檢測(cè)儀器:島津 PPSQ-31A 蛋白多肽自動(dòng)測(cè)序儀 
一、 蛋白質(zhì)N端測(cè)序的主要應(yīng)用:
1.樣品：蛋白質(zhì)，多肽樣品的氨基酸序列測(cè)定
2.優(yōu)勢(shì)：能連續(xù)測(cè)定 60 個(gè)以上的氨基酸序列
3.來(lái)源:天然提?。▌?dòng)物/植物/微生物）；合成多肽；重組蛋白等
二、 樣品要求:
1.純度: 95（基于摩爾數(shù)）
2.含量:50-100pmol(液體體積控制在 20ul)
3.修飾封閉:N 端未被封閉
4.樣品形式:液體；干粉；PVDF 膜
5.無(wú)干擾物:蛋白酶；氨基酸；胺；鹽分；乙醛；去污劑等
三、 客戶提供信息:
1.純度：純度檢測(cè)結(jié)果及圖譜信息
2.修飾：樣品可能修飾情況
3.制備方法：如 SDS,HPLC 及其它方式
4.驗(yàn)證目的：提供理論序列
5.表觀分子量
其它注意事項(xiàng)：
1.郵寄要求：使用干冰冷凍保護(hù)
2.液體樣品：
可用溶劑：蒸餾水、TFA 水溶液、醋酸水溶液、乙氰水溶液以及三甲基胺水溶液。
不可用的溶劑：氨鹽、Tris 等，含有 1 級(jí)、2 級(jí)胺的鹽溶液，含有 SDS 的溶液
3.固體樣品：
干燥處理的樣品，請(qǐng)先確認(rèn)干燥處理前的溶劑中不含有上述不兼容的溶劑。如果含有不兼容的溶劑時(shí)，請(qǐng)告知我方檢測(cè)人員。
4.PVDF 膜：注意以下方面
1)樣品量：5-8 條泳道，每條泳道的樣品盡量用最高濃度樣品，上最大體積（盡量使條帶長(zhǎng)胖為正常的 2-3 倍寬度）
2)硝酸纖維素膜：具有耐藥性，不能使用。
3)在電轉(zhuǎn)印中使用的緩沖液盡可能不含甘氨酸。在使用了含甘氨酸的緩沖液時(shí)，請(qǐng)告知我方檢測(cè)人員。
4)染色劑推薦使用考馬斯亮藍(lán)（CBB-R250）。
5)推薦使用下列的 PVDF 膜：