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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-09-02  來源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):537
核心提示:omega原裝 膠回收kit 100T/盒貨號:貨號:規(guī)格:100T/盒商品貨號:商品品牌:規(guī)格基本售價:選擇規(guī)格D2500-50TOmega50T380.00元 E.Z.N.A Gel Extraction Kit采用硅膠柱純化技術(shù),適合從各種類型各種濃度的瓊脂糖凝膠中回收100bp-20kb的DNA片段,回收率可達到60-70%,可直接應用于酶促連接反應、PCR擴增、酶切以及標記等實驗。 此外,該試劑盒還可以用從于PCR產(chǎn)物,酶切產(chǎn)物中直接純化DNA。將目的DNA片段從瓊脂糖凝膠中切下,加入Bin

omega原裝 膠回收kit 100T/盒
貨號:貨號:
規(guī)格:100T/盒

商品貨號:商品品牌:規(guī)格基本售價:選擇規(guī)格D2500-50TOmega50T380.00元 

     E.Z.N.A Gel Extraction Kit采用硅膠柱純化技術(shù),適合從各種類型各種濃度的瓊脂糖凝膠中回收100bp-20kb的DNA片段,回收率可達到60-70%,可直接應用于酶促連接反應、PCR擴增、酶切以及標記等實驗。

    此外,該試劑盒還可以用從于PCR產(chǎn)物,酶切產(chǎn)物中直接純化DNA。將目的DNA片段從瓊脂糖凝膠中切下,加入Binding Buffe水浴溶解凝膠,而后轉(zhuǎn)移至HiBind 離心柱上離心結(jié)合DNA,經(jīng)兩步簡單洗滌,終用Elution Buffer洗脫DNA。

 

快速--可以在15分鐘內(nèi)完成純化工作
可靠--適的緩沖液保證DNA純度和高回收率
安全--無須接觸有害的有機物抽提
高質(zhì)--純化的DNA適合于各種應用

片段大--可回收大于10kb的DNA片段

 

膠回收試劑盒操作步驟(omega)

1. 配制瓊脂糖EB凝膠,電泳以分離DNA片段。任何類型或等級的瓊脂糖都可以使用。

  我們強烈的推薦使用新鮮的TAE/TBE電泳緩沖液。不要重復使用電泳緩沖液,舊的電泳緩沖液PH會增加而降低DNA的回收產(chǎn)量;

2. 電泳足夠時間后,在紫外燈下小心地把所需的DNA的片段切下來。并盡量去除多余的凝膠。

  注意:DNA在紫外燈下的曝光的時間不要超過30秒,同時在紫外燈下操作的時候一定要戴保護眼鏡。

3. 稱取空離心管的重量,切下帶目的片段的凝膠裝在1.5ml離心管中并稱其重量,求出凝膠塊的重量,近似地確定其體積。一般情況下,凝膠的密度為1g/ml,于是凝膠的體積與重量的關(guān)系可按下面換算:凝膠薄片的重量為0.2g 則其體積為0.2ml;加入等倍凝膠體積的Binding Buffer,把混合物置于55℃~65℃水浴中溫浴7min至凝膠完全融化,其間每隔2-3分鐘混勻一次;

  重要提醒:在凝膠完全溶解之后,注意凝膠-Binding Buffer混合物的pH值。如果其pH值大于8的話,DNA的產(chǎn)量將大大減少。觀察混合物的顏色,如果是橙色或紅色,則要加入5 l 濃度為5 M,pH為5.2的醋酸鈉,以調(diào)低其pH值。經(jīng)過這一調(diào)節(jié),該混合物的顏色將恢復為正常的淺黃色。一般情況下,使用新鮮的電泳緩沖液,凝膠-Binding buffer混合物的PH值的不會升高;

4. 轉(zhuǎn)移700 l的DNA-瓊脂糖溶液到一個HiBindTM DNA柱子,并把柱子裝在一個干凈的2ml收集管內(nèi),室溫下,10,000 g離心1min,棄去液體。

  一個HiBind DNA柱子多可容納700 l的溶液,如果DNA-瓊脂糖混合物的體積大于700 l,可先轉(zhuǎn)移700 l溶液至柱子,離心完后,將余下的溶液繼續(xù)加上柱子上。但是每一個HiBindTM柱子多可以結(jié)合25~30 g DNA。如果預期產(chǎn)量較大,則把樣品分別加到合適數(shù)目的柱中。

5. 將柱子重新套回收集管中,加300 l Binding Buffer至HiBind DNA 柱子中;室溫下,10,000 g離心 1分鐘,去棄濾出液;這一步相當關(guān)鍵,不要忽略此步。

6. 將柱子重新套回收集管中,加入700 l SPW Wash buffer至HiBind DNA柱子中,室溫下,10,000 g離心1分鐘,去棄濾出液;注:SPW Wash buffer在使用前必須按瓶子標鑒要求用無水乙醇進行稀釋。

7. 將柱子重新套回收集管中,重復加入700 l SPW Wash buffer至HiBind DNA柱子中,室溫下,10,000 g離心1分鐘,去棄濾出液;

8. 棄去液體,將空柱子重新套回收集管中,10,000 g離心1min以甩干柱基質(zhì)殘余的液體。

  這步可以去除柱子基質(zhì)上殘余的乙醇,不要省略此步―――對得到好的DNA產(chǎn)量是十分重要的。

9. 把柱子裝在一個干凈的1.5ml離心管上,加入30~50 l洗脫液或滅菌水上柱子膜上,10,000 g離心1分鐘,離心管中的溶液就是純化的DNA產(chǎn)物,保存于-20度。

  如果再洗脫一次的話可以把殘余的DNA洗脫出來,不過那樣的濃度就會較低。

DNA的產(chǎn)量及質(zhì)量:

  把純化產(chǎn)物的樣品稀釋一定的倍數(shù)后,分別在260nm和280nm下測其光吸收值,回收得到的DNA的濃度可按以下公式來計算: DNA濃度=光吸收260 50 稀釋倍數(shù) g/ml

  長度大于500bp的片段通常能純化得到80%的產(chǎn)量。 而50bp~500bp的帶則可達到55%~80%的回收率。(光吸收260/光吸收280)的比率是核酸純度的一個標記。如果此值1.8,則意味著核酸的純度>90%。另一方面,如果純化產(chǎn)物的產(chǎn)量較低時,可以用瓊脂糖EB電泳估算產(chǎn)物的濃度。

omega原裝 膠回收kit 100T/盒訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。 
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。 
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


omega原裝 膠回收kit 100T/盒運輸說明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶專用的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送至客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶專用冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶專用的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送至客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達您的手中。

 

 
關(guān)鍵詞: 凝膠 柱子 離心 純化 瓊脂
 
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