乳腺癌是發(fā)生在乳腺上皮組織的惡性腫瘤。最新數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，近10年中國(guó)乳腺癌新發(fā)病率，一直逐年遞增，嚴(yán)重威脅著女性身心健康。乳腺癌動(dòng)物模型能夠模擬出人體乳腺癌的病程發(fā)生發(fā)展，在研究乳腺癌發(fā)病機(jī)制和臨床治療中十分重要。本期我們根據(jù)多年的實(shí)戰(zhàn)經(jīng)驗(yàn)，為大家傾囊相授乳腺癌研究中那些最實(shí)用的動(dòng)物模型。

在中國(guó)近10年乳腺癌在女性中的發(fā)病率[1]

首先，讓我們先了解一下乳腺癌分型和乳腺癌細(xì)胞的分類

不同分子分型的乳腺癌細(xì)胞根據(jù)其靶點(diǎn)的表達(dá)量對(duì)應(yīng)不同類型的乳腺癌研究，我們需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)研究目的選擇正確的細(xì)胞株進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。如需研究三陰性乳腺癌的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移，常選擇基底樣的人源細(xì)胞株MDA-MB-231或者鼠源細(xì)胞株4T1。

乳腺癌分型：

臨床上，乳腺癌根據(jù)分子分型：ER（雌激素受體）、PR（孕激素受體）和HER-2（人類表皮生長(zhǎng)因子受體2），可將乳腺癌劃分為以下四大類：

進(jìn)一步，根據(jù)這些靶點(diǎn)又分了多種細(xì)胞株，如下表我們列舉了研究中常用到的細(xì)胞株：

 了解到上述乳腺癌分型，那研究中的乳腺癌動(dòng)物模型有哪些呢？

乳腺癌動(dòng)物模型根據(jù)腫瘤發(fā)生原理，主要分為四種：

1. 自發(fā)型乳腺癌動(dòng)物模型（很少使用）

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物未經(jīng)任何有意識(shí)的人工處理，自然發(fā)生乳腺癌。多采用近交系小鼠，如C3H、SHN小鼠，生長(zhǎng)到一定年齡便自然發(fā)生乳腺癌腫瘤。此動(dòng)物模型更貼近人類腫瘤的發(fā)展，但構(gòu)建時(shí)間長(zhǎng)，誤差大，一般不建議使用等。

2. 誘發(fā)型乳腺癌動(dòng)物模型（較少使用）

使用化學(xué)物質(zhì)、物理、生物因素通過經(jīng)口、涂抹、注射等方法應(yīng)用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，使之發(fā)生乳腺癌。常見化學(xué)誘導(dǎo)方式是以二甲基苯蒽（DMBA）和甲基亞硝酸基脲（MNU）為誘導(dǎo)劑誘發(fā)乳腺癌。

這種方法誘發(fā)成瘤率較高，但誘癌過程較長(zhǎng)，個(gè)體差異較大，不易同時(shí)獲得病程或者腫瘤大小均一的動(dòng)物模型，不利于應(yīng)用于抗腫瘤藥物的篩選研究。

以DMBA誘導(dǎo)大鼠乳腺癌模型為例：

取7周齡的健康雌性SD，根據(jù)體重將80mg/kg DMBA稀釋在0.5ml玉米油中，灌胃一次，12周后，可建立乳腺癌病變動(dòng)物模型[2]。

3. 移植型乳腺癌動(dòng)物模型（最常用，易構(gòu)建）

定義：將人體或者其它種屬的動(dòng)物腫瘤組織或者細(xì)胞移植到免疫缺陷動(dòng)物身上使其生長(zhǎng)成腫瘤的動(dòng)物模型。

優(yōu)點(diǎn)：周期短，成本低，個(gè)體差異小，無自發(fā)緩解，成瘤率高等，目前實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用最多。

分類：

根據(jù)移植物來源可分為同種移植和異種移植，其中異種移植需移植于免疫缺陷小鼠中，常用的是T細(xì)胞免疫功能缺陷的裸鼠或者T、B細(xì)胞免疫功能嚴(yán)重缺陷的嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(SCID)小鼠；

根據(jù)移植部位可分為原位移植和異位移植，其中異位移植按照實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌?，可分為皮下移植、檢測(cè)肺轉(zhuǎn)移的尾靜脈注射、檢測(cè)骨和腦轉(zhuǎn)移的左心室注射等，具體細(xì)節(jié)參照前文。

詳細(xì)移植步驟可以參考下面高清視頻，配套詳細(xì)字幕注解：（包括皮下注射、原位注射、尾靜脈和左心室注射四種實(shí)驗(yàn)技巧）

https://v.qq.com/x/page/i0522vo8wbi.html

溫馨提示：請(qǐng)?jiān)赪i-Fi下觀看，土豪隨意

4. 轉(zhuǎn)基因型乳腺癌動(dòng)物模型（根據(jù)研究需要選擇）

定義：主要是利用基因編輯技術(shù)如CRISPR/Cas9進(jìn)行敲除或插入特定基因，從而誘發(fā)動(dòng)物產(chǎn)生腫瘤的模型。此模型具有穩(wěn)定的高發(fā)病率，便于觀察，已成為研究乳腺癌發(fā)病機(jī)理的良好的動(dòng)物模型。

目前研究較多的是乳腺特異的啟動(dòng)子，如在鼠乳腺腫瘤病毒長(zhǎng)末端重復(fù)啟動(dòng)子（MMTV-LTR）的作用下表達(dá)癌基因。 

MMTV是導(dǎo)致小鼠乳腺腫瘤的重要病毒，而是利用其病毒組織特異啟動(dòng)子及增強(qiáng)子功能非（致癌特性），介導(dǎo)癌基因ERBB2、PyMT、Wnt-1在小鼠乳腺高表達(dá)而發(fā)生乳腺癌。除外常用的有：抑癌基因Tp53敲除小鼠、乳腺癌抑制基因(BRCA)敲除小鼠等。

以MMTV-PyMT轉(zhuǎn)基因乳腺癌模型為例，乳腺癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Runx1隨著病程發(fā)展而表達(dá)上升[3]。

腫瘤動(dòng)物模型是我們機(jī)制研究和新藥研發(fā)中必不可少的工具，本文結(jié)合我們的實(shí)戰(zhàn)經(jīng)驗(yàn)，為大家綜述了在乳腺癌研究中最常用的動(dòng)物模型。相信對(duì)于腫瘤研究的你應(yīng)該是非常受用吧，邦耀實(shí)驗(yàn)室助力解決你的各種實(shí)驗(yàn)難題，希望做科研的你能學(xué)以致用，早日發(fā)表高分文章！

參考文獻(xiàn)：

[1] Chen W, Zheng R, Baade P D, et al. Cancer statistics in China, 2015.[J]. CA: A Cancer Journal for Clinicians, 2016, 66(2): 115-132.

[2] Kalyani Chowdary Karnama, Maheswara Ellutlaa, et al. Preventive effect of berberine against DMBA-induced breast cancer in female Sprague Dawley rats. [J]. Biomedicine Pharmacotherapy 92 (2017) 207 214.

[3] Browne G, Taipaleenmaki H, Bishop N, et al. Runx1 is associated with breast cancer progression in MMTV‐PyMT transgenic mice and its depletion in vitro inhibits migration and invasion[J]. Journal of Cellular Physiology, 2015, 230(10): 2522-2532.