蛋白質印跡法（免疫印跡試驗）就是Western Blot。作為一種實驗方法。它常被用于分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中。生物組織樣品或者凝膠電泳處理過的細胞經(jīng)過特異性抗體著色，通過對著色的位置和著色深度的分析來使特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的信息獲得。

電泳前準備工作

1、玻璃板的清洗

使用一只手將玻璃板扣緊，使用另一只手蘸點洗衣粉輕輕擦洗。在擦洗過兩面之后，使用自來水沖，再用蒸餾水沖洗干凈后立在筐里晾干。

2、灌膠與上樣

（1）對齊玻璃板后放入夾中卡緊。然后垂直卡在架子上準備灌膠。

（2）將10%分離膠配制出來，將TEMED加入之后，馬上搖勻，就能夠灌膠。灌膠時，能夠沿玻璃放出用10ml槍吸取的5ml膠。等到膠面一直升到綠帶中間線高度為止，之后將一層水加在膠上，液封后的膠能夠更加迅速地凝固。

（3）當膠已經(jīng)凝固的時候，會有一條折射線出現(xiàn)在水和膠之間。再等3分鐘，膠凝固充分，可以將膠上層水倒掉，并且使用吸水紙吸干水。

（4）將4%的濃縮膠配制而成，將TEMED加入以后，馬上搖勻就能夠灌膠。將濃縮膠灌入并且使之充滿剩余空間，在濃縮膠中插入梳子。為了防止膠中產(chǎn)生氣泡，灌膠時要沿玻璃板使膠流下。在將梳子插入時，要保持梳子水平。之所以會經(jīng)常在濃縮膠凝固的過程中兩邊補膠，是因為膠凝固時會收縮，從而減小了體積，從而減小了加樣孔的上樣體積。等到濃縮膠凝固之后，拔出梳子。

（5）將濃縮膠用水沖洗一下，然后往電泳槽中放入。

（6）蛋白含量檢測結束之后，將上樣量也就是含50ng蛋白的溶液體積計算出來。在0.5ml離心管中加入取出的上樣樣品，將5×SDS上樣緩沖液加入直到終濃度為1×，為了使蛋白變性，上樣前要在沸水中將樣品煮5min。

（7）將足夠的電泳液加入之后，準備開始上樣。用微量進樣器貼壁將樣品吸出。在加樣孔中插入加樣器針頭將樣品緩慢加入。在將下一個樣品加入的時候，為了防止交叉污染，需要在外槽電泳緩沖液中對進樣器洗滌3次。