天美（中國(guó)）科學(xué)儀器有限公司

【himacCP-70NE超速離心機(jī)及P32ZT區(qū)帶轉(zhuǎn)頭在疫苗生產(chǎn)中的應(yīng)用】

百日咳是由百日咳桿菌引起的，具有高強(qiáng)度的傳染性疾病。多數(shù)表現(xiàn)為劇烈陣發(fā)性咳嗽，病程長(zhǎng)達(dá)2-3個(gè)月，甚至導(dǎo)致嬰幼兒死亡，隨著百日咳疫苗廣泛接種，兒童發(fā)病率已明顯下降。百日咳一直被認(rèn)為是一種兒童疾病，但實(shí)際上最常見青少年和成人，患者會(huì)將百日咳傳染給其他家庭成員，尤其是嬰幼兒。

百日咳的危害：絕大多數(shù)兒童可以戰(zhàn)勝百日咳，但不到1歲的嬰幼兒中被傳染而導(dǎo)致嚴(yán)重疾病是常見情況。1：超過一半的嬰幼兒必須住院治療2：超過一半的嬰幼兒會(huì)出現(xiàn)短暫的呼吸停止。3:8名幼兒中有1名出現(xiàn)肺炎。

如何預(yù)防百日咳？最有效，最經(jīng)濟(jì)的預(yù)防手段就是接種百日咳疫苗。

鑒于目前國(guó)家對(duì)百日咳疫苗要求非常嚴(yán)格，需要一種高效的、高質(zhì)量的生產(chǎn)純化方法，本文將介紹使用himac（前身為日立工機(jī)）超速離心機(jī)CP-70NE及P32ZT區(qū)帶轉(zhuǎn)頭進(jìn)行純化的方法。

◆主機(jī)及轉(zhuǎn)頭：himac超速離心機(jī)CP-70NE及區(qū)帶轉(zhuǎn)頭P32ZT

                            CP70NE                                                                     P32ZT轉(zhuǎn)頭

◆himac超速離心機(jī)在GMP與FDA方面合規(guī)性：

√用戶管理和密碼鎖控制

√電子簽名

√實(shí)時(shí)運(yùn)行曲線及記錄

√遠(yuǎn)程監(jiān)控和診斷

√儀器管理和運(yùn)行數(shù)據(jù)記錄

√運(yùn)行備注（批號(hào)、追溯）

√轉(zhuǎn)頭運(yùn)行追蹤

√無粉塵及清潔設(shè)計(jì)

◆轉(zhuǎn)頭：區(qū)帶轉(zhuǎn)頭P32ZT

◆離心條件：

上下樣轉(zhuǎn)速：2000rpm；運(yùn)行轉(zhuǎn)速：32000rpm；最大RCF:102000xg；時(shí)間：18小時(shí)；加速/減速速率：9加/7減；設(shè)置溫度：2-8℃；蠕動(dòng)泵速度50ml/min

密度梯度液：10%蔗糖溶液；30%蔗糖溶液；40%蔗糖溶液；0.9%滅菌生理鹽水；百日咳抗原

◆離心步驟：

1.使用注射用水將分析純級(jí)別蔗糖稀釋，制作成10,30,40%的蔗糖密度梯度介質(zhì)

2.按如下順序?qū)⒏魈荻纫河萌鋭?dòng)泵均勻緩慢泵入轉(zhuǎn)頭（轉(zhuǎn)頭運(yùn)行2000rpm）：

3.30%蔗糖溶液（1.381g/cm3）    550ml

   10%蔗糖溶液（1.038g/cm3）    550ml

   百日咳抗原                                500ml

   0.9%生理鹽水90ml                     90ml

    總共                                        1690ml

4.離心時(shí)間結(jié)束后用40%蔗糖溶液從加樣頭邊孔將目的抗原頂出

5.目的抗原收集：每100ml一管進(jìn)行收集，共8個(gè)收集管

結(jié)果及結(jié)論：結(jié)果顯示蔗糖密度梯度離心完成后收集到百日咳抗原所在區(qū)域。使用上述蔗糖密度梯度方法可以對(duì)大規(guī)模百日咳疫苗生產(chǎn)中抗原進(jìn)行純化，濃縮及后續(xù)的疫苗產(chǎn)品研究和工藝升級(jí)。

（來源：天美（中國(guó)）科學(xué)儀器有限公司）