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本文由中國(guó)藥科大學(xué)天然藥物國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室藥物代謝與藥代動(dòng)力學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室所作，發(fā)表在Journal of Chromatography B? （2015）46-53。

三七皂苷是中藥三七的主要活性成分，具有抗氧化、抗高血糖、抗肥胖等多種生物活性。然而，由于三七皂苷在體內(nèi)濃度低、成分復(fù)雜，其藥代動(dòng)力學(xué)評(píng)價(jià)仍然是一項(xiàng)艱巨的任務(wù)。

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本研究建立了一種基于超快速液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（UFLC-MS/MS）的大鼠血漿中三七皂苷含量快速、靈敏的定量分析方法。三七皂苷R1、Rg3、Rd、Rg2、Rb2、Rf、Rg1、Rb1和Re經(jīng)正丁醇液-液萃取，在ODS C18柱(5 mm× 50 mm × 2.1 mm)上分離，采用二元梯度洗脫，以負(fù)離子模式同時(shí)監(jiān)測(cè)，所有化合物均在9 min內(nèi)進(jìn)行分析。多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)方法如下:R1 (m/z 967.7→637.4)、Rg3 (m/z 819.6→621.4)、Rd (m/z 819.6→783.5)、Rg2 (m/z 819.6→475.4)、Rb2 (m/z 1113.4→783.4)、Rf (m/z 835.6→475.4)、Rb1 (m/z 1143.7→945.6)、Re (m/z 981.6→637.4)、內(nèi)標(biāo)(地高辛，m/z 815.5→779.4)。驗(yàn)證參數(shù)(線性、靈敏度、日內(nèi)和日間的精密度和準(zhǔn)確度、回收率和基質(zhì)效應(yīng))均在可接受范圍內(nèi)，生物提取物在整個(gè)儲(chǔ)存和制備過(guò)程中穩(wěn)定。將UFLC-MS/MS方法應(yīng)用于三七提取物在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究，進(jìn)一步驗(yàn)證該方法的有效性，并利用Winolin軟件計(jì)算了藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。

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因此，該方法簡(jiǎn)便、可靠、準(zhǔn)確、精密，可用于各種三七皂苷和其他中藥皂苷的藥代動(dòng)力學(xué)研究。

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使用儀器：島津LCMS-8050

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圖1 三七皂苷R1、Rg3、Rd、Rg2、Rb2、Rf、Rg1、Rb1、Re和地高辛(內(nèi)標(biāo))的結(jié)構(gòu)

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圖2 三七皂苷R1、Rg3、Rd、Rg2、Rb2、Rf、Rg1、Rb1和Re的線性曲線。

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圖3 空白大鼠血漿和添加R1、Rg3、Rd、Rg2、Rb2、Rf、Rg1、Rb1、Re和IS的大鼠血漿的典型MRM色譜。(A)空白大鼠血漿MRM色譜，(B)添加三七皂苷(50.0 ng/mL)和IS的空白血漿的MRM色譜，(C)大鼠灌胃三七提取物（1.0 g/kg）后2 h大鼠血漿的MRM色譜。

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三七是一種在世界范圍內(nèi)廣泛使用的植物藥，有必要建立一種可靠、靈敏、高通量的方法來(lái)測(cè)定生物樣品中的多種三七皂苷。本文以9種三七皂苷(R1、Rg3、Rd、Rg2、Rb2、Rf、Rg1、Rb1和Re)為研究對(duì)象，構(gòu)建了一個(gè)功能強(qiáng)大的中藥皂苷藥動(dòng)學(xué)分析技術(shù)平臺(tái)。該方法色譜運(yùn)行時(shí)間較短，LLOQs較低，可快速、靈敏地測(cè)定大鼠血漿中三七皂苷的含量。此外，該方法專屬性強(qiáng)、結(jié)果準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，已成功應(yīng)用于大鼠灌胃三七提取物后三七總皂苷的臨床前藥代動(dòng)力學(xué)研究。更重要的是，目前開(kāi)發(fā)的方法稍加修改后，即可用于其他草藥皂苷的藥代動(dòng)力學(xué)研究。

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文獻(xiàn)題目

《Development and validation of an UFLC-MS/MS assay for the absolute quantitation of nine notoginsenosides in rat plasma: Application to the pharmacokinetic study of Panax Notoginseng Extract》

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使用儀器

島津LCMS-8050

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作者

Lijun Zhou a, Rong Xinga,b, Lin Xiea,Tai Raoa, Qian Wanga, Wei Yea, Hanxu Fua,Jingcheng Xiaoa,b,Yuhao Shaoa,b, Dian Kanga,b, Guangji Wanga, Yan Lianga

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a. Key Lab of ug Metabolism hamon y booy of Atul Me Pamaeu Univ. Tongaxang24 Nanjing 210009. China

b. Department of Pharmacy. The First ffiliated Hospital of Bengbu Medical College, Bengbu Anhui. China

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