SSA 抗體,核糖核蛋白抗原抗體

提供各種抗體標(biāo)記服務(wù)：辣根過氧化物酶標(biāo)記 熒光素標(biāo)記 生物素標(biāo)記 膠體金離子標(biāo)記，將辣根過氧化物酶（HRP），熒光素（FTIC、RBITC、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、APC、PE）,生物素（Biotin）及膠體金離子（CO-AO）等四類能量高、顯示快的分子，以共價鍵和離子鍵的方式連接到抗體或抗原蛋白分子上，制備成高度靈敏和特異性的分子探針，廣泛用于醫(yī)學(xué)病理學(xué)、免疫組織化學(xué)、分子生物學(xué)、生物制藥與獸醫(yī)藥研究等領(lǐng)域的分析研究與技術(shù)測定。
抗體詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品編號  Rs-0635R
英文名稱  Anti-SSA/52KDa Ro
中文名稱  核糖核蛋白抗原抗體
抗體詳細(xì)介紹：SSA is ribonucleoprotein particle composed of a single polypeptide and one of four small RNA molecules. It is present in all mammalian cells studied but has no known function.[SUBCELLULAR LOCATION] Cytoplasm. Nucleus. [SIMILARITY] Belongs to the TRIM/RBCC family.
SSA/RO廣泛應(yīng)用于各種自身免疫性疾病檢測.

別  名  52 kDa Ro protein; Sjoegren syndrome type A antigen; SS-A; Ro（SS-A）; RO52; 52 kDa ribonucl... 更多  
產(chǎn)品類型  一抗 
交叉反應(yīng)  hu
蛋白分子量  Predicted Molecular Weight: 52kDa
性狀  Lyophilized or Liquid
濃度  1mg/1ml
免疫原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human SSA N-terminus.
亞型  IgG
產(chǎn)品應(yīng)用  WB=1:100-500 Elisa=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1/20-1/100
（石蠟切片需做抗原修復(fù)）

 Not yet tested in other applications.
 Optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user. 

 Anti-SSA 核糖核蛋白抗原抗體,現(xiàn)貨供應(yīng)中

相關(guān)知識：
抗體的制備 多克隆抗體的制備
*動物的選擇
*佐劑（adjuvant）
*免疫方法
*免疫劑量
*抗體效價的測定
*放血或定期抽血
（1） 動物的選擇
選擇什么動物來免疫取決于：
*所需抗血清的量
-小鼠只能提供1.0～1.5ml的血液，而山羊能提供幾升。
*能供免疫用的抗原量
-小鼠50?g足夠，而山羊需要幾毫克。
（1） 動物的選擇（續(xù)）
*動物的品系：免疫動物與提供抗原的動物之間的種系差異越大越好。
-例如哺乳動物的抗原可選擇非哺乳動物來制備抗體。
-常用的動物有兔、羊、馬、豬等，以兔（新西蘭兔，年輕，健壯，體重在2.5kg左右，雄性）為zui常用。
（2） 佐劑 （adjuvant）
*一般可溶性抗原注射后，迅速從注射部位擴(kuò)散、吸收代謝。佐劑可延長潴留時間，且延長免疫刺激作用。因此在制備抗體的過程中，常將抗原和佐劑一起注射。
*zui常用的佐劑是弗氏佐劑，又分為:
-弗氏不完全佐劑（Freund's incomplete adjuvant）
-弗氏完全佐劑（Freund's complete adjuvant）
弗氏不完全佐劑
（Freund's incomplete adjuvant, FIA）
*是由油劑（石蠟油或植物油）與乳化劑（羊毛脂或Tween80）混合而成，比例為1:1、2:1、3:1或5:1，可根據(jù)需要而定，通常2:1。
*使用時與水溶性抗原按1:1比例充分混合，使抗原分散在佐劑中形成油包水乳劑。
弗氏完全佐劑 （Freund's complete adjuvant, FCA）
*在弗氏不完全佐劑中加入活卡介苗或死的結(jié)核分枝桿菌（終濃度為2～20mg/ml），即成為FCA。
*免疫動物時，將弗氏佐劑與抗原按體積 1:1 混合乳化后（油包水）注入動物。
-一般首次注射時用完全佐劑乳化，第二次或第三次注射時用不完全佐劑或不用佐劑。
佐劑與抗原乳化的方法
*研磨法：適于制備大量的佐劑抗原
-先將不完全佐劑加熱，取1.73ml放人無菌玻璃研缽內(nèi)；緩緩滴入0.23ml活卡介苗，邊滴邊按同一方向研磨，使菌體完全分散。
-按同樣方法滴人抗原，每加一滴應(yīng)研磨至小滴消失。滴加抗原的速度要慢，待抗原全部加人后，應(yīng)成為乳白色粘稠的油包水乳劑。
*缺點(diǎn)：研缽壁上粘附大量乳劑，抗原損失較大，對微量或難得抗原不宜采用。
佐劑與抗原乳化的方法（續(xù)）
*注射器混合法
-將等量的完全佐劑和抗原分別吸人兩個5ml注射器內(nèi)，然后插入三通管內(nèi)，交替推動針管混勻，往復(fù)操作直至形成粘稠的乳劑為止。
*優(yōu)點(diǎn)：無菌操作，節(jié)省抗原或佐劑。
*缺點(diǎn)：不易乳化，時間長。
佐劑與抗原乳化的方法（續(xù)）
*快速乳化法：利用超聲波粉碎器可快速乳化抗原和佐劑混合物。
-將抗原和佐劑按所需量加入一離心管中，置于超聲波粉碎器上，粉碎頭浸入液面下 0.5cm，離瓶底0.5cm左右，以免打碎離心管。
-每次乳化 10～15s，然后置冰箱lmin左右。反復(fù)乳化3～4次即可完全乳化。管內(nèi)殘余量800r/min離心5～10min收集。
*優(yōu)點(diǎn)：簡單、快速、節(jié)省材料。
乳化劑的鑒定
*判斷乳化是否充分，可將一滴乳化好的液體滴在水面上（冷水中），如能長時間保持圓珠形而不散開，表示乳化達(dá)到要求。
（3） 免疫方法 免疫途徑
*常有靜脈、腹腔、肌肉、皮下、皮內(nèi)、淋巴結(jié)、腳掌等注射。
*一般采用多點(diǎn)注射方法
-常在足、掌、腋窩淋巴結(jié)周圍、背部兩側(cè)、頜下、耳后等處的皮內(nèi)或皮下。
-皮內(nèi)易引起細(xì)胞免疫反應(yīng)，有利于提高抗體的效價。
（3） 免疫方法 免疫途徑 （續(xù)）
*幾點(diǎn)說明：
-大動物一般不用腹腔注射
-顆?？乖褪褂米魟r不能靜脈注射
-抗原寶貴可采用淋巴結(jié)內(nèi)微量注射法，只需10～100?g抗原即可獲得較好的免疫效果。
-皮內(nèi)注射較困難，特別是天冷時更難注入。
（3） 免疫方法 次數(shù)及間隔時間
*次數(shù)一般為2～3次（初次免疫和加強(qiáng)免疫）
-首次注射后，10～15天再加強(qiáng)注射；
-劑量同首次或為首次的一半，用不全佐劑或不用佐劑。
*間隔時間，一般而言，動物越大，間隔越長
-豚鼠、大鼠為7～8天，兔子為10～15天，羊為14～28天；
-第三次注射的間隔時間更長些，效果更好。
舉例1：家兔的免疫
*初次免疫
-用50～200?g Ag加入FCA，在背部皮下注射6～8點(diǎn)，每點(diǎn)0.1～0.2ml，也可肌肉內(nèi)或皮內(nèi)注射；
*兩周后，加強(qiáng)免疫
-將50～200?g Ag于PBS或FIA中，在肌肉、皮下、靜脈或腹腔內(nèi)注射；
*抗體效價的檢測：加強(qiáng)免疫一周后，耳緣靜脈采血
-抗體效價測定可用環(huán)狀沉淀試驗、瓊脂雙向擴(kuò)散法等方法。前者抗體效價在1:4000以上，后者在1:16以上，即可采血，取血清進(jìn)一步提純。