硒是人體生命活動中必需的微量元素之一,近年來受到人們的廣泛關(guān)注。它具有使人體抗衰老、預(yù)防癌變、保護(hù)與修復(fù)營養(yǎng)細(xì)胞、解毒排毒、提高免疫力等多種生理功能。缺硒會引起克山病、大骨節(jié)病及免疫功能障礙等多種疾病。?

???????? 硒對人體的重要性已十分明確, 有研究表明人體內(nèi)硒水平的高低和生物活性不僅取決于攝入的總硒量,還與硒的化學(xué)形態(tài)密切相關(guān)。有機形態(tài)的硒,如硒蛋白、硒代氨基酸、硒多肽、硒多糖等,在機體內(nèi)才能轉(zhuǎn)變?yōu)樯砘钚晕镔|(zhì),為人體所吸收利用。

目前,國內(nèi)外有關(guān)富硒農(nóng)產(chǎn)品與食品的研究并不多見,對有益硒形態(tài)的檢測與分析更是涉及甚少,但是有關(guān)補硒的保健品不少,盲目宣傳效果,導(dǎo)致消費者難以識別產(chǎn)品優(yōu)劣。

因此開展對富硒農(nóng)產(chǎn)品中有益硒形態(tài)分析技術(shù)研究十分必要,幫助人們合理明智的選擇健康的富硒產(chǎn)品, 評價其營養(yǎng)價值，探索科學(xué)補硒，保障人體健康具有重要的現(xiàn)實意義。

近年來隨著檢測聯(lián)用技術(shù)的發(fā)展,高效液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜(HPLC-ICP-MS)聯(lián)用技術(shù)因其分離能力強、靈敏度高、分析速度快等優(yōu)點被廣泛應(yīng)用于硒形態(tài)研究,PerkinElmer公司也在此領(lǐng)域進(jìn)行了大米中硒形態(tài)檢測的實驗。

1、樣品前處理方法：

??????? 將大米樣品仔細(xì)研磨，過100目篩。準(zhǔn)確稱取1g左右樣品于15mL離心管中，加入2mg/mL的蛋白酶K溶液10mL，于37℃下超聲提取5小時，然后以6000 r/ min 離心5 min，取上清液，過0.22μm濾膜后上機測定。同時做酶解空白。

2、儀器：

PerkinElmer HPLC; NexION 350 ICP-MS；碰撞反應(yīng)氣：高純甲烷。

3、四種常見硒形態(tài)色譜標(biāo)準(zhǔn)圖譜：

注：依次為硒代胱氨酸，亞硒酸，硒代蛋氨酸，硒酸

4、經(jīng)酶解后，富硒大米中硒形態(tài)色譜圖：

注：圖中亞硒酸和硒酸來自蛋白酶帶來的本底

5、富硒大米中硒形態(tài)結(jié)果：

樣品名稱

硒代胱氨酸(μg/kg）

亞硒酸(μg/kg）

硒代蛋氨酸(μg/kg）

硒酸(μg/kg）

硒形態(tài)總量(μg/kg）

總硒含量(μg/kg）

提取率

大米結(jié)果-1

12.6

ND*

67.6

ND

81.6

91.1

89.6%

大米結(jié)果-2

12.5

ND

70.5

ND

大米平均含量

12.6

ND

69.1

ND

注：ND代表扣除酶本底后樣品中亞硒酸和硒酸含量低于檢出限

6、結(jié)論及展望

??? 本研究采用HPLC-ICP-MS聯(lián)用技術(shù)測定了大米中硒含量,并分析了硒在大米中主要的賦存形態(tài)。結(jié)果表明,該富硒大米中的總硒含量為91.1μg/kg,達(dá)到40μg/kg～300μg/kg的富硒標(biāo)準(zhǔn)(GB/T 22499-2008 富硒稻谷)，而且硒主要以有機硒形態(tài)存在。

??? 未來的研究一方面會集中于多種硒形態(tài)含量檢測方法的完善和開發(fā)，另一方面針對不同硒形態(tài)的生理學(xué)功能的研究。