??????建立生理相關(guān)的體外模型對于進一步了解神經(jīng)疾病的機制以及靶向藥物開發(fā)至關(guān)重要。iPSC衍生的神經(jīng)元顯示出對化合物篩選和疾病建模的巨大希望，然而目前已經(jīng)開發(fā)出使用三維（3D）培養(yǎng)物作為對神經(jīng)元細胞的測定開發(fā)的有效方法。3D細胞培養(yǎng)被認為是更接近人類組織的重演方式，包括結(jié)構(gòu)、細胞組織、細胞- 細胞和細胞- 基質(zhì)相互作用等領(lǐng)域。

???????3D 細胞培養(yǎng)模式較傳統(tǒng)的單層細胞培養(yǎng)模式能夠更加真實地反應(yīng)出細胞相互作用和化合物篩選過程中其生理變化的過程。采用手動操作進行相應(yīng)檢測分析會復(fù)雜而繁瑣，而且隨著樣品量增加變得越來越困難。自動化系統(tǒng)能夠以更加精準、更高通量的方式進行3D 細胞成像分析，ImageXpress?Micro Confocal共聚焦高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)將會成為您的得力研究助手。

???????目前，比較常見的的兩種3D細胞球培養(yǎng)模式包括3DProSeedTM水凝膠和微流控OrganoPlate?平臺培養(yǎng)系統(tǒng)。水凝膠通過摻入MMP切割位點來幫助細胞遷移，并包含RGD細胞粘連基序以支撐細胞的粘附作用。這種水凝膠預(yù)制板使用方法簡便，同時能很好地兼容自動化設(shè)備（圖1）。OrganoPlate?是一個高通量平臺，結(jié)合了最新的3D細胞培養(yǎng)技術(shù)、Phaseguides?和微流體技術(shù)，它包含96個適合長期培養(yǎng)活細胞的組織芯片，適用于篩選目的，并且與標(biāo)準實驗室設(shè)備或自動化系統(tǒng)兼容，如ImageXpress?Micro Confocal共聚焦高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)（圖2）。

圖1：圖解3DProSeedTMsurface工作原理以及在模具中培養(yǎng)神經(jīng)元細胞的過程

圖2：OrganoPlate中培養(yǎng)的神經(jīng)元細胞。在充滿基質(zhì)膠的OrganoPlate培養(yǎng)槽內(nèi)對接種的iCell神經(jīng)元細胞進行透射光成像。細胞以每芯片30,000個細胞的密度培養(yǎng)72h，然后用20X平場熒光物鏡進行透射光成像。

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