elisa試劑盒原理:
人血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟

采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人MART/Melan-A抗體包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的MART/Melan-A與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人MART/Melan-A抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素?？谷薓ART/Melan-A抗體與結(jié)合在包被抗體上的人MART/Melan-A結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物（TMB），TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值，MART/Melan-A濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中MART/Melan-A的濃度。

應(yīng)用范圍：血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體（本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科研及非臨床用途）

研究領(lǐng)域：炎癥研究、神經(jīng)生物學(xué)、新陳代謝、信號(hào)通路、免疫學(xué)、傳染病、其他研究。

其他產(chǎn)品種屬：人ELISA試劑盒 小鼠ELISA試劑盒 大鼠ELISA試劑盒 兔ELISA試劑盒 倉鼠ELISA試劑盒 牛ELISA試劑盒 豚鼠ELISA試劑盒 魚ELISA試劑盒 雞ELISA試劑盒 馬ELISA試劑盒 豬ELISA試劑盒犬ELISA試劑盒 羊ELISA試劑盒 昆蟲ELISA試劑盒 植物ELISA試劑盒

ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的采集、處理和保存

 能夠應(yīng)用ELISA 實(shí)驗(yàn)的樣本種類很多，有血清，血漿，細(xì)胞上清，細(xì)胞裂解液，尿液，關(guān)節(jié)滑液，腦脊液，肺泡灌洗液，各種組織的組織勻漿；采集和處理的方式都不相同。下面就列出了 收集的給類樣本的采集、處理和保存方式。方法大多出自文獻(xiàn)和試劑盒說明書，部分方法驗(yàn)證過，但有的方法并沒有實(shí)際操作過，所以，以下方法僅供參考。

 一、ELISA實(shí)驗(yàn)中血清的采集、處理和保存；

1、 真空采血針采集2ml新鮮血液，加入無菌試管中；

2、 采血后室溫靜置1小時(shí)；

3、 將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心10min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。

4、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>

2-8℃下，可放置保存24-48小時(shí)；

-20℃下，可放置保存1個(gè)月；

-70℃下，可放置保存6個(gè)月；

5、 根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。 

大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的 ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。此外還應(yīng)避免細(xì)菌污染，因?yàn)榫w中可能含有含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。血清標(biāo)本宜在新鮮 時(shí)檢測(cè)。如在冰箱中保存過久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。

 二、ELISA實(shí)驗(yàn)中血漿的采集、處理和保存；

1、 真空采血針采集2ml新鮮血液，加入無菌試管中；

2、 按1:9加入抗凝劑（EDTA、草酸鈉、肝素、枸櫞酸鈉），30分鐘內(nèi)于冰上分離血漿以減少血小板的污染；（也可以直接用抗凝管采集）；

3、 將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心5min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。

4、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>

2-8℃下，可放置保存24-48小時(shí)；

-20℃下，可放置保存1個(gè)月；

-70℃下，可放置保存6個(gè)月；

5、 根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。 請(qǐng)注意指標(biāo)說明書上對(duì)于抗凝血?jiǎng)┦欠裼刑厥庖?，建議使用EDTA。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。

注意事項(xiàng)：制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑EDTA,抗凝不完全的標(biāo)本因纖維蛋白原干擾而造成假陽性。

 三、ELISA 實(shí)驗(yàn)中尿液的采集、處理和保存；

1、 采集尿液樣本500ul，加入無菌試管中；

2、 將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心10min，，將離心好的樣本留上清，棄下面沉淀。

3、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>

2-8℃下，可放置保存24-48小時(shí)；

-20℃下，可放置保存1個(gè)月；

-70℃下，可放置保存6個(gè)月；

4、 根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。

 四、ELISA 實(shí)驗(yàn)中腦脊液的采集、處理和保存；

1、采集腦脊液樣本，加入無菌試管中；

2、將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心10min，，將離心好的樣本留上清，棄下面沉淀。

3、取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>

2-8℃下，可放置保存24-48小時(shí)；

-20℃下，可放置保存1個(gè)月；

-70℃下，可放置保存6個(gè)月；

4、根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。

 五、ELISA 實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞上清液的采集、處理和保存；

1、采集細(xì)胞培養(yǎng)上清液500ul，加入無菌試管中；

2、將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心10min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。

3、取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>

2-8℃下，可放置保存24-48小時(shí)；

-20℃下，可放置保存1個(gè)月；

-70℃下，可放置保存6個(gè)月；

4、根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。