步驟構成： ①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應做準備; ②模板DNA與引物的退火(復性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合; ③引物的延伸：DNA模板--引物結合物在酶的作用下，以P為反應原料，靶序列為模板，按堿基配對與半保留復制原理，合成一條新的與模板DNA 鏈互補的半保留復制鏈。 重復循環(huán)變性--退火--延伸三過程，就可獲得更多的 半保留復制鏈 ，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個循環(huán)需2～4分鐘， 2～3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。
實驗試劑與器材： 模板DNA、2.5mmol/L q DNA聚合酶(5U/SSR引物 10 buffer、15mmol/L Mg2+、ddH2O PCR儀、移液槍、PCR板 實驗步驟：
一、實驗器具與材料： 1、移液槍：1ml、200 l、20 l、10 l、2 l 2、吸頭：1ml、200 l、20 l 3、勻漿管：5ml 4、吸頭臺：放置1ml吸頭的一個，放置20 l吸頭的一個 5、EP管：1.5ml、0.2ml、100 l 6、試劑瓶：2個60ml的棕色試劑瓶(廣口，帶蓋) 1個125ml的白色試劑瓶(放無水乙醇) 7、量筒：50ml、250ml、500ml 8、容量瓶：250ml、500ml、1000ml 9、試管架：5ml、1.5ml、20 l 10、鹽水瓶：250ml、500ml各2個備用，一個裝無水乙醇，另一個裝DEPC水 11、鋁制飯盒：4個 12、塑料小飯盒：1個 13、大瓷缸：2個 14、錫泊紙：一卷 15、卷紙：2卷 16、三角燒瓶：帶蓋，稍大 實驗器具的處理與準備：
1、塑料制品：(包括槍頭、EP管、勻漿管等) 先將DEPC水從容量瓶中倒入瓷缸中，將塑料制品逐個浸泡其中，其中小槍頭需要吸管打入DEPC水，過夜，然后高壓，再烤干備用，實驗前將槍頭等放入吸頭臺，再高壓一次(EP管) 2、玻璃制品：泡酸過夜，沖洗干凈，蒙錫紙烤干備用(DEPC水泡)(洗凈后先泡1 DEPC過夜，再烤干) 3、勻漿器：(包括剪刀、鑷子)先洗凈后，再高壓(不需要泡DEPC) 試劑配制： 1、DEPC水：吸出1ml放在1000ml雙蒸水中配成1 DEPC水，放在1000ml容量瓶中靜置4小時備用。 2、75%乙醇：用無水乙醇 DEPC水配，然后放-20℃保存(其中DEPC水需先高壓) 3、異丙醇：放入棕色瓶中 4：放入棕色瓶中 5、瓊脂糖