xué)附屬第二醫(yī)院放射科主任醫(yī)師、中國醫(yī)師協(xié)會放射醫(yī)師分會呼吸專委會主任委員張敏鳴教授曾指出，CT影像結(jié)果陽性也存在誤診可能。他還提到，如果都去做CT檢查而忽略防護，容易造成交叉感染。專家表示，無論是CT檢查還是核酸檢測，都不能保證絕對的準確性。

“盡管核酸檢測存在假陰性問題，但核酸檢測是病原診斷的一個依據(jù)，也是目前確診的最重要依據(jù)?！眹裔t(yī)療專家組成員、北京大學(xué)第一醫(yī)院感染疾病科主任王貴強表示。