酶標儀在實驗室中的應用越來越普及,酶標儀的檢定也就越來越重要。酶標儀的檢定內容主要包括干涉濾光片波長誤差及重復性、吸光度誤差、穩(wěn)定性和重復性、儀器靈敏度、通道差異及吸光度的線性。
吸光度示值穩(wěn)定性(r)的檢定:
選用492nm波長或儀器特有的專一波長,將吸光度標稱值為1.0A的光譜中性濾光片,平放在微孔酶標板的空板架上,以空氣為參比,測量并記錄酶標儀的初始吸光度示值(A0),5min、10min后分別再測一次。吸光度示值穩(wěn)定性(r)計算:r等于后兩次吸光度示值的最大值與A0的差。
波長示值誤差和波長重復性的檢定:
從酶標儀取出儀器所用有標稱波長(λ)的干涉濾光片(405,450,492,620nm),使用波長示值誤差優(yōu)于±0.5nm的分光光度計,將干涉濾光片用1mm左右銅或鋁金屬絲懸掛固定于分光光度計比色杯架第二孔右外側,干涉濾光片平面需與入射光束垂直。以1nm的改變幅度,從低到高,檢測各干涉濾光片在(±20)nm范圍內的透射比,繪制波長一透射比特性曲線,求出峰值波長(λi),每片干涉濾光片重復檢測三次并求峰值波長均值。
干涉濾光片波長示值誤差(△λ)計算:△λ=峰值波長均值-λ;波長重復性(δλ)計算:δλ等于三次檢測峰值波長最大值和最小值之差。
吸光度示值誤差的檢定:
先將吸光度標稱值(A)分別為0.2,0.5,1.0,1.5的四塊光譜中性濾光片(分光光度計附件),在分光光度計上依次選用405,450,492,630nm波長或酶標儀特有的專一波長,以空氣為參比,檢測光譜中性濾光片的吸光度。每個濾光片每個波長檢測三次,取均值作為該片在該波長下的吸光度標準值(As)。然后,將四塊光譜中性濾光片同時平放在微孔酶標板的空板架上,以空氣為參比,酶標儀連續(xù)測量3次,依次記錄儀器吸光度示值,并計算平均值(Ax)。
吸光度示值誤差(△A)計算:△A=Ax-As,取計算后的所有△A中的誤差最大值作為該酶標儀的吸光度示值誤差。
吸光度重復性的檢定:
按吸光度示值計算的方法將吸光度標稱值(A)為0.5或1.0光譜中性濾光片,以空氣為參比,于酶標儀微孔酶標板的空板架某一固定孔位重復測定6次(n),記錄每一次吸光度(Xi),求吸光度均值,按下式計算RSD偏差值(RSD),以RSD表示儀器吸光度重復性。
靈敏度檢定:
選用450nm波長或儀器特有的專一波長,使用量程適合并檢定合格的A級加樣器,在未包被的空板條某一孔加入200μl含鉻量為5mg/L的重鉻酸鉀溶液,測量并記錄吸光度值(Am),此吸光度值即為酶標儀靈敏度。
通道差異檢定:
多通道酶標儀選用450nm波長或儀器特有的某一波長,將吸光度標稱值為1.0A光譜中性濾光片置于空板架上,以空氣為參比,依次檢測該濾光片在各通道的吸光度。通道差異(δA)計算:δA等于所有通道檢測吸光度中最大值和最小值的差。
線性驗證:
將含鉻量為700mg/L的重鉻酸鉀溶液和0.05mol/L的硫酸溶液按比例(0:7,1:6,2:5,3:4,4:3,5:2,6:1,7:0)配成不同稀釋度的系列溶液共8管,每管取200μl加入未包被的空板條微孔,以450nm/630nm雙波長檢測吸光度,重復測定兩次取均值,進行回歸分析,計算相對標準估計誤差(Sy,x)。
檢定結果的判斷標準:
參照計量性能要求,酶標儀檢定結果的判斷標準為示值穩(wěn)定性(A)±0.005;波長示值誤差(nm)±3;波長重復性(nm)±1.5;吸光度示值誤差(A)±0.03;吸光度重復性(%)≤1.0;靈敏度(L/mg)≥0.006;通道差異(A)≤0.03(單通道酶標儀無此項要求);線性±2.0%。
酶標儀檢定對使用的設備、材料等都有具體而嚴格的要求,保證檢定結果的準確可信。酶標儀檢定工作的主要條件是實驗室必須具備一臺經計量部門檢定達I級合格的分光光度計,且附件配有完好的光譜中性濾光片,這對吸光度的誤差檢定非常重要,因為分光光度計和酶標儀比色角度的不同,只能通過光譜中性濾光片檢定吸光度誤差。
酶標儀的自檢是對儀器性能狀態(tài)的評價,也為儀器的維護、維修及配件的更換提供依據,是實驗室質量保證的基礎,具有性能優(yōu)良分光光度計的臨床實驗室可進行酶標儀的自檢。
2018-11-08 11:07:46 1594次 http://www.yiqi.com/daogou/detail_1431.html 熱門標簽:洗板機洗滌的目的是將固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他多余的游離反應物質分開。即洗滌除去未結合的抗原及雜質,經洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體。
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血氣分析儀是用于判斷分析患者機體的呼吸和代謝功能的儀器。血氣分析可衡量患者酸堿平衡狀況、血液氣體含量,有助于對呼吸狀態(tài)進行全面精確的分析判斷,為危重患者的診斷、治療提供可靠依據、是危重患者監(jiān)測內容的重要指標。
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尿液分析儀是測定尿中某些化學成分的自動化儀器,它是醫(yī)學實驗室尿液自動化檢查的重要工具,此種儀器具有操作簡單、快速等優(yōu)點。
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血細胞分析儀是廣泛應用于醫(yī)療領域的血液檢測儀器,能檢測出血液參數中紅白細胞總數、血小板和血紅蛋白等多種血液項目,并通過計算給出各細胞相關參數,得出來的參數能為醫(yī)生診斷和治療患者提供有效依據,是臨床檢驗科室使用率最高的常規(guī)設備之一。
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