近日,有關(guān)NgAgo基因編輯技術(shù)首篇論文實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性受到相關(guān)研究者質(zhì)疑,該論文作者、河北科技大學(xué)副教授韓春雨在各類報(bào)告上回應(yīng)這需要“高超的實(shí)驗(yàn)技巧”。對(duì)此,《中國科學(xué)報(bào)》記者在采訪該領(lǐng)域?qū)<視r(shí)了解到,所謂“高超的實(shí)驗(yàn)技巧”實(shí)為實(shí)驗(yàn)“標(biāo)準(zhǔn)化”,目前多個(gè)實(shí)驗(yàn)室的重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果即將出爐。
最近一個(gè)月,許多研究者在網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)上聲稱無法重復(fù)韓春雨發(fā)表論文中的實(shí)驗(yàn)。科學(xué)網(wǎng)上,多名博主轉(zhuǎn)發(fā)研究者的評(píng)論,參與了對(duì)此事的關(guān)注。
截至發(fā)稿前,韓春雨本人并未就此事細(xì)節(jié)向媒體進(jìn)行回應(yīng)。不過,據(jù)《中國科學(xué)報(bào)》記者了解,世界范圍內(nèi)有幾家實(shí)驗(yàn)室正在對(duì)NgAgo-gDNA基因編輯技術(shù)的幾項(xiàng)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行重復(fù),并且已有從未與韓春雨聯(lián)系過的研究者獨(dú)立完成了重復(fù)實(shí)驗(yàn),即將在學(xué)術(shù)刊物上發(fā)表論文公布結(jié)果。
“韓春雨所說的‘高超的實(shí)驗(yàn)技巧’并不準(zhǔn)確?!眹鴥?nèi)一名從事基因技術(shù)研究的院士告訴《中國科學(xué)報(bào)》記者。他推測,無法重復(fù)的原因可能是實(shí)驗(yàn)過程的“標(biāo)準(zhǔn)化”出了問題,“在細(xì)胞生物學(xué)的歷史上,不能重復(fù)的實(shí)驗(yàn)時(shí)有發(fā)生,甚至有時(shí)候只是換了一個(gè)實(shí)驗(yàn)室地點(diǎn),也得不到相同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。”
例如,該院士曾親歷,使用不同生產(chǎn)廠家的血清,也會(huì)影響哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。而當(dāng)年基因克隆時(shí),法國科學(xué)家一直無法復(fù)制加拿大科學(xué)家的實(shí)驗(yàn),最終查明原因竟源于兩家實(shí)驗(yàn)室使用的水的區(qū)別。
因此,上述院士表示:“韓春雨的實(shí)驗(yàn)其他人不能重復(fù)不能代表這一結(jié)果是假的?!?p> 目前,已有研究者正在逐步發(fā)現(xiàn)“訣竅”。在專門討論NgAgo的谷歌討論小組中,一名無法證實(shí)身份的研究者“Jan Winter”表示,他因?yàn)樘鎿Q了一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)材料,取得了重復(fù)實(shí)驗(yàn)的成功。韓春雨的實(shí)驗(yàn)顯示,NgAgo能夠識(shí)別5’磷酸化的ssDNA并利用其作為向?qū)?,完成后續(xù)的編輯過程,而獲得磷酸化的小段DNA是前提。
這名研究者則是在實(shí)驗(yàn)室用激酶磷酸化替代了從廠家直接訂購,而取得了重復(fù)實(shí)驗(yàn)的成功。業(yè)內(nèi)人士分析,磷酸化可能是實(shí)驗(yàn)中的技術(shù)要點(diǎn)之一。
哈爾濱工業(yè)大學(xué)生命學(xué)院教授黃志偉課題組向《中國科學(xué)報(bào)》記者證實(shí),他帶領(lǐng)的研究組正在重復(fù)這項(xiàng)實(shí)驗(yàn)?!敖Y(jié)果還要再等一等?!彼硎?。
根據(jù)《中國科學(xué)報(bào)》記者調(diào)查,針對(duì)韓春雨論文的質(zhì)疑集中在論文中的第四部分結(jié)果上,即證明NgAgo能否編輯內(nèi)源人類基因組。
今天下午,一位來自印度基因與綜合生物學(xué)研究所的Debojyoti Chakraborty博士向媒體確認(rèn)“this system works”(這一系統(tǒng)奏效了)。Chakraborty博士表示,他們使用了NgAgo技術(shù)剪輯了海拉細(xì)胞中的相關(guān)序列,并觀測到了細(xì)胞中的GFP減少的現(xiàn)象,這初步確認(rèn)了剪輯技術(shù)發(fā)生了作用。他同時(shí)強(qiáng)調(diào):“要判定韓教授的方法的可重復(fù)性,必須要等到基因測序結(jié)果出來以后才能下結(jié)論。”
對(duì)此,記者從可靠渠道了解到,韓春雨早在論文發(fā)表之初,便意識(shí)到,這一新技術(shù)目前并不穩(wěn)定,他也一直致力于優(yōu)化和改進(jìn)該技術(shù),并曾表示“很有信心”。目前,韓春雨已向相關(guān)研究者發(fā)放了質(zhì)粒,用于NgAgo基因編輯技術(shù)的進(jìn)一步研究。