尼氏染色法主要特點：操作簡便染色穩(wěn)定、分化時間短，適用范圍廣，可以用于石蠟組織切片的尼氏物質(zhì)/尼氏小體、神經(jīng)元等。 尼氏染色法操作步驟：1.固定：可采用乙醇、Carnoy固定液或中性福爾馬林溶液。2.組織切片：石蠟切片7~10 m或25 m(見注意事項4)。3.切片脫蠟入水。4.用甲基紫染色液涂片，染色10~20min。5.蒸餾水沖洗。6.用NisslDifferentiation分化4~8s，直到大部分染色被消除。7.直接經(jīng)無水乙醇至二甲苯，顯微鏡下觀察。8.如果有必要，重復(fù)步驟6和7。重復(fù)時，給予少量NissolDifferentiation分化。9.在二甲苯中充分沖洗。加拿大香脂或DPX封片。 尼氏染色法注意事項：1.尼氏體離體后容易溶解，所以組織取出后應(yīng)立即固定，否則難以著色。2.組織固定起著非常重要的作用，固定可采用乙醇、Carnoy固定液或中性福爾馬林溶液。3.本染色液對石蠟組織切片的尼氏染色效果較好。4.如果要證實尼氏物質(zhì)的存在，那么染色后必須要用NissolDifferentiation分化。5.石蠟切片厚度7～10 m或25 m(皮質(zhì)神經(jīng)元密度的評估要用25 m厚的切片)。6.染色后的標(biāo)本務(wù)必避光保存，否則容易褪色。7.主要由甲基紫染色液、分化液等組成。尼氏物質(zhì)呈紫黑藍(lán)色,神經(jīng)元呈淡紫藍(lán)色,細(xì)胞核呈紫藍(lán)色。

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