全球第一臺(tái)可以實(shí)時(shí)定量蛋白-細(xì)胞相互作用的系統(tǒng)
全球第一臺(tái)可以計(jì)算細(xì)胞表面受體數(shù)量的系統(tǒng)
源于烏普薩拉大學(xué)生物醫(yī)學(xué)放射學(xué)實(shí)驗(yàn)室的先進(jìn)技術(shù)

LigandTracer系列儀器的研發(fā)團(tuán)隊(duì)來(lái)自于Ridgeview Instruments AB，起源于素有瑞典的劍橋大學(xué)、美蘇核競(jìng)爭(zhēng)見(jiàn)證人之稱(chēng)的瑞典烏普薩拉大學(xué)，瑞典烏普薩拉Ridgeview Instruments AB團(tuán)隊(duì)研發(fā)出全球第一臺(tái)SPR技術(shù)（現(xiàn)為美國(guó)GE公司Biacore產(chǎn)品），開(kāi)創(chuàng)了蛋白相互作用的新領(lǐng)域。但經(jīng)典的SPR技術(shù)主要用于大分子相互作用實(shí)時(shí)分析，而無(wú)法滿足蛋白和細(xì)胞，蛋白和組織相互作用的實(shí)時(shí)分析。隨著蛋白研究的深入，研究的目標(biāo)已經(jīng)開(kāi)始由大分子之間的相互作用，發(fā)展到蛋白跟細(xì)胞，甚至組織的相互作用研究。該團(tuán)隊(duì)目前又開(kāi)發(fā)出第一款可以實(shí)時(shí)定量蛋白-蛋白，蛋白-細(xì)胞，蛋白-組織相互作用的LigandTracer，其中LIGANDTRACER Green 熒光標(biāo)記檢測(cè)系統(tǒng)借助專(zhuān)業(yè)的熒光檢測(cè)器，可以在長(zhǎng)達(dá)幾分鐘至幾小時(shí)的時(shí)間內(nèi)，對(duì)FITC或其它類(lèi)似熒光標(biāo)記配體與細(xì)胞表面受體相互作用進(jìn)行實(shí)時(shí)觀察及動(dòng)力學(xué)和親和力分析研究。相關(guān)文獻(xiàn)發(fā)表于Nature以及核醫(yī)學(xué)的頂級(jí)雜志。LigandTracer也成為目前唯一專(zhuān)業(yè)的蛋白-細(xì)胞相互作用實(shí)時(shí)分析系統(tǒng)。
實(shí)驗(yàn)室常用的細(xì)胞培養(yǎng)皿放在一個(gè)傾斜的、緩慢旋轉(zhuǎn)的支架上，培養(yǎng)皿上方安裝著探測(cè)器。含有標(biāo)記蛋白的溶液加在培養(yǎng)皿底部，通過(guò)旋轉(zhuǎn)，細(xì)胞會(huì)接觸帶標(biāo)記的溶液，隨著標(biāo)記蛋白結(jié)合到細(xì)胞上，就會(huì)有清楚地波峰出現(xiàn)在實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的圖像上。每次監(jiān)測(cè)得到的波峰高度可以單獨(dú)提出來(lái)分析，進(jìn)行持續(xù)觀察、分析。最終，通過(guò)比較含有不同濃度的標(biāo)記蛋白的峰的高度可以計(jì)算和推導(dǎo)細(xì)胞和蛋白相互作用的親和力大小。

這款儀器真正實(shí)現(xiàn)了在任何一個(gè)實(shí)驗(yàn)室都可以實(shí)時(shí)分析蛋白-細(xì)胞相互作用。借助專(zhuān)業(yè)的熒光檢測(cè)器，可以在長(zhǎng)達(dá)幾分鐘至幾小時(shí)的時(shí)間內(nèi)，對(duì)熒光標(biāo)記配體與細(xì)胞表面受體相互作用進(jìn)行實(shí)時(shí)觀察及動(dòng)力學(xué)和親和力分析研究。 LED熒光激發(fā)檢測(cè)器： 藍(lán)色（488nm）-綠色（535nm）FITC檢測(cè)和其它類(lèi)似的熒光基團(tuán) 黃色（590nm）-紅（632nm）羅丹明紅和類(lèi)似的熒光基團(tuán) 紅色（632nm）-近紅外（670nm）Alexa Fluor和類(lèi)似的熒光探針 實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)孵育期和漂洗后的蛋白-細(xì)胞相互作用 可進(jìn)行幾分鐘甚至幾天的長(zhǎng)時(shí)間連續(xù)觀察 可精確觀察和記錄極易解離的蛋白互作 操作簡(jiǎn)單，樣品用量少，無(wú)需清洗培養(yǎng)皿
主要用于基于配基-受體的相互作用、抗原-抗體相互作用的免疫學(xué)領(lǐng)域以及醫(yī)學(xué)診斷、藥物篩選、腫瘤細(xì)胞的增殖與凋亡、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等方面的研究。 動(dòng)力學(xué)研究，如檢測(cè)抗體特異性、蛋白與細(xì)胞的結(jié)合速率、蛋白與細(xì)胞的親和-解離速率、親和力（KD常數(shù)） 靶向藥物研發(fā)、EC50 疾病治療，癌分子靶向治療藥物療效監(jiān)測(cè)，藥物分子與細(xì)胞的相互作用等等

LigandTracer優(yōu)點(diǎn)解析：
1.本儀器應(yīng)用定位在蛋白、細(xì)胞、組織水平上
所有的實(shí)驗(yàn)結(jié)果只有到細(xì)胞、組織甚至個(gè)體水平上才能真正有說(shuō)服力！
蛋白之間相互作用分析檢測(cè)方法有很多，比如SPR、QCM、RIA、IF、Microarray、ELISA、Y2H、FRET等等，但大多都是基于終點(diǎn)飽和法，并多次重復(fù)，無(wú)法掌握過(guò)程變化，目前能應(yīng)用于細(xì)胞與蛋白互作的，史無(wú)前例。而LigandTracer可以測(cè)定蛋白與細(xì)胞上、組織切片上蛋白之間的相互作用，且能滿足在相對(duì)低價(jià)位、實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。 2.實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)：
實(shí)時(shí)檢測(cè)對(duì)于研究具有不同動(dòng)力學(xué)的蛋白相互作用具有很強(qiáng)的指導(dǎo)意義，實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)提供了可靠的孵育時(shí)間和洗脫時(shí)間，大大降低了實(shí)驗(yàn)的盲目性和不確定性，甚至避免了錯(cuò)誤的實(shí)驗(yàn)結(jié)果；同時(shí)在醫(yī)藥研發(fā)、藥物篩選中也起到很好的比對(duì)結(jié)果，大大縮短了藥物篩選的時(shí)間。 3.不僅能測(cè)親和力，還能夠?qū)崟r(shí)反映動(dòng)力學(xué)過(guò)程，無(wú)需反應(yīng)達(dá)到平衡：
目前傳統(tǒng)的測(cè)定Affinity主要是靠達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡后加入的濃度推斷，即終點(diǎn)法測(cè)定。然而，不同類(lèi)型的結(jié)合方式或動(dòng)力學(xué)不同（如fast on- fast off和slow on- slow off）可能會(huì)導(dǎo)致差異很大的結(jié)果，孵育時(shí)間、沖洗時(shí)間均是很大的影響因素。對(duì)于fast on- fast off類(lèi)型的蛋白互作來(lái)說(shuō)，它可能在短時(shí)間內(nèi)即達(dá)到平衡后不久開(kāi)始解離，但若孵育時(shí)間長(zhǎng)可能會(huì)在洗脫過(guò)程之前就開(kāi)始解離、當(dāng)洗脫后可能全部已解離完畢，采用終點(diǎn)法測(cè)定會(huì)誤以為根本沒(méi)有結(jié)合而得出錯(cuò)誤的結(jié)論；而對(duì)slow on- slow off類(lèi)型來(lái)說(shuō)，為達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡往往需要數(shù)小時(shí)甚至數(shù)天，但因曲線趨勢(shì)變化很微弱，往往會(huì)被實(shí)驗(yàn)者誤以為已經(jīng)達(dá)到平衡；如果單獨(dú)靠進(jìn)一步延長(zhǎng)孵育時(shí)間，又存在抗體蛋白被細(xì)胞代謝掉的危險(xiǎn)，從而結(jié)果也不準(zhǔn)確。 LigandTracer，摒棄傳統(tǒng)終點(diǎn)法測(cè)定，結(jié)合實(shí)時(shí)圖像分析即可得到準(zhǔn)確數(shù)據(jù)，無(wú)需反應(yīng)達(dá)到平衡，節(jié)約時(shí)間和配體用量，同時(shí)也大大節(jié)省了人力、物力！這一點(diǎn)在新藥篩選方面會(huì)更加有用，如要求效果快速的安眠藥和要求藥效時(shí)間長(zhǎng)的止痛藥方面應(yīng)用的就不應(yīng)該是同樣的動(dòng)力學(xué)過(guò)程，如果有實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)的幫助，藥物篩選效率會(huì)大大提高。 4.能夠根據(jù)實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)推斷細(xì)胞表面受體數(shù)量，無(wú)需用飽和法測(cè)定，既節(jié)省了試劑同時(shí)結(jié)果足夠準(zhǔn)確。 5.多種型號(hào)滿足不同實(shí)驗(yàn)室需求：
除了Green型儀器外，還有另外三種放射性標(biāo)記檢測(cè)的儀器Yellow/Grey/White，讓實(shí)驗(yàn)人員有更多種選擇。 6.功能強(qiáng)大： （1）首家應(yīng)用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和反映蛋白與細(xì)胞結(jié)合速率和結(jié)合保留時(shí)間 （2）使用非常方便，同時(shí)有先進(jìn)的軟件可以長(zhǎng)至幾天的監(jiān)測(cè)和進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理 （3）KD常數(shù)的準(zhǔn)確測(cè)定，無(wú)需計(jì)數(shù)細(xì)胞、根據(jù)曲線變化即可反映結(jié)合效率等常數(shù) （4）動(dòng)力學(xué)研究 （5）可以定量測(cè)定每個(gè)細(xì)胞受體數(shù)量 （6）使用范圍廣泛：一切基于抗原-抗體相互作用，配基-受體相互作用原理的實(shí)驗(yàn)都可以應(yīng)用此儀器。所以在免疫學(xué)領(lǐng)域，蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域，醫(yī)學(xué)診斷、藥物篩選等核醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，以及腫瘤細(xì)胞增殖與凋亡、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等基礎(chǔ)生命科學(xué)研究領(lǐng)域都可以得到廣泛應(yīng)用。 產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)