問題 1: 您需要 HBR嗎?
如果您符合以下描述,HBR 值得您一試!
正在研發(fā)夾心法免疫試劑盒
遭遇過假陽性樣本的困擾
需鑒別樣本為真陽性還是 假陽性
檢測結(jié)果受到HAMA或異嗜性抗體干擾
需區(qū)分假陽性樣本的干擾類別
需要一個通用阻斷劑用于各種檢測系統(tǒng)
問題 2: 什么是異嗜性抗體干擾?
病人血清/血漿中的內(nèi)源性異嗜性抗體,可結(jié)合其他種屬的免疫球蛋白,包括作為免疫分析試劑的異源抗體。這些抗體會干擾免疫檢驗體系,造成與實際分析物濃度無關(guān)的虛高檢測值,可能導(dǎo)致誤診。 異嗜性抗體可以影響各種檢測,但對夾心法免疫檢驗影響zui大。
問題 3: 異嗜性抗體干擾的原理?
夾心法免疫檢測至少使用兩種對抗原不同表位的抗體,捕獲抗體包被固相,標(biāo)記抗體游離在溶體中。正常情況下,樣本中的抗原連接兩種抗體,標(biāo)記抗體結(jié)合到固相的量與樣本中的抗原濃度成正比。
異嗜性抗體在抗原不存在的情況下,也可以橋連兩種抗體,使得結(jié)合到固相的標(biāo)記抗體濃度升高,造成假陽性結(jié)果。
問題 4: HBR如何超越傳統(tǒng)的阻斷方法?
傳統(tǒng)的被動阻斷法,使得非特異型物質(zhì)(鼠IgG, 鼠血清,非特異性的單克隆抗體,聚合IgG等)阻斷人類異嗜性抗體的結(jié)合。所有方法的阻斷效果皆依賴人類異嗜性抗體的親和力。通常人類異嗜性抗體的親和力 K值在105-106范圍內(nèi)。 HBR 以完全不同的方法來實現(xiàn)阻斷。 HBR能特異性結(jié)合人類異嗜性抗體,產(chǎn)生位阻效應(yīng),阻止干擾。 HBR特異性結(jié)合物的親和力K值約為109。
HBR的特異性,加上千倍于傳統(tǒng)方法的親和力,使得HBR具有以下優(yōu)點,超越傳統(tǒng)阻斷的方法:
使用HBR,只需要小量蛋白質(zhì)作封閉,不減弱檢信號
HBR比傳統(tǒng)方法能阻斷更多假陽性
HBR可阻斷抗所有種屬 (anti-rabbit, anti-goat, anti-sheep, and anti-mouse)
HBR可阻斷抗鼠單克隆抗體的所有亞型 (如anti-mouse IgG1, anti-mouse IgG2等)
使用HBR,不限定于某些檢測。可作為通用試劑使用
問題 5: 異嗜性干擾的普遍性?
現(xiàn)在已知干擾因素是免疫球蛋白,目前已發(fā)現(xiàn)IgG和IgM異嗜性抗體
異嗜性干擾發(fā)生率很高。依病人人口而別,有高達40%發(fā)生率的報道。至少有10%的案例有據(jù)可考。
不同樣本的干擾程度不同,同一病人樣本的干擾程度也會隨時間而變化
異嗜性抗體并非針對特定種屬,可與多種動物抗體結(jié)合 。
異嗜性抗體并非單一和特異的實體而是一個多成分的現(xiàn)象,包含多種可造成干擾的抗體,因此干擾并不限于基于單抗的檢測體系
干擾可能由所用抗體的Fc片段介導(dǎo)。EIA似乎較RIA更易受到干擾。
問題 6: 異嗜性抗體從何而來?
有許多可誘發(fā)病人體內(nèi)產(chǎn)生異嗜性抗體的因素,其中包括
動物接觸馴獸師,獸醫(yī)
動物產(chǎn)品接觸(烹飪)
注射疫苗
輸血
自身免疫疾病
母嬰傳遞類風(fēng)濕因子也可產(chǎn)生異嗜性抗體效果
動物輔助治療 (胸腺細胞丶羊細胞,胚胎細胞)
特定食物 (奶酪)
心肌病變
秘方藥物
透析
腸胃炎
問題 7: 異嗜性抗體和HAMA的區(qū)別?
異嗜性抗體是一個通稱丶用于描述能夠結(jié)合動物抗體從而干擾免疫分析的所有人源抗體。 HAMA是異嗜性抗體中的一種,結(jié)合鼠源抗體。
問題 8: 怎樣確認異嗜性干擾?
將樣本倍數(shù)稀釋后再檢測,若測值呈非線性,說明存在干擾物。 同一樣本采用不同檢測方法,若結(jié)果大相徑庭說明存在干擾物。同親和色譜法去除樣本中的目標(biāo)分析物、再常規(guī)檢測丶若檢測信號未消失,說明存在干擾物。
問題 9: 什么是阻斷劑?
阻斷劑是一種生物制劑,加入免疫檢驗體系中,可結(jié)合異嗜性抗體,從而有效防止非分析物介導(dǎo)的抗體橋連。目前有兩種主要的阻斷劑:
HAMA類阻斷劑
HAMA類阻斷劑只阻斷一種人抗特定動物抗體的活性 (如人類抗鼠抗體), 通常為非針對目標(biāo)分析物的正常血清,正常IgG、單克隆抗體等。這類"被動阻斷劑"被過量地加入樣本
中,使得樣本中的種屬特異性抗體優(yōu)先于低濃度的分析物與之結(jié)合。這類試劑用途有限,因為僅能排除異嗜性干擾的一部分,而異嗜性干擾涉及許多成分。人們經(jīng)常發(fā)現(xiàn),鼠lgG在一個雙單抗夾心法檢測體系中,只能糾正部分異嗜性干擾。
真正的異嗜性抗體阻斷劑
這種制劑可排除各種異嗜性干擾, 內(nèi)含"主動阻斷劑",對造成干擾的異嗜性抗體具特異性結(jié)合力只需要低濃度即可阻斷,將影響減到zui低。
問題 10: 理想的異嗜性抗體阻斷劑的特點
必須能夠糾正任何樣本中的干擾,不管干擾是種屬特異性抗體還是類風(fēng)濕因子造成的
必須是低濃度,能的,不會產(chǎn)生劑量-反應(yīng)曲線
不應(yīng)影響真陽性樣本的稀釋線性
必須有很好的重復(fù)性,無批間差
必須長期穩(wěn)定
必須經(jīng)濟實用
必須簡便易用,可直接添加到免疫試劑中,
無需額外試劑或樣本處理步驟.
問題 11: Scantibodies 的HBR 特性?
Scantibodies HBR是專為對抗免疫檢測中異嗜性干擾問題設(shè)計的產(chǎn)品,是用來特異性中和異嗜性抗體的具有獨特結(jié)構(gòu)的免疫球蛋白。純度高于95%
不同于其他廠家供應(yīng)的非特異性"被動阻斷劑"(過量使用以確保優(yōu)先于分析物結(jié)合異嗜性抗體),Scantibodies HBR是靶向針對異嗜性抗體的"主動阻斷劑",有效中和其干擾
可阻斷的假陽性類型包括:
1)人抗鼠抗體(HAMA)
2)人抗山羊抗體
3)人抗綿羊抗體
4)人抗兔抗體
5)類風(fēng)濕因子
廣泛特異性使得Scantibodies HBR可作為"通用試劑",在各種常見的雙抗體試劑盒中均可使用
Scantibodies HBR為高特異性高純度的試劑,極低濃度即夠使用,只需正常小鼠IgG用量的百分之一或千分之一,對檢測信號無不良影響
Scantibodies HBR不干擾人血清中分析物的加入或還原
Scantibodies HBR不干擾真正陽性病人樣本的稀釋線性
Scantibodies HBR批間重復(fù)性極高
Scantibodies HBR效期5年品質(zhì)穩(wěn)定
Scantibodies HBR的使用成本低于鼠IgG或鼠血清
Scantibodies HBR可直接加入到檢測緩沖液或結(jié)合液等
Scantibodies 的 HBR 是高純度的IgG制劑,以液體形式供應(yīng),不含防腐劑。產(chǎn)品附以下說明:純化方法、純度(SDS)、緩沖液組分、保存條件、效期、外觀等。
HBR 使用步驟:
1.用水槽迅速解凍HBR后,輕輕倒置搖勻,直接加HBR到本實驗樣本,使其達到結(jié)合濃度。我們建議每個病人的采樣使用從0.040 mg (40 g)/ml 的樣品 - 1.0 mg/ml的樣品之間。因?qū)嶒灧治鑫镉兴煌?量可以依您的實驗分析物特性而做調(diào)整.
2.用稀釋緩沖液將上述HBR 結(jié)合液補足到100ml。
3.混勻。現(xiàn)每100ml準(zhǔn)備液中含40ug HBR。向每孔/管中加入準(zhǔn)備液100uL.
4. 繼續(xù)試驗的其他步驟。此為建議的 HBR起始濃度,客戶需根據(jù)其檢驗類型和樣本的異嗜性干擾情況進行優(yōu)化。如果您是鼠單抗的系統(tǒng),您可以從HBR-1
開始測試。如果HBR-1不是很理想或者使用濃度太高,您可以試HBR-6 , HBR-9,或者其他HBR 。如果是羊多抗系統(tǒng),您可以用HBR plus, HBR-11, HBR-21, and HBR-25。如果是兔多抗系統(tǒng),您可以用HBR -11, HBR-22, and HBR-26。HBR-1, HBR-3, HBR-11, HBR 27,HBR 28,HBR-Plus是比較相類似。 同樣的HBR-6和 HBR-9 近似。 HBR-20,HBR-21,HBR-22, HBR-23, HBR-24,HBR-25,HBR-26 是較雷同。 如您沒有時間和病患小樣的限制的話,我們還是建議您測試每一種HBR,找到zui適合您的試劑和zui大效能的HBR。有時HBR彼此之間的混合也有令人意外
的效果。
產(chǎn)品訂購:
貨號
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
3KC533
Heterophilic Blocking Reagent (HBR)
20 mg/ml
3KC534-075
Heterophilic Blocking Reagent (HBR)
2mg/ml
3KC534
Heterophilic Blocking Reagent 1 (HBR 1)
2mg/ml
3BX484
HBR-1 , Non Purified
Non Purified
3KC535
HBR-2
Purified
3KC701
HBR-3
Purified
3KC542
HBR-6
Purified
3KC564
HBR-9
Purified
3KC565
HBR-11
Purified
3KC545
HBR-Plus
Purified
3BM245
Mouse lgG, Purified
Purified
3BM845
Mouse lgG, Purified, Concentrated
Purified
3IX761
Nonspecific Antibody Blocking Tube (NABT)
Purified
3IX762
Heterophilic Blocking Tubes (HBT)
Purified
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北京博蕾德生物科技有限公司
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