PCR實(shí)驗(yàn)里最怕出現(xiàn)什么問(wèn)題？當(dāng)然是辛苦做出來(lái)的結(jié)果假陽(yáng)性了。

當(dāng)PCR出現(xiàn)假陽(yáng)性的時(shí)候，我們常常會(huì)考慮是不是引物/Mix/槍等等污染模板，然后一一排查，勞心勞累費(fèi)時(shí)費(fèi)力，有時(shí)還是找不到原因，簡(jiǎn)直要崩潰。

這里我覺(jué)得要延伸思考一下，這些試劑儀器到底為什么會(huì)被污染了呢？其實(shí)是核酸氣溶膠污染。 

離心機(jī)離心/劇烈地?fù)u動(dòng)反應(yīng)管/PCR開(kāi)蓋/吸樣時(shí)及移液器的反復(fù)吸樣等等，會(huì)產(chǎn)生空氣與液體表面摩擦的，都會(huì)產(chǎn)生核酸氣溶膠，也就是實(shí)驗(yàn)室里（或移液槍內(nèi)）彌漫著含有長(zhǎng)短不一核酸片段的小水珠或小顆粒，這些小顆粒沉降（打到）到空白樣中導(dǎo)致最后擴(kuò)增出了條帶。

可想而知，這些核酸小液滴還會(huì)落到實(shí)驗(yàn)臺(tái)面/PCR儀/移液槍/槍頭槍盒子等等地方，如果我們不注意，這些核酸小液滴就會(huì)日積月累地積聚，這樣做實(shí)驗(yàn)就特別出現(xiàn)問(wèn)題比如PCR假陽(yáng)性。

那么我們平常做實(shí)驗(yàn)或者實(shí)驗(yàn)室管理上核酸氣溶膠（也就是核酸小液滴）產(chǎn)生了巨大的污染究竟該怎么辦呢？

大面積核酸污染清除操作方法：

（1）對(duì)污染區(qū)域使用核酸氣溶膠污染清除劑（PCR Cleaner）進(jìn)行大面積處理，包括：地板、墻面、天花板、門(mén)、窗戶(hù)等地方，同時(shí)加大通風(fēng)量（內(nèi)循環(huán)無(wú)用，盡可能外循環(huán)）；

（2）對(duì)污染區(qū)域內(nèi)的設(shè)備使用核酸氣溶膠污染清除劑（PCR Cleaner）進(jìn)行反復(fù)處理；對(duì)超凈臺(tái)等含有空氣過(guò)濾系統(tǒng)的設(shè)備，請(qǐng)更換過(guò)濾網(wǎng)；對(duì)移液器等污染設(shè)備采用核酸氣溶膠污染清除劑（PCR Cleaner）進(jìn)行清洗，高溫滅菌；

（3）待污染區(qū)域及設(shè)備器件清理完成后，使用紫外燈輻照4小時(shí)以上；

（4）可請(qǐng)保潔員按照上述要求（1）（2）（3）連續(xù)清理三天；

（5）設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)對(duì)照組（根據(jù)污染源基因片段），進(jìn)行陰陽(yáng)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，根據(jù)陰性對(duì)照確認(rèn)污染情況，可采用8連排PCR管（2個(gè)陽(yáng)參+6個(gè)陰參）；若陽(yáng)參起跳，陰參起跳，則污染需要繼續(xù)清理；若陽(yáng)參起跳，陰參全部不起跳了，則說(shuō)明污染等到控制，可恢復(fù)正常實(shí)驗(yàn)；

核酸氣溶膠污染清除劑（PCR Cleaner）一盒500 mL；10平米的房間需要2盒可完成覆蓋；其他設(shè)備及器件根據(jù)情況進(jìn)行采購(gòu)；

大面積核酸氣溶膠污染非常難以清除，若不立即采取清理，污染會(huì)更加牢固，長(zhǎng)期釋放污染核酸，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室停工。