磷酸鹽緩沖液(簡稱PBS)的是生物化學(xué)中常用的一種阻礙溶液pH變化的緩沖溶液，這種由鹽溶液中含有氯化鈉，磷酸鹽，磷酸鹽，氯的化的鉀和磷酸鉀組成。組份濃度：137 mM 氯化鈉，2.7 mM 氯的化的鉀，10 mM 磷酸二氫鈉，2 mM 磷酸二氫鉀。本文總結(jié)了PBS和D-PBS溶液的配制方法。

1、常規(guī)PBS磷酸鹽緩沖液

組成成份

磷酸二氫鉀 34g

1mol/L氫氧化鈉溶液 175ml

蒸餾水 825ml

PH 7.2

配置:先將磷酸鹽溶解于500mL蒸餾水中，用1mol/L氫氧化鈉溶液校正pH后，再用蒸餾水稀釋至1000mL。

稀釋液

取儲存液1.25mL，用蒸餾水稀釋至1000mL。分裝每瓶100mL或每管10mL，121℃高壓滅菌15min。

用途

主要用于一些化學(xué)實(shí)驗(yàn)中不影響實(shí)驗(yàn)反應(yīng)的情況下調(diào)節(jié)pH值，以便讓實(shí)驗(yàn)的化學(xué)反應(yīng)在zui佳條件下進(jìn)行。部分用于食品或是飼料行業(yè)加工，如食品或者飼料真菌毒素檢驗(yàn)中Elisa方法的洗板應(yīng)用或者食品微生物檢驗(yàn)中的稀釋緩沖液。

2、PBS Buffer的配制具體步驟

組份濃度：137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4

配制量：1 L

配制方法：

1. 稱量下列試劑，置于1 L燒杯中。

NaC l8g

KCl 0.2g

Na2HPO4 1.42g

KH2PO4 0.27g

2. 向燒杯中加入約800 ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?/p>

3. 滴加濃鹽酸將pH值調(diào)節(jié)至7.4，然后加入去離子水將溶液定容至1 L。

4. 高溫高壓滅菌后，室溫保存。

注意：上述PBS Buffer中無二價陽離子，如需要，可在配方中補(bǔ)充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。

3、D-PBS是杜氏磷酸緩沖液

全稱為：Dulbecco s Phosphate Buffered Saline

組分 分子量 濃度 (gm/L) 摩爾濃度 (mM)

氯的化的鉀 (KCl) 75 0.20 2.67

磷酸二氫鉀 (KH2PO4) 136 0.20 1.47

氯化鈉 (NaCl) 58 8.00 138.00

磷酸氫二鈉 (Na2HPO4) 142 1.15 8.10

pH值為7.4。

（1）、杜氏磷酸鹽緩沖液(Dulbecco s Phosphate Buffered Saline，D-PBS)也是一種磷酸鹽緩沖液，與常規(guī)PBS的不同之處在于磷酸鹽的含量稍低些，并含有鈣鎂離子。D-PBS主要用于胚胎學(xué)方面的研究，多用于胚胎的沖洗液、凍存液和培養(yǎng)液。

（2）、D-PBS配方：氯化鈉8g，氯的化的鉀0.2g，磷酸氫二鈉1.15g，磷酸二氫鉀0.2g，氯化鈣0.1g，含6個結(jié)晶水的氯化鎂0.1g溶于1L ddH2O中。

（3）、以上配方為含有鈣鎂離子的D-PBS，如不加氯化鈣和氯化鎂，即為無鈣鎂的D-PBS。

（4）、在以上配方的基礎(chǔ)上，還可以加入葡萄糖、丙酮酸鈉等，以更利于培養(yǎng)物的生長。

D-PBS是杜氏磷酸緩沖液，也是一種磷酸鹽緩沖液，與常規(guī)磷酸緩沖液zui大的不同點(diǎn)在于磷酸鹽的含量稍低些，根據(jù)是否含鈣鎂分為兩種即D-PBS w/鈣 鎂和D-PBS w/o 鈣 鎂。

關(guān)注本網(wǎng)官方微信 隨時閱讀專業(yè)資訊