今年央視3·15爆出一些飼料企業(yè)瞞天過海地往飼料中非法添加各種“禁藥”--喹乙醇，飼料原料表隱瞞喹乙醇等非法添加劑的問題，而且這種現(xiàn)象并非個(gè)例。

什么是“喹乙醇”

喹乙醇是1965年由德國人以鄰硝基苯胺為原料合成的一種抗菌促生長劑。研究發(fā)現(xiàn)，大劑量的喹乙醇可能引起動(dòng)物出現(xiàn)急性中毒、蓄積毒性以及亞慢性中毒等，進(jìn)而影響人類健康。喹乙醇又稱喹酰胺醇，商品名為倍育諾、快育靈，由于喹乙醇有中度至明顯的蓄積毒性，對大多數(shù)動(dòng)物有明顯的致畸作用，對人也有潛在的三致性，即致畸形，致突變，致癌。因此喹乙醇在美國和歐盟都被禁止用作飼料添加劑?！吨袊F藥典》(2005版)也有明確規(guī)定，喹乙醇被禁止用于家禽及水產(chǎn)養(yǎng)殖。

fig.1?喹乙醇結(jié)構(gòu)式

本文參考《農(nóng)業(yè)部2086號公告-5-2014飼料中卡巴氧、乙酰甲喹、喹烯酮和喹乙醇的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》，建立了利用高通量全自動(dòng)固相萃取儀（Reeko Fotector Plus）結(jié)合液相色譜/質(zhì)譜檢測飼料中喹乙醇的方法。

檢測方法

儀器、耗材

Reeko Fotector Plus 高通量全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)；

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（Agilent?LC 1260-MS 6410）；

Reeko AutoEVA-60全自動(dòng)平行濃縮儀；

Reeko AH-30全自動(dòng)均質(zhì)器；

HLB固相萃取柱(200 mg, 6 mL, Oasis)或相當(dāng)

甲醇，乙腈（TEDIA色譜純）；無水硫酸鈉（優(yōu)級純），鹽酸（優(yōu)級純）

樣品制備

準(zhǔn)確稱取飼料(1 g-2 g，市售)，以及相同質(zhì)量的基質(zhì)空白，分別放置于50 mL聚丙烯離心管中。加入0.1 甲酸-乙腈溶液10 mL，采用Reeko AH-30全自動(dòng)均質(zhì)器均質(zhì)30 s，另取一離心管放置清洗刀頭液 3800 r/min離心5 min，收集上清液。殘?jiān)尤肭逑吹额^液進(jìn)行再一次提取(10 mL)，3800 r/min離心5 min，合并兩次提取液。取上清液5 mL放置于Reeko AutoEVA-60全自動(dòng)平行濃縮儀進(jìn)行富集，40℃條件下氮吹濃縮至2 mL，加入0.1 mol/L磷酸二氫鉀溶液4 mL，渦旋振蕩溶解殘留物。將上述樣品液放置于Reeko Fotector Plus高通量全自動(dòng)固相萃取儀樣品架上，通過WIFI連接，軟件控制儀器進(jìn)行固相萃取。

依次以5 mL甲醇和5 mL水活化HLB固相萃取柱(200 mg, 6 mL, Oasis)，以2 mL/min 的速度進(jìn)行上樣，然后以5 mL鹽酸（0.02 mol/L）和 5 mL 5%甲醇淋洗。用5 mL甲醇洗脫，收集洗脫液，在AutoEVA-60全自動(dòng)平行濃縮儀上氮吹濃縮至近干，加入10 %乙腈溶液定容至1 mL，渦旋振蕩后過0.22 μm有機(jī)濾膜過濾，液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀（LC/MS/MS）上機(jī)測試。

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固相萃取凈化條件

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Reeko Fotector Plus?高通量全自動(dòng)固相萃取儀

Reeko Fotector Plus 運(yùn)行程序

Reeko AutoEVA-60?全自動(dòng)平行濃縮儀

Reeko AutoEVA-60 運(yùn)行程序

液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀條件

MRM參數(shù)

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結(jié)果與討論

為了驗(yàn)證該方法的回收率，本實(shí)驗(yàn)向空白飼料(2 g)中加入上述喹乙醇標(biāo)品進(jìn)行加標(biāo)回收驗(yàn)證(n=4)。測試結(jié)果如下表所示，喹乙醇的回收率在82.1%-95%之間，說明該方法能夠很好地運(yùn)用于飼料中喹乙醇檢測。

表. 空白飼料中喹乙醇標(biāo)品加標(biāo)回收率及RSD值(40 μg/kg)

總結(jié)

1、Reeko AH-30均質(zhì)器能夠自動(dòng)對樣品進(jìn)行均質(zhì)，清洗刀頭等操作，解放實(shí)驗(yàn)人員的雙手，節(jié)省實(shí)驗(yàn)人員的寶貴時(shí)間；?

2、Reeko AutoEVA-60全自動(dòng)平行濃縮儀能夠自動(dòng)濃縮，針的液面追隨系統(tǒng)能夠讓你的濃縮過程省時(shí)、省氣；

3、Reeko Fotector Plus高通量全自動(dòng)固相萃取儀能夠自動(dòng)的完成整個(gè)固相萃取流程，從活化到上樣，清洗樣品瓶，洗脫一步到位，省時(shí)省事；

4、Reeko Fotector Plus高通量全自動(dòng)固相萃取儀采用全自動(dòng)操作，固相萃取過程中可以排除操作帶來的誤差，能夠獲得手動(dòng)固相萃取無法達(dá)到的RSD水平；?

5、Reeko Fotector Plus高通量全自動(dòng)固相萃取儀能夠?qū)崿F(xiàn)高通量處理，最多一天能夠處理180個(gè)樣品，真正為批量檢測提供幫助。

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