二氧化碳培養(yǎng)箱用途廣泛,主要用來培養(yǎng)細胞、組織和某些特殊微生物,為它們提供一個良好的體外環(huán)境,廣泛應(yīng)用于細胞學(xué)實驗、微生物學(xué)實驗、組織學(xué)實驗以及分子生物學(xué)實驗。因此,二氧化碳培養(yǎng)箱的消毒和維護尤為重要。
二氧化碳培養(yǎng)箱的常見污染混入二氧化碳培養(yǎng)箱(細胞培養(yǎng)環(huán)境)中,對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物都應(yīng)視為污染。不同的污染物對細胞的影響也有差別,有的影響是長期、緩慢和潛在的,而有的則能在很短的時間內(nèi)抑制細胞生長或產(chǎn)生有毒物質(zhì)殺害細胞。根據(jù)污染源不同主要可以分為:生物性污染、化學(xué)性污染、物理性污染和氣溶膠污染。
1、生物性污染:
這是最常見也是危害最大的污染。如細菌、病毒、真菌,支原體等。這些污染源有可能是人為帶入,或是細胞在放入二氧化碳培養(yǎng)箱前已經(jīng)受污染,再或者是箱體本身沒有消毒干凈。體外培養(yǎng)的細胞自身沒有抵抗污染的能力,而培養(yǎng)基中所加抗生素的抗微生物污染的能力也是有限的,因而細胞微生物污染一旦發(fā)生往往是無法挽救的。
2、化學(xué)性污染:
二氧化碳培養(yǎng)箱中許多化學(xué)物質(zhì)都可以引起細胞污染。如細胞培養(yǎng)容器清洗過程中殘留的洗滌劑、加濕器中未純化的水、人為帶入的液體或氣體都可能成為化學(xué)性污染的來源。不同化學(xué)物質(zhì)對細胞污染是不一樣的,有的可能促進或抑制細胞生長,有的甚至殺死細胞。
3、物理性污染:
培養(yǎng)環(huán)境中的物理因素,如溫度、放射線、振動、輻射(紫外線或熒光)會對細胞產(chǎn)生影響。物理性污染常常被人們所忽視或被籠統(tǒng)地歸為化學(xué)性污染,其主要是在代謝水平或分子水平上,影響細胞正常的生理過程。
4、氣溶膠污染:
氣溶膠是液體或固體微粒均勻地懸浮在氣體介質(zhì)中的分散體系,當(dāng)微粒是微生物時,就是微生物氣溶膠,如果這種微生物是病原性的,就是病原微生物氣溶膠。細菌、病毒等病原體通過氣溶膠可在人與人、人與環(huán)境之間傳播。
1、二氧化碳培養(yǎng)箱的選擇:
二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們設(shè)計了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生,其主要是防污染設(shè)計和消毒滅菌系統(tǒng)的改進,以達到消毒滅菌的目的。如帶有紫外消毒功能的二氧化碳培養(yǎng)箱、帶HEPA過濾器的二氧化碳培養(yǎng)箱,以及帶高溫消毒的二氧化碳培養(yǎng)箱等,后者又分為高溫干熱和高溫濕熱兩類。這些裝置的滅菌能力各有千秋,紫外燈消毒范圍有限,距離燈越遠,消毒能力越差。
HEPA過濾器的過濾膜孔徑有限,無法去除病毒和一些微小細菌,并且容易損耗,也有其局限性。相比而言,高溫消毒則是比較有效的方法。而高溫干熱和高溫濕熱也有所不同,由于蒸汽潛熱大、穿透力強,容易使蛋白質(zhì)變性或凝固,因此高溫濕熱的滅菌效率比干熱滅菌法高。
2、提高素質(zhì):
人為因素和態(tài)度可以對環(huán)境、人和物起到一個正面或負面的影響。以安全為目的,實驗室內(nèi)的工作人員應(yīng)明白自身的態(tài)度和人為因素對實驗環(huán)境的重要性。因此,對實驗室工作人員進行專業(yè)培
3、重視管理:
細胞室內(nèi)的二氧化碳培養(yǎng)箱應(yīng)由專人負責(zé)管理,定期對系統(tǒng)進行校正,至少每年一次。各項數(shù)值一旦固定后,不要隨意調(diào)節(jié),以免影響箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度的波動,降低機器的靈敏度,同時還會影響二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)的細胞生產(chǎn)狀態(tài)。
使用前,對二氧化碳培養(yǎng)箱的各項指標(biāo)進行系統(tǒng)校正,并且對箱體和內(nèi)部進行消毒處理,等各項數(shù)值穩(wěn)定一段時間后方可使用。一旦出現(xiàn)緊急問題,應(yīng)及時上報,應(yīng)由專業(yè)的人員進行操作,馬上采取應(yīng)對措施,以免造成不必要的損失。
4、規(guī)范操作:
二氧化碳培養(yǎng)箱的使用雖然很簡單,但同樣需要規(guī)范操作。進細胞室必須穿著實驗服(白大褂),換上拖鞋或者穿一次性的鞋套。實驗操作時必須帶一次性手套,特別是打開二氧化碳培養(yǎng)箱前,必須先用75%的酒精噴壺噴洗雙手再開二氧化碳培養(yǎng)箱,再取出細胞培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板。顯微鏡下查看細胞培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板后,再放回二氧化碳培養(yǎng)箱時,同樣也要噴酒精消毒。
二氧化碳培養(yǎng)箱的兩個門開關(guān)取(放)物要迅速,不可長時間開著,否則會影響CO2的濃度、溫度和濕度,以及造成污染。尤其是不要忘了關(guān)好里層的玻璃門。切記開門時不要對著二氧化碳培養(yǎng)箱說活,大口呼吸甚至是打噴嚏。
5、加強防護:
如果實驗人員生病而攜帶病菌,應(yīng)帶上口罩再進細胞室,病情嚴重的則不宜進行實驗。女性同志實驗時頭發(fā)應(yīng)梳起,防止皮屑污染及連帶事件的發(fā)生。如果實驗室條件允許,可以每人佩戴實驗帽、手套和口罩,以防污染二氧化碳培養(yǎng)箱及對實驗人員的自身的防護。
6、注重保養(yǎng):
二氧化碳培養(yǎng)箱置于細胞室中,室內(nèi)需保持干燥,環(huán)境溫度不能超過30℃(建議:18℃-30℃)。二氧化碳培養(yǎng)箱放置在遠離門窗、供暖設(shè)備和空調(diào)導(dǎo)管的地方,不能被陽光直接照射。二氧化碳培養(yǎng)箱的放置臺面必須水平避震且非易燃材質(zhì),不能靠在墻壁或類似的建筑物上,其后部接電處和墻壁至少保留30cm的空間。一旦放好不宜再移動。
7、校正處理:
二氧化碳培養(yǎng)箱在放好后,再對箱體和內(nèi)部進行消毒處理,并且對各項指標(biāo)進行系統(tǒng)校正,等各項數(shù)值穩(wěn)定一段時間后方可使用。因CO2氣體對于健康是有害的,因此細胞室需安裝足夠的通風(fēng)裝置。空氣中的粉塵氣溶膠易造成二氧化碳培養(yǎng)箱的污染,需要一個流通的空氣環(huán)境。將二氧化碳培養(yǎng)箱的管理任務(wù)分派給有經(jīng)驗的檢查人員是十分重要的。如長期不使用二氧化碳時,應(yīng)將CO2開關(guān)關(guān)閉,防止CO2調(diào)節(jié)器失靈。
1、二氧化碳培養(yǎng)箱的清潔
清潔是指去除灰塵、污垢和有機污漬。清潔方法包括刷、吸、干擦、洗滌或用浸泡肥皂水或清潔劑的濕布拖擦。粉塵、污物以及有機物是微生物的棲身之所,并可能影響除污染劑(抗菌劑、化學(xué)殺菌劑以及消毒劑)的作用。
二氧化碳培養(yǎng)箱必須先經(jīng)過清潔才能實現(xiàn)消毒和滅菌的目的,許多殺菌劑只對經(jīng)過清潔過的物品才具有殺菌活性。清潔時必須使用與以后使用的消毒劑或殺菌劑化學(xué)性質(zhì)上相容的試劑進行清潔、消毒。
①清潔箱體表面:先拂去表面的灰塵,再用濕的海綿或軟布清洗,再用軟布擦干。如果有污物則用低濃度的清潔劑清洗,然后擦干。
②清洗箱體內(nèi)部:選擇合適的消毒劑。所有的物件和表面必須徹底清洗,然后用無菌水沖洗,再擦干或晾干。
③清洗玻璃門:清洗箱內(nèi)的玻璃門時使用的清潔劑和清洗培養(yǎng)箱內(nèi)部時使用的相同。然后用蒸餾水漂洗,從而清除殘留的清潔劑,最后用軟布把門擦干。
2、二氧化碳培養(yǎng)箱的消毒和滅菌
消毒是指殺死微生物的物理或化學(xué)手段,但不一定殺死其孢子。滅菌是指殺死所有微生物,當(dāng)二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)細胞受到污染時則需要采取滅菌措施。一般,在二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)細胞沒有污染的情況下平均1-3個月徹底消毒一次。最常用的3種消毒滅菌的方式是:液體消毒劑、紫外和加熱。
①液體消毒劑:選擇對二氧化碳培養(yǎng)箱無腐蝕性的液體消毒劑,并且液體消毒劑的消毒效果好壞和很多因素有關(guān)。比如:場所的溫度、接觸時間、pH、穿透能力、有機物的反應(yīng)。這些因素中的一些很小的變化可能會造成去污劑的效力上大的不同。因此甚至在很有利的情況下,當(dāng)最終要求必須無菌時,液體去污劑也不是完全可信賴的去污方法。
②紫外消毒:一般先用蒸餾水清洗干凈后,再用紫外燈照射(帶紫外燈的二氧化碳培養(yǎng)箱)一天或者用手提式的紫外燈照射。
③加熱:濕熱和干熱被認為是殺菌最有效的方法。在一般環(huán)境下,高壓滅菌器加熱到121℃快速產(chǎn)生蒸汽是最方便的方法。干熱160℃-170℃,2-4小時在不具有滲透性、非有機體的物質(zhì)(如玻璃)是可行的凈化方法,但是甚至在有機體或非有機體的淺層也不能被絕緣。
除了以上幾種方法外,還可以采用聯(lián)合殺菌的方法,幾種消毒滅菌的方法同時使用來達到徹底清潔的效果。
2018-09-18 17:23:58 2951次 http://www.yiqi.com/daogou/detail_837.html 熱門標(biāo)簽:我國制造培養(yǎng)箱的歷史也已有幾十年的歷史了,在世界培養(yǎng)箱市場的中低端我們占有一席之地。培養(yǎng)箱適用于環(huán)境保護、衛(wèi)生防疫、藥檢、農(nóng)畜、水產(chǎn)等研究、院校、生產(chǎn)部門。是水體分析,細菌、霉菌、微生物的培養(yǎng)、保存,植物栽培,育種實驗的專用恒溫設(shè)備。
09-19
培養(yǎng)箱的種類繁多,目前應(yīng)用最為廣泛的培養(yǎng)箱主要有生化培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、電熱恒溫培養(yǎng)箱、隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱四種類型,每種類型都有其特點和獨特的功用,以用于不同的科研及教學(xué)領(lǐng)域。
09-19
培養(yǎng)箱具有制冷和加熱雙向調(diào)溫系統(tǒng),是植物、微生物、遺傳等科研部門不可缺少的實驗室設(shè)備,被廣泛應(yīng)用于低溫恒溫試驗、培養(yǎng)試驗、環(huán)境試驗等。近年來,隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,培養(yǎng)箱為生命科學(xué)及生化醫(yī)藥領(lǐng)域帶來新變革。
09-19
用戶對培養(yǎng)箱都有兩條最基本的要求:一是要求培養(yǎng)箱能夠?qū)囟群蜐穸忍峁┳罹_穩(wěn)定的控制,以便于其研究工作的進展;二是要求培養(yǎng)箱能夠?qū)ε囵B(yǎng)箱內(nèi)的微生物污染進行有效的防范,并且能夠定期消除污染,以保護研究成果,防止樣品損失。
09-19
培養(yǎng)箱,具有制冷和加熱雙向調(diào)溫系統(tǒng),溫度可控的功能,是植物、生物、微生物、遺傳、病毒、醫(yī)學(xué)、環(huán)保等科研、教育部門不可缺少的實驗室設(shè)備,廣泛應(yīng)用于低溫恒溫試驗、培養(yǎng)試驗、環(huán)境試驗等。
09-19
細胞培養(yǎng)箱是通過對周圍環(huán)境條件的控制,制造出一個能使細胞或組織更好地生長的環(huán)境。細胞培養(yǎng)箱能很精確地提供細胞培養(yǎng)需要的溫度、濕度、氣體環(huán)境等參數(shù),性能穩(wěn)定、響應(yīng)迅速、可靠性高,且能有效防范對培養(yǎng)細胞的污染。
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三氣培養(yǎng)箱是一種新型的高氧培養(yǎng)箱,它主要通過控制O2或N2的輸入量,來實現(xiàn)對三種氣體O2、N2及CO2三氣分別控制。三氣培養(yǎng)箱箱體中只含N2、O2、CO2,三種氣體比例加起來按100%計,只用精確控制其中兩種氣體的含量即可控制三種氣體含量。
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