EoL-1細(xì)胞,人類嗜酸性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞株
細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理與技術(shù) 現(xiàn)代生物技術(shù)一般認(rèn)為包括基因工程技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù)，而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切關(guān)系，特別是在醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展，細(xì)胞培養(yǎng)更具有特殊的作用和價值。

EoL-1細(xì)胞,人類嗜酸性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞株

細(xì)胞代號：EoL-1

細(xì)胞名稱：

EoL-1細(xì)胞,人類嗜酸性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞株

組織來源： 血液、淋巴組織haematopoietic_and_lymphoid_tissue

對應(yīng)疾病：急性髓性白血病

 acute_myeloid_leukaemia

生長特性：

 

細(xì)胞來源：

從ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進

培養(yǎng)條件：

培養(yǎng)基：  DMEM  +10%FBS

氣相：空氣95%，二氧化碳5%

溫度：37℃

培養(yǎng)：

一、貼壁細(xì)胞

1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒，將其平躺置于培養(yǎng)箱中進行2-3小時的緩沖，.然后置于無菌操作臺，打開瓶口，將其中的培養(yǎng)液去掉，再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液以及傳代；

2.待細(xì)胞長滿瓶底面積80%-90%，需要對其進行傳代，*次傳代比例為1:2。

3傳代步驟：將0.25%含EDTA胰酶置于37 預(yù)熱，倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS，輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預(yù)熱好的胰酶，置于37 孵育消化（*次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察，以顯微鏡下細(xì)胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細(xì)胞脫落為消化時間，記錄消化時間，以便于下次消化），消化好后加入1ml完全培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之完全脫落，然后收集細(xì)胞懸液，1200rpm離心3min，棄上清，加入完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，進行傳代。

 

二、懸浮細(xì)胞

1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒，然后置于無菌操作臺，打開瓶口，輕輕吹打后，將其中的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管中，然后1200rpm離心3min，去上清；

2.將離心好的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T-25瓶中，并加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基，然后將其置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液（離心后去舊液，加入新鮮培養(yǎng)基）；

3.顯微鏡觀察細(xì)胞數(shù)目比較多時，對其進行傳代，*次傳代比例為1:2（離心后平均分成兩瓶培養(yǎng)）。

 

 

細(xì)胞總數(shù)：

1~3*106

傳代周期：

2-3天

傳代比例：

1:2~1:4

換液頻率：

2-3天

凍存液：

90%FBS+10%DMSO

注意事項：

1 收到細(xì)胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2 瓶中運輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復(fù)使用，請換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)

3 對于貼壁細(xì)胞，若大部分細(xì)胞漂浮，置于培養(yǎng)箱隔夜觀察，大部分漂浮細(xì)胞重新貼壁，表明細(xì)胞活力正常，繼續(xù)培養(yǎng)，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉；若大部分細(xì)胞仍然不貼壁，將漂浮的細(xì)胞離心收集，用臺盼藍(lán)染色鑒定細(xì)胞活力，并與本公司銷售人員及時聯(lián)系。

4 建議客戶收到細(xì)胞后不同倍鏡各拍幾張細(xì)胞的照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，如細(xì)胞狀態(tài)出現(xiàn)問題請于一周內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系，以便于更好的幫您解決問題，超過時間我段，本公司則默認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好，不免費對后續(xù)細(xì)胞狀態(tài)問題進行售后。

5 因細(xì)胞產(chǎn)品的特殊性，如客戶對本公司細(xì)胞質(zhì)量存有疑問，請于收到細(xì)胞后1月內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系，超過時間段，本公司則默認(rèn)細(xì)胞質(zhì)量優(yōu)良，不承擔(dān)因細(xì)胞產(chǎn)生的任何責(zé)任。

 

 

 

 

Noverse細(xì)胞庫建立有標(biāo)準(zhǔn)化GMP細(xì)胞培養(yǎng)車間，保藏細(xì)胞種類2000余，從來源、引進、培養(yǎng)、凍存、復(fù)蘇、運輸，注重每一個環(huán)節(jié)，提供活力強，代數(shù)靠前，優(yōu)質(zhì)細(xì)胞株細(xì)胞系。

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