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【上皮細(xì)胞2】《自然環(huán)境·試驗(yàn)流程》三角形和異型纖維蛋白井水凝膠體以外導(dǎo)致自修正人腸上皮

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 放大字體  縮小字體    發(fā)布日期：2021-01-21  來源：儀器網(wǎng)  作者：Mr liao  瀏覽次數(shù)：90
核心提示：【教學(xué)科研參考資料】消化道及其表皮上的隱窩感測(cè)器和各種管腔含物可可調(diào)整個(gè)生物體的體內(nèi)平衡。在3D圓形的井水膠體鉸鏈上由原代人小腸表皮骨髓成形的胃隱窩可克隆血液隱窩的機(jī)能和結(jié)構(gòu)特征。給予了脂質(zhì)鉸鏈零件新方法，以及使這些井水膠體固化以也就是說血
【教學(xué)科研參考資料】消化道及其表皮上的隱窩感測(cè)器和各種管腔含物可可調(diào)整個(gè)生物體的體內(nèi)平衡。在3D圓形的井水膠體鉸鏈上由原代人小腸表皮骨髓成形的胃隱窩可克隆血液隱窩的機(jī)能和結(jié)構(gòu)特征。給予了脂質(zhì)鉸鏈零件新方法，以及使這些井水膠體固化以也就是說血液隱窩的體積和能量密度所需要的微小制品和較硬刻蝕設(shè)計(jì)方案。此外，還給予了骨髓掃描設(shè)計(jì)方案，因此，即使是超小的早期試樣也可以用做算起材質(zhì)。原先，將這些蛋白以增生單層的型式發(fā)芽在固化鉸鏈上，并以骨髓/增生蛋白的型式開展培植，以使它們縮減并以隱窩狀構(gòu)造散布鉸鏈顆粒。為了將這些無菌的隱窩轉(zhuǎn)換成為帶有基石骨髓自然生態(tài)位和腔內(nèi)同化蛋白區(qū)內(nèi)的基本上耦合的機(jī)能三組，整個(gè)隱窩成形了不穩(wěn)定的的一維介素通量。該游戲平臺(tái)擁護(hù)在整個(gè)隱窩之中成形生物化學(xué)通量，包含潮濕和同化突變，炎性衍生物，血漿和營(yíng)養(yǎng)代謝物副產(chǎn)物以及病原體新產(chǎn)品的生物化學(xué)通量。所有微小制品和的設(shè)備零件流程預(yù)估必需8 e，原代小鼠12 e才能成形萌芽的胃隱窩。關(guān)的科學(xué)論文篇名For health single of self安renewing a intestinal epithelia over planar and shaped collagen hydrogels由哈佛大學(xué)Anne S. Allbritton系主任制作團(tuán)隊(duì)刊登在《Natural Protocols》上。【全彩驗(yàn)證】總流程由于在胃腸上皮蛋白的培植和數(shù)據(jù)分析之中存有一直身心，編者開發(fā)計(jì)劃了一種支架配腸上皮蛋白單層的異型鉸鏈，以闡釋血液消化道隱窩的機(jī)能和結(jié)構(gòu)特征。該游戲平臺(tái)給予了小腸的微型3D病理建模，符合于已設(shè)立的數(shù)據(jù)分析精確測(cè)量和礦物質(zhì)訊息得到。該試驗(yàn)流程將簡(jiǎn)要簡(jiǎn)介用做研發(fā)3D圓形的井水膠體鉸鏈和的設(shè)備箱的質(zhì)研發(fā)和較硬刻蝕新方法，以及在每個(gè)的設(shè)備之中做到腸上皮的清晰建模所需要的附加的原代小鼠新方法（所示1）。所示1條款的崗位步驟和日程。G，胃隱窩的培植日。上述每種小腸數(shù)學(xué)模型都有其自身的靈活性和普遍性（所示2）。一般而言，通過采用類心臟數(shù)學(xué)模型可以巧妙開展PCR增生，蛋白致癌性和生存力數(shù)據(jù)分析，因?yàn)樗鼈兒懿灰滓砸?guī)范的96孔板型式分解成。然而，類心臟難以開展鐵路運(yùn)輸，代謝物，腺體和傳染的深入研究，單層培植控制系統(tǒng)相結(jié)合多孔鞘由于其可吻合的音四樓和復(fù)合音而越來越適合于。礦物質(zhì)的圖形野外也更易在蛋白的三角形單層上督導(dǎo)，因?yàn)樗鼈儨p輕了對(duì)多三角形掃描和jcodice_圖形修葺的需求量。TIA游戲平臺(tái)一般而言比類心臟控制系統(tǒng)或單層培植控制系統(tǒng)較為現(xiàn)代化，因此更為適于專門從事深入研究，在這些深入研究之中，只用的鮮明資料確實(shí)在其設(shè)立和督導(dǎo)多方面完成了更為多的心思。所示2 原代腸上皮蛋白胃培植游戲平臺(tái)的非常。【流程】原代腸上皮蛋白的單層培植和傳代1如果從冷凍保存的隱窩或培植蛋白開始，則將SS在37°B的水浴之中孵蛋30分鐘，或一直吸熱。2將1×ABC，一個(gè)15 mg錐形管和一個(gè)六孔板之中和的纖維蛋白井水膠體鉸鏈移到到冷凍生命體安全柜之中。3從脂質(zhì)鉸鏈上取出蛋白酶，將其用做鋁（1小瓶/圓孔）。平均分配4 mg的1x ABC，孵蛋5分鐘。便段落此流程兩次（所示3a）。所示3：單層井水膠體保持穩(wěn)定原代腸上皮蛋白。4從低溫內(nèi)存之中放進(jìn)冷凍保存的蛋白或隱窩瓶。2分鐘內(nèi)降溫至常壓。5將每個(gè)降溫的小瓶4毫升SS平均分配到15毫升的錐形管之中，然后降溫的蛋白原液（1毫升/酒杯）。6在600g（常壓）下離心1分鐘。棄去上清液，然后將沉淀物再次微粒在每個(gè)降溫的小瓶4 mg的SS之中。7從將用做鋪板的每個(gè)脂質(zhì)鉸鏈之中取出1x ABC，然后將4 mg SS之中的蛋白洗滌劑移到到每個(gè)孔中。8將裝上蛋白的脂質(zhì)鉸鏈框取出濕潤(rùn)的CO2培養(yǎng)箱之中。9每48時(shí)長(zhǎng)（例如，第2、4、6涵）必要一次菌種。從每個(gè)孔中取出用過的菌種，并平均分配4 mg食材的37°B SS。10當(dāng)?shù)鞍诇?zhǔn)備好通過（≥80％匯流）時(shí)，將SS和“溶解蛋白酶”在37°B的水浴中溫育，或一直吸熱。從4°B的貯存之中放進(jìn)膠原酶供給氫氧化鈉（5,000 S/mg），并將其與1×ABC，一個(gè)15 mg錐形管和在六孔板之中合成的之中和的脂質(zhì)鉸鏈獨(dú)自移到到冷凍生命體安全柜之中。11從重新脂質(zhì)鉸鏈上取出蛋白酶，將蛋白讓給該鉸鏈。平均分配4 mg的1x ABC，孵蛋5分鐘。便段落此流程兩次（所示3a）。12為每孔平均分配100 u膠原酶原液，該氫氧化鈉將離開15 mg錐形管之中。13從CO2培養(yǎng)箱之中放進(jìn)培植的蛋白，然后從每個(gè)孔中移到1 mg用過的菌種，并將其傳來15 mg錐形管之中。取出余下的菌種。14采用100–1,000 u移液器吸頭，沿脂質(zhì)鉸鏈的周邊地區(qū)刮擦，抵靠孔壁，以將井水膠體從板上移到。采用移液器尖端嘴唇踩鉸鏈，并將其移到到錐形管之中（所示3b）。15采用5 mg血液移液管，將膠原酶氫氧化鈉與鉸鏈獨(dú)自移液5至10次。在此流程落幕之后，應(yīng)當(dāng)將鉸鏈大略水解并通過移液器吸頭意志移到。16采用P1000微量移液器，將膠原酶氫氧化鈉與鉸鏈獨(dú)自移液10至20次。在此流程落幕時(shí)，鉸鏈應(yīng)當(dāng)相當(dāng)大素質(zhì)地水解，并通過移液器吸頭意志移到。17在37°B下孵蛋10分鐘。18在600g（常壓）下離心蛋白1分鐘，然后檢查和沉淀物。如果脂質(zhì)層保存在蛋白頂部，請(qǐng)重倚沉淀物并在37°B下便孵蛋1分鐘。在600g（常壓）下便離心1分鐘。19從蛋白沉淀物之中取出上清液。20將沉淀物重懸于14 mg的1x ABC中以洗滌蛋白。21以600g離心蛋白1分鐘，并從雜質(zhì)之中取出上清液。22將沉淀物重懸于150 u的“溶解蛋白酶”之中。采用P200微量移液器，通過上向下滴20次來碎片蛋白沉淀物。23在37°B下孵蛋5分鐘。24采用P200微量移液器，上向下滴40次，將蛋白致密碎片變成很小的碎塊。25對(duì)于每個(gè)將鋪地有蛋白的原先鉸鏈，在錐形管之中投身4 mg 37°B SS。26從每個(gè)重新脂質(zhì)鉸鏈上吸收蛋白酶，并將4 mg蛋白懸液平均分配到每個(gè)孔中。27將裝上蛋白的脂質(zhì)鉸鏈框取出濕潤(rùn)的CO2培養(yǎng)箱之中，每星期48時(shí)長(zhǎng)用食材的SS必要菌種，直到下一次通過（所示3c）。1002F歧窩主實(shí)例創(chuàng)作（刻蝕）28南至北用甲醇和丙酮洗滌玻璃片，然后用冷卻水濕潤(rùn)（所示4a）。所示429在設(shè)立為30 R的雷射清潔器之中對(duì)載玻片開展雷射處理過程10分鐘，以減輕任何存留的顆粒有害物質(zhì)并降低1002F光致抗蝕劑的附著力。30將消毒過的基材移到到直涂機(jī)上。在玻片的該中心上平均分配左右2 mg的1002F安10光致抗蝕劑。以500 hp的飛行速度以100 hp/t的飛行速度將密集的1002F安10散落在玻片上10 t，然后以300 hp/t的飛行速度以3,000 hp的飛行速度旋轉(zhuǎn)軸30 t，再次鞘厚度為5 cm。31較硬面團(tuán)：將載玻片在主角為95°B的冰箱之中孵蛋30分鐘。32通過采用入射的紅外線爆出控制系統(tǒng)，將整個(gè)樹脂爆出于1,000 mJ/cm2的紅外線下。33爆出后面團(tuán)：將載玻片在95°B的冰箱或熱板上孵蛋10分鐘，以使光酸激起聚丙烯的降解。34較硬面團(tuán)：將載玻片在主角為150°B的熱板上便孵蛋30分鐘，以愈合乙烯鞘（所示4a）。35從攪拌板上放回載玻片，然后蒸發(fā)至常壓。36在設(shè)立為30 R的雷射清潔器之中對(duì)顆粒開展雷射處理過程10分鐘，以消毒降解的1002F顆粒有害物質(zhì)，并提升其他1002F層的附著力。37將基材移到到直涂機(jī)上。在玻片的該中心上平均分配左右2 mg的1002F安100光致抗蝕劑。以500 hp的飛行速度以100 hp/t的飛行速度將密集的1002F安100密集在載玻片上10 t，然后以300 hp/t的飛行速度以1,000 hp的飛行速度旋轉(zhuǎn)軸30 t，以導(dǎo)致厚約150 cm的樹脂。38軟烤：將載玻片在主角為95°B的冰箱之中孵蛋2時(shí)長(zhǎng)。39便段落兩次流程37和38，以分解成總計(jì)三層。多層1002F鞘的再次直徑為420安450 cm（所示4a）。40將基材移到到紅外線爆出控制系統(tǒng)之中。用甲醇滲入的無塵室擦拭布擦去相片上方（即天花板掩蓋面上）上的所有瓦礫?；瑒?dòng)面板并將1002F薄膜的側(cè)面朝下。然后安放紅光掩膜（所示4），使掩膜的鎳朝向下，與上涂有光阻劑的載玻片的天花板爆出面保形碰觸。將模塊掩蓋在1,200 mJ/cm2的紅外線mg下。41爆出后面團(tuán)：將玻片在95°B的冰箱之中孵蛋30分鐘，然后在120°B的熱板上孵蛋10分鐘。所示5：用做胃隱窩的微加工和小鼠插入物去除。42在定軌搖躺在嘴唇研磨（左右100 hp），將其在甲醛醇類乙酸（PGMEA）顯影之中孵蛋60分鐘開展顯影劑。43南至北用PGMEA和丙酮洗滌，然后用冷卻水濕潤(rùn)（所示5a）。44在處理之中，礫石會(huì)扣留在微柱之中，可以通過采用PDMS將其清洗。在單次橡膠石磨盤上，將Sylgard 184硅酮高分子基料和固化劑以10：1的總重比結(jié)合。用刮刀將氫氧化鈉結(jié)合，然后在密閉干燥器之中脫氣，直到液體基本上清洗。在載玻片上平均分配左右3 mg的組分，然后脫氣，以施用扣留在微柱間的液體。將組分在主角為95°B的冰箱之中熔化10分鐘。裹PDMS以清洗存留的礫石并掉。便段落一次此PDMS軟件和低層流程。45較硬奶油：將主成品在主角為150°B的熱板上孵蛋30分鐘。PDMS隱窩印璽創(chuàng)作（較硬刻蝕）46以10：1的總重比并入Sylgard 184有機(jī)硅高分子基石劑和固化劑，然后對(duì)組分脫氣。47在1002F配成品上平均分配左右3 mg的PDMS組分，然后脫氣以施用微柱間倒賣的液體。48將組分在主角為95°B的冰箱之中熔化30分鐘。49從1002F配成品上碎裂PDMS拷貝。該脫模的PDMS帶有一系列孔洞（所示5b）。50將PDMS原件擺在載玻片上，用做晶體支持物，孔洞朝上，避開載玻片。確定PDMS和載玻片間并未液體。51將流程50之中的天花板/PDMS面板在設(shè)立為150°B的熱板上孵蛋2 hr，以使PDMS愈合。52雷射清洗器之中的雷射處理過程PDMS設(shè)立為30 R，年中2分鐘。該流程在PDMS顆粒上導(dǎo)致鋰層，以推動(dòng)隨后的乙烷表層。53在生物化學(xué)空氣流通家庭用品之中，將PDMS原件移到到密閉干燥器四樓之中，并使孔洞朝上。將100 u苯甲酸（辛基）乙烷平均分配到座落腔室和中央的厚度15毫米的清潔試管之中。采用無油液壓將腔室抽真空2分鐘。關(guān)停腔室的主閥并接地液壓的連接起來。孵蛋16時(shí)長(zhǎng)。54很慢將生物化學(xué)空氣流通家庭用品內(nèi)的音四樓廢氣。從質(zhì)子化四樓之中放進(jìn)含有乙烷殘?jiān)脑嚬?，并掉。采用無閥門將腔室抽真空2分鐘，然后廢氣。便段落兩次密閉/廢氣流程。55在PDMS原件上平均分配左右2 mg的Sylgard 184組分（流程46），然后脫氣以施用孔洞之中倒賣的液體。將組分在主角為95°B的冰箱之中熔化10分鐘。56段落流程55，直到超出所需要的再次印璽傾斜度（便開展兩次到三遍）。編者辨認(rèn)出，采用鑷子相對(duì)于不易拇指和操縱者2到4毫米的傾斜度。57從PDMS拷貝之中刪掉PDMS標(biāo)識(shí)。脫模的PDMS灌入成品有與1002F主模不同的微柱感測(cè)器（所示5b）。帶有孔洞的PDMS原件可用做左右10種將會(huì)的紙幣研發(fā)，以后開始消失皮膚上和扭曲。58通過在150°B的熱板上孵蛋30分鐘來愈合PDMS印璽。59將PDMS印璽蒸發(fā)至常壓，然后用剃須刀采摘至再次體積為4×4×2安4 厚度（總長(zhǎng)×高約×較高；所示5b）。PDMS印璽的顆粒處理過程60再次準(zhǔn)備好“ 交聯(lián)紅光接枝氫氧化鈉”（參見“催化劑設(shè)立”）或從4°B的磁盤之中放進(jìn)混種。61將PDMS印璽（≤10）安放在圓底容器之中，并填入左右50 mg 交聯(lián)接枝氫氧化鈉。用PTFE螺栓密閉。62將容器取出天花板試管之中開展支架，然后移到到Loctite 400 R金屬和氯化螢光泛光控制系統(tǒng)游戲平臺(tái)上。掩蓋在≥240J/cm2的紅外線紫外線下（4時(shí)長(zhǎng)山洪掩蓋）。63用去離子水從根本上洗滌印璽，然后在去離子水之中孵蛋投宿，以移除任何非配體連接起來的紅光接枝氫氧化鈉溶劑。64用75％（尺寸/尺寸）的甲醛洗滌，并貯存在裝上75％（尺寸/尺寸）的甲醛的錐形管之中一直采用。65采用擠壓方法從商用的12圓孔小鼠插入物之中（例如Transwell和獵鷹）暫代未及裝設(shè)的鞘。用去離子水消毒要用Kimwipl或冷卻水濕潤(rùn)（所示5c）。66從卷筒上開展紙板，安放插入物，并在插入物四周切口紙板/背襯，以使其與紙板卷或塊狀分開。在插入物的外外緣上用加工匕首切口，特別注意情況下切口肥皂，而不會(huì)切口背襯。采用Kimwipl和/或鑷子清洗存留的肥皂，然后掉。67將上涂有肥皂的基石輪輞與食材的游憩PTFE鞘（即Biopore）碰觸。朝著插入物的壁接合樹脂的任何墊范圍，以推動(dòng)樹脂，肥皂和插入物腹面間的牢固密閉。68將移到肥皂插入到塑料樹脂上，使肥皂背襯在肥皂的側(cè)面上。夫成約15毫米總長(zhǎng)的長(zhǎng)方形，可在每個(gè)小鼠插入物四周巧妙加載。69采用組織學(xué)打孔器，在每個(gè)塑料/膠粘劑立方體的該中心放一個(gè)厚度為3毫米的圓孔。70放回肥皂背襯，并將3 厚度圓孔與小鼠插入物的頂端和文中間。松開將顆粒壓在獨(dú)自。71用陶瓷匕首或鉗子采摘丟從刀刃外緣抬起的所有余下材質(zhì)。72將去除的插進(jìn)視頻移到到12孔板之中。固化井水膠體鉸鏈的質(zhì)固化73從其貯存氫氧化鈉之中放進(jìn)交聯(lián)接枝的PDMS壓模（流程64），并在采用年前濕潤(rùn)1時(shí)長(zhǎng)。74采用明場(chǎng)顯微檢查和微柱。證明微柱形態(tài)之中應(yīng)該并未缺點(diǎn)，并且并未煙霧，碎塊和脂質(zhì)（如果從當(dāng)初的模制之中再次采用印模）。如果有煙霧或礫石，勸在75％（尺寸/尺寸）的甲醛淚水消毒紙幣，濕潤(rùn)并再一檢查和。75準(zhǔn)備好將用做成形固化井水膠體鉸鏈的脂質(zhì)組分。在冰壺的微量離心管之中并入50μu的0.6 R EDC和50μu的0.15 R 蘇格蘭政府，并通過移液從根本上結(jié)合。將400μlMES揮發(fā)的脂質(zhì)（5 kg/mg，酸性 5）平均分配到同一液體之中，并通過嘴唇上下吹打40次開展結(jié)合。如果組分之中成形液體，則在15,000g（常壓）下離心1分鐘。76在流程72的每個(gè)經(jīng)過去除的小鼠插入物之中的音四樓和中央平均分配50μu脂質(zhì)/EDC/蘇格蘭政府組分（即，在厚度3 厚度的傳播站內(nèi)下方）。77采用鑷子，將PDMS微型管狀印璽作用于并壓入每個(gè)插入物內(nèi)的膠體之中，微型柱狀體朝下。如果在印璽和膠體間夾有任何可見的液體，可以用鑷子將印璽敗訴并再次安放（所示5c）。78將含有PDMS成品的小鼠插入物移到到12圓孔小鼠板中（如果未安放），然后將其取出氣動(dòng)熔化液體或阻力罐子。79從氧氣光作用于20 MPa（200 MPa）的阻力。重啟時(shí)鐘5分鐘，并始終保持有效率的液體儲(chǔ)備。下降的阻力可消除降解井水膠體之中的扣留氣穴，并逼使塑性脂質(zhì)組分離開微柱縫隙范圍。80 5分鐘后，停止高氣壓并在培養(yǎng)箱之中孵蛋箱2時(shí)長(zhǎng)。在此之后，腔室將慢慢缺氧。81在開啟之后，開啟腔室上的更快排氣閥以吸入所有存留液體。放進(jìn)含有小鼠插入物的12孔板。82向每個(gè)插入物的音四樓之中投身1 mg 1×ABC，并孵蛋≥10分鐘。83用鑷子不慎地從每個(gè)小鼠插入物之中度角敗訴每個(gè)PDMS印璽。采用明場(chǎng)顯微，證明每個(gè)脂質(zhì)鉸鏈之中應(yīng)該存有孔洞，且并未任何歪曲（所示5c，e）。84將小鼠插入物移到到2充的去離子水液體之中，以消毒存留的交聯(lián)劑鉸鏈。在常壓下孵蛋投宿。85滴液體之中的去離子水，并加進(jìn)充分的75％（nd / nd）乙醇溶液以散布小鼠插入物。86將含有小鼠插入物的液體移到到冷凍生命體安全柜之中，并在75％（尺寸/尺寸）乙醇溶液之中孵蛋5分鐘。87將小鼠插入物從液體移到到12圓孔小鼠板中。將插入物之中的乙醇溶液放進(jìn)2充液體之中。88在每個(gè)腔室之中平均分配1 mg的1x ABC，在每個(gè)復(fù)合四樓之中平均分配2 mg的1x ABC。蓋上盒子孵蛋30分鐘。89從每個(gè)隔室之中吸收氫氧化鈉，并將與流程88之中不同的尺寸的食材ABC平均分配到每個(gè)隔室之中。90在將蛋白傳來固化的井水膠體鉸鏈上的前一天，將VitroCol人脂質(zhì)在1x ABC之中揮發(fā)至10 k/mg的pH。91從小鼠插入物的音四樓和復(fù)合四樓取出貯存氫氧化鈉。將1 mg揮發(fā)的有機(jī)體脂質(zhì)氫氧化鈉平均分配到每個(gè)腔室之中，并將1 mg的揮發(fā)的有機(jī)體脂質(zhì)平均分配到每個(gè)復(fù)合腔室之中。在常壓下孵蛋投宿。胃有機(jī)體小腸隱窩的培植92用流程91降解的纖維蛋白鉸鏈從小鼠器皿的音四樓和復(fù)合音取出人脂質(zhì)氫氧化鈉（即含固化的隱窩構(gòu)造）。在每個(gè)腔室之中平均分配1 mg的1x ABC，在每個(gè)復(fù)合四樓之中平均分配2 mg的1x ABC。在常壓下孵蛋，直到準(zhǔn)備移到蛋白為止。93在井水或珠浴上將RR，溶解蛋白酶和10 mM T安27632供給液溫育至37°B 30分鐘，或一直吸熱。從4°B的貯存之中放進(jìn)膠原酶供給氫氧化鈉（5,000 S/mg），并將其與1×ABC和一個(gè)15 mg錐形管獨(dú)自移到到冷凍生命體安全柜之中。94將初始鋁所需要的RR的等分坩堝平均分配到50 mg的錐形管之中（向每個(gè)腔室之中加進(jìn)1 mg RR，向每個(gè)復(fù)合四樓之中加進(jìn)2 mg RR，每個(gè)總3 mg小鼠插入物）。將RR之中的原液T安27632揮發(fā)至10 R的pH。95按照本條款的流程10安23，從≥80％交融的之中和纖維蛋白井水膠體鉸鏈之中傳代原代有機(jī)體小腸濾泡。96準(zhǔn)備好一個(gè)雙移液器吸頭以催化蛋白多摩市：在P200微量移液器的前端安放一個(gè)2–200 u移液器吸頭，然后在2–200μu移液器的前端安放一個(gè)0.1–20 u移液器吸頭尖端（所示6a）。所示6：胃隱窩的成形和形態(tài)。97采用配置有雙移液器吸頭的P200微量移液器，通過上向下滴40次將蛋白沉淀物碎片變成很小的碎塊。98將所需量的RR + T安27632（每個(gè)腔室1 mg）平均分配到碎片化的蛋白懸液之中。99從小鼠插入物之中吸收帶有一定圓形的井水膠體鉸鏈的貯存蛋白酶（流程92），從復(fù)合隔室開始，到腔腔室落幕。100智能手機(jī)蛋白重懸于RR + T安27632之中，離開每個(gè)小鼠插入物的音四樓之中（每個(gè)腔室1 mg）。將2 mg RR + T安27632（無蛋白，從流程94剩余）平均分配到每個(gè)復(fù)合隔室之中。101將板移到到37°B的濕潤(rùn)的CO2培養(yǎng)箱之中。不必要變動(dòng)或妨礙框直到第2天，以使蛋白下沉到孔洞的頂端（所示6b）。102每48時(shí)長(zhǎng)用3 mg食材的37°B RR（無T安27632）必要菌種：取出用過的菌種，并在第2、4前日1 mg RR平均分配到每個(gè)腔室之中，將2 mg RR平均分配到每個(gè)復(fù)合四樓之中（所示6b）。103（可選人）可以在縮減流程之中的任何時(shí)候（第0天）通常并染色劑蛋白的增生生命體遙相呼應(yīng)證明蛋白在所有隱窩范圍僅始終保持增生活性。104到第8天，小腸濾泡應(yīng)當(dāng)在質(zhì)模制脂質(zhì)鉸鏈感測(cè)器之中100％匯流（所示6b）。從每個(gè)隔室之中取出用過的RR，并通過將0.5 mg的BF平均分配到每個(gè)腔室之中以及將1.5 mg的JYP平均分配到每個(gè)復(fù)合隔室之中，使胃隱窩耦合離開分枝/增殖性和同化同型遺傳四樓。105（可選人）可通過每24時(shí)長(zhǎng)對(duì)菌種抽樣并計(jì)量復(fù)合和音四樓之中的Wnt3a，L安spondin和腳酶來確定通量成形?；蛘撸梢圆捎?0 真核細(xì)胞的紫外光右旋糖酐（100 k / mg）作為這些介素的比如說，并單獨(dú)通過紫外光開展測(cè)。106（可選人）為減輕區(qū)室化，從而設(shè)立隱窩耦合的形容詞對(duì)應(yīng)，可將BF或JYP分別加進(jìn)至復(fù)合音和音音，從而分別成形被基本上同化或拔/發(fā)炎蛋白散布的隱窩鉸鏈。107（可選人）可以向前或向前（從50％（尺寸/尺寸）反應(yīng)物）可調(diào)JYP之中S安WRN必需菌種的技術(shù)水平，以沿隱窩公轉(zhuǎn)周期發(fā)生變化分枝/增生四樓的形狀。108（可選人）在此之后可以加進(jìn)其他介素，代謝物副產(chǎn)物，抗生素和/或病理藥物，以引來所需要的真實(shí)感或次測(cè)試試驗(yàn)推論。109每星期24時(shí)長(zhǎng)從每個(gè)隔室之中必要一次電介質(zhì)，年中4天：取出用過的菌種，并在第9、10和11前日0.5 mg的BF平均分配到每個(gè)腔室之中，并將1.5 mg的JYP平均分配到每個(gè)復(fù)合四樓之中。110數(shù)據(jù)分析胃隱窩和/或在第12天或此后（即生物化學(xué)通量必需≥4d）對(duì)其開展生物化學(xué)通常以開展染色劑。所示6c之中圖形的附加標(biāo)識(shí)新方法可在編者之前的刊物之中得到。胃隱窩帶有相似血液該組織的該組織技術(shù)水平自我修正技能，可以這種形式培植≥32d（所示6b，d）。引文：shown.消/10.1038/s41596安020安00419安8發(fā)行權(quán)發(fā)表聲明：「井水膠體」是由專業(yè)人士Dr（后）開辦的大眾號(hào)，宗旨互動(dòng)進(jìn)修溝通改性薄膜顆粒學(xué)等應(yīng)用領(lǐng)域的研究進(jìn)展。上述均代表人編者個(gè)人觀點(diǎn)。如有著作權(quán)或腳注違法勸連系編者修訂。商業(yè)活動(dòng)刊發(fā)或撰稿勸往常連系撰稿。表示感謝各位矚目！
 
 
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【上皮細(xì)胞2】《自然環(huán)境·試驗(yàn)流程》三角形和異型纖維蛋白井水凝膠體以外導(dǎo)致自修正人腸上皮二維碼

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