數(shù)字PCR技術(shù)是一項(xiàng)新的核酸檢測(cè)和定量技術(shù)?？瞻讬z測(cè)限LOB （Limit of Blank）是判斷數(shù)字PCR技術(shù)檢測(cè)能力的重要參數(shù)。
LOB（the limit of blank）是一項(xiàng)統(tǒng)計(jì)學(xué)實(shí)驗(yàn)參數(shù)。在可信度大于95%的概率下，對(duì)于不含有分析物的樣品（空白樣品），LOB是可能觀察到的最高檢測(cè)結(jié)果。換句話說(shuō)就是最大的假陽(yáng)性數(shù)。 為什么要在數(shù)字PCR中計(jì)算LOB ? 在數(shù)字PCR (dPCR)中，多種因素可以引起假陽(yáng)性。定量核酸時(shí)確定假陽(yáng)性的cutoff對(duì)dPCR檢測(cè)的穩(wěn)定性至關(guān)重要。為了定義這個(gè)cutoff，檢測(cè)閾值通常設(shè)置在LOB值之上，而在檢測(cè)校準(zhǔn)期間必須首先為每個(gè)目標(biāo)確定空白LOB值。此外，實(shí)驗(yàn)LOB值對(duì)于判斷反應(yīng)是正還是負(fù)以及計(jì)算LOD值都是必要的。
95%置信度LOB如下表所示： R：重復(fù)次數(shù)，一般≧30 和 ：分別為假陽(yáng)性個(gè)數(shù)的平均值和標(biāo)準(zhǔn)方差
corr：校正平均值
當(dāng) =0（即假陽(yáng)性永遠(yuǎn)不會(huì)出現(xiàn)），則LOB（95%）=0
當(dāng)LOB為非零時(shí)，可以用概率分布加權(quán)的 減去假陽(yáng)性 的方法來(lái)校正實(shí)驗(yàn)樣品中目標(biāo)核酸的量。 更多LOB值介紹可登陸Gene- 數(shù)字PCR學(xué)堂（www.cycloudbio.com數(shù)字PCR學(xué)堂快速入口）統(tǒng)計(jì)工具查看，您也可以選擇其他感興趣的應(yīng)用教程，其中包含從實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)到數(shù)據(jù)分析的詳細(xì)工作流程。 您還可以通過(guò)搜索導(dǎo)航工具直接搜索特定的項(xiàng)目（ dPCR的DNA準(zhǔn)備 ， 熒光溢出 等），或點(diǎn)擊我們的 HOW TO 選擇您需要的部分（設(shè)計(jì)、分析、報(bào)告）。
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