背景介紹
健康的身體是人人都想一直保持的,但是伴隨著人的衰老,一些疾病的得病率也在不斷攀升,例如:糖尿病、心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病等。脂質(zhì)作為人體需要的重要營養(yǎng)素之一,在許多生物過程中都扮演著重要的角色,是人體細胞組織的組成成分,為機體供給所需的能量,以及協(xié)助細胞信號傳導等。
SCIEX公司于2011年美國質(zhì)譜年會(American Society of Mass Spectrometry,ASMS)會議上展示了最新的SelexIonTM 技術。該技術是首個獲得高重現(xiàn)性、耐用性及易用性的離子淌度差分質(zhì)譜分離技術(Differential mobility Spectrometry,DMS),同時還可為高靈敏度的定量與定性分析提供更多的選擇性。
近年來,隨著科研人員對脂質(zhì)研究的深入,發(fā)現(xiàn)疾病的發(fā)生通常伴隨著體內(nèi)脂質(zhì)水平的紊亂,因此,將脂質(zhì)作為疾病的生物標志物的研究也越來越火熱,而如何全面檢測并定量分析人體內(nèi)的脂質(zhì)含量成為了研究重點。
那么如何全面檢測并定量分析人體內(nèi)的脂質(zhì)?
在最新的一篇研究衰老的文獻 “Cross-Platform Comparison of Untargeted and Targeted Lipidomics Approaches on Aging Mouse Plasma” 中,同時采用非靶向脂質(zhì)組學與靶向脂質(zhì)組學方法(LipidyzerTM)研究衰老老鼠血漿中脂質(zhì)的差異變化。在該文章中,非靶向脂質(zhì)組學與靶向脂質(zhì)組學方法工作流程如圖1所示,非靶向脂質(zhì)組學方法采用LC-HRMS技術,利用反相色譜方法分離脂質(zhì),數(shù)據(jù)分析采用傳統(tǒng)的分析方法,進行峰提取、峰對齊、峰鑒定、歸一化、峰定量、手動確證。靶向脂質(zhì)組方法采用SCIEX 公司LipidyzerTM平臺,相比非靶向脂質(zhì)組方法,LipidyzerTM采用差向離子淌度分離技術(DMS)對脂質(zhì)進行分離,因無需色譜分離,故采集時間更短;LipidyzerTM采用的是MRM 方法靶向分析脂質(zhì),故在數(shù)據(jù)分析過程中,僅需要3步(鑒定、歸一化、定量)即可得到準確的定量結果。
引用文獻:https://www.nature.com/articles/s41598-018-35807-4
Cross-Platform Comparison of Untargeted and Targeted Lipidomics Approaches on Aging Mouse Plasma.pdf
圖1. 靶向和非靶向工作流程
文章結果表明,LipidyzerTM方法在檢測的脂質(zhì)種類與數(shù)量上與傳統(tǒng)非靶向脂質(zhì)組學是相當?shù)?圖2),且都具有很好的定量準確度。研究者利用LipidyzerTM方法對衰老老鼠血漿的脂質(zhì)差異性分析中發(fā)現(xiàn)甘油三脂TAG在衰老過程中變化差異最大,說明TAG代謝在衰老過程中最為敏感,為未來走向臨床提供了可靠的生物標記物。
圖2. LipidyzerTM檢測出衰老過程中變化的脂質(zhì)
LipidyzeTM提供高通量大規(guī)模脂質(zhì)絕對定量“一站式”方案
SCIEX對于脂質(zhì)的檢測分析也推出了相應的解決方案——LipidyzerTM,能夠?qū)崿F(xiàn)13大類,1000多種脂質(zhì)的絕對定量分析。該平臺(圖3)提供了一套完整的靶向脂質(zhì)組學解決方案,包含樣品前處理,數(shù)據(jù)采集,以及數(shù)據(jù)分析。
圖3. LipidyzerTM平臺
多重技術優(yōu)勢適用臨床樣本分析,助力精準脂質(zhì)代謝與健康研究
LipidyzerTM利用離子淌度技術(DMS)實現(xiàn)不同脂類的完全分離,具有極強的特異性;方法內(nèi)包含13類脂質(zhì),50多個同位素內(nèi)標脂質(zhì),覆蓋了復雜的脂質(zhì)代謝通路;通過內(nèi)標的添加,實現(xiàn)每類脂質(zhì)的絕對定量分析(圖4)。該技術平臺已在人血清和血漿分析中得到驗證,成為臨床脂質(zhì)組分析的“即得”利器。
圖4. LipidyzerTM的優(yōu)勢