近日，中國(guó)科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所藥用資源開(kāi)發(fā)研究組葛廣波、楊凌團(tuán)隊(duì)研發(fā)了一種全新的二肽基肽酶-IV(DPP-IV, CD26)高特異性熒光探針，并將其用于人血及組織中DPP-IV的活性檢測(cè)以及活細(xì)胞和組織層面的目標(biāo)酶功能成像研究，相關(guān)研究成果發(fā)表在Biosensors and Bioelectronics上。

　　DPP-IV是哺乳動(dòng)物體內(nèi)分布的一種重要的絲氨酸水解酶，其參與體內(nèi)多種生物活性多肽(如腸促胰島素、神經(jīng)肽、胃泌素釋放肽、生長(zhǎng)激素釋放激素等)的水解進(jìn)而導(dǎo)致其部分或完全失活。DPP-IV可快速水解胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)進(jìn)而影響胰高血糖素的合成與分泌，因此其在糖代謝過(guò)程中扮演重要角色，被認(rèn)為是2型糖尿病治療的關(guān)鍵靶點(diǎn)。此外，DPP-IV還參與了機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)、細(xì)胞移行、細(xì)胞黏附和細(xì)胞凋亡等過(guò)程，其表達(dá)/功能的異常與腫瘤等多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。因此，建立適用于復(fù)雜生物樣品中的DPP-IV活性的高效且實(shí)用的檢測(cè)方法對(duì)于糖尿病治療藥物的篩選及臨床個(gè)性化用藥，以及DPP-IV表達(dá)/功能異常與疾病的關(guān)聯(lián)性研究等具有重要意義。

　　該工作中，研究者基于DPP-IV的酶催化特性，設(shè)計(jì)研發(fā)了一種全新的高特異性雙光子熒光探針底物GP-BAN，并基于該探針開(kāi)發(fā)了利用微孔板高通量檢測(cè)復(fù)雜生物樣本中DPP-IV活性的超靈敏檢測(cè)方法。該方法具有以下優(yōu)點(diǎn)：(1)特異性高，可直接用于血樣、細(xì)胞及組織等復(fù)雜生物樣品中DPP-IV的檢測(cè);(2)操作簡(jiǎn)單且可實(shí)現(xiàn)高通量檢測(cè)，單位測(cè)試成本低;(3)檢測(cè)靈敏度高(可達(dá)皮摩爾級(jí))，樣品需求量小，如血液樣品只需2μL;(4)可通過(guò)比率法進(jìn)行目標(biāo)酶的活性檢測(cè)，抗干擾能力強(qiáng)。利用該探針不僅可實(shí)現(xiàn)活細(xì)胞及活組織中目標(biāo)酶的精確定位及實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)檢測(cè)，還可以血液為酶源開(kāi)展DPP-IV抑制劑的高通量篩選與表征。上述工作不僅為新藥研發(fā)及臨床DPP-IV抑制劑的個(gè)性化用藥提供了新的工具，也為后續(xù)開(kāi)發(fā)商業(yè)化的DPP-IV生化檢測(cè)試劑盒奠定了工作基礎(chǔ)。

　　上述研究工作得到了國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目和國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃的支持。

　　大連化物所二肽基肽酶-IV生化檢測(cè)研究獲進(jìn)展