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【ELISA法】雙抗夾心法則elisa試驗理論和操作步驟

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2020-12-16  來源:儀器網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):132
核心提示:雙抗夾心法則elisa理論雙特異性(原)夾心法則,一般而言是相結合在固相多肽顆粒的特異性或特異性仍始終保持其分子生物學活性,蛋白標識的特異性或特異性既保存其分子生物學活性,又保存蛋白的活性。受檢頭顱骨與固相多肽顆粒的特異性或特異性起質子化。
雙抗夾心法則elisa理論雙特異性(原)夾心法則,一般而言是相結合在固相多肽顆粒的特異性或特異性仍始終保持其分子生物學活性,蛋白標識的特異性或特異性既保存其分子生物學活性,又保存蛋白的活性。受檢頭顱骨與固相多肽顆粒的特異性或特異性起質子化。用沖洗的新方法使固相互多肽上成形的特異性特異性蛋白與氣體之中的其他化學物質單獨。投身蛋白標識的特異性或特異性,通過質子化也相結合在固相多肽上。投身蛋白質子化的官能團后,官能團被蛋白合成視為有色副產物,副產物的用量與頭顱骨之中受檢化學物質的用量單獨關的,根據(jù)呈色的濃淡開展定調或分析。蛋白的催化效率頗高,誘因掃描了免疫的結果,使測定方法超出頗高的敏感性。雙抗夾心法則elisa操作步驟標準品的揮發(fā)與加樣:在蛋白紅字一般來講板上分設標準品圓孔10圓孔,在第一、第二孔中分別納標準品100μu,然后在第一、第二圓孔不言而喻標準品稀釋液50μu,混勻;然后從第一圓孔、第二孔中各取100μu分別納到第三圓孔和第四圓孔,便在第三、第四圓孔分別納標準品稀釋液50μu,混勻;然后在第三圓孔和第四孔中先各取50μu棄掉,便各取50μu分別納到第五、第六孔中,便在第五、第六孔中分別納標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μu分別納到第七、第八孔中,便在第七、第八孔中分別納標準品稀釋液50μu,混勻后從第七、第八孔中分別收50μu加進第九、第十孔中,便在第九第十圓孔分別納標準品稀釋液50μu,混勻后從第九第十孔中各取50μu棄掉。(揮發(fā)后各孔加樣用量都為50μu,pH分作24μk/S ,16μk/S, 8μk/S,4μk/S, 2μk/S)。2.加樣:分別分設錯位圓孔(空白對照孔不加試樣及酶標催化劑,其余各步加載不同)、待測試樣圓孔。在蛋白紅字一般來講板上待測試樣孔中先加試樣稀釋液40μu,然后便加待測試樣10μu(試樣再次揮發(fā)度為5倍)。加樣將試樣加諸蛋白標板圓孔頂端,適當不認清孔壁,嘴唇擺動混勻。3.溫育:用封板鞘封板中置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍成品洗滌液用氫氧化鈉30(48T的20倍)倍揮發(fā)后備用。5.沖洗:不慎揭掉封板鞘,棄去氣體,甩干,每孔裝滿洗滌液,晾干30秒后棄去,如此段落5次,拍干。6.加酶:每孔投身蛋白紅字催化劑50μu,錯位圓孔除外。7.溫育:加載同3。8.沖洗:加載同5。9.水溶性:每孔再投身顯色劑A50μu,便投身顯色劑B50μu,嘴唇振動混勻,37℃避光水溶性15分鐘. 10.停止:每孔加停止滴50μu,停止質子化(此時深藍色立轉白色)。11.精確測量:以錯位空調設備零,450nmnm依次測各孔的喉恒星(OD最大值)。 精確測量應在加停止液后15分鐘少于開展。Sbjbio常用elisa試劑盒類型介素檢查抗病毒試劑盒白介素檢查抗病毒試劑盒特種酶檢查抗病毒試劑盒蛋白檢查抗病毒試劑盒荷爾蒙檢查抗病毒試劑盒活性肽檢查抗病毒試劑盒癌細胞遙相呼應檢查抗病毒試劑盒藥用植物檢查抗病毒試劑盒其他生命體衡量檢查抗病毒試劑盒
 
關鍵詞: 50 試劑 孔中 分別 稀釋
 
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