角質(zhì)層制片光學(xué)特征-葉的下角質(zhì)層觀察顯微鏡

  永久裝片
  甘油膠是包埋角質(zhì)層的理想制片荊。它不但具有極好的光學(xué)特性，易
于操作，而且在包埋期間仍可處理角質(zhì)層。包埋前，角質(zhì)層要存放在甘油
水溶液中，并加幾滴石炭酸，以防止真藺生長(zhǎng)。被包埋在加拿大樹(shù)膠或合
成樹(shù)脂中的角質(zhì)層，首先需要將其放到通常會(huì)毀壞易碎材料的二鉀苯或乙
酸中脫水.因?yàn)檎扯雀?，用這些溶荊包埋的玻片通常很厚，并且角質(zhì)層不容
易放平。經(jīng)過(guò)一些年以后，加拿大樹(shù)膠還會(huì)泛黃變暗.
  用甘油膠包埋的一個(gè)主要問(wèn)題是產(chǎn)生氣泡。市場(chǎng)上出售的新鮮的甘油
膠常含有大量的水分和空氣。為排除其中的空氣，并去掉多余的水分，可
將甘油膠置于燒杯中，燒杯放到水浴鍋中，加熱幾天，直到它的顏色變成
深黃色。在用甘油膠包埋以前，角質(zhì)層本身應(yīng)在純甘油中脫水至少1天。在
實(shí)際包埋時(shí)，顯微鏡玻片可放到一個(gè)具精確溫控的加熱盤(pán)中，沮度控制在6
5℃-73℃，用玻瑞棒將加熱的甘油膠移到玻片上。角質(zhì)層皿于甘油膠中，
并用一大小適中的蓋玻片蓋上。較大的角質(zhì)層可能會(huì)有些問(wèn)題，因?yàn)樗鼈?br>不能完全放平，因此需要用蓋玻片支持。為此目的，一個(gè)碎的蓋玻片都比
橡皮泥要好，因?yàn)榍罢咴谡掌胁粫?huì)明顯地顯示出來(lái)。為了防止隨后的干
燥，在甘油膠變硬之后，蓋玻片可用無(wú)色的指甲油來(lái)封存。不過(guò)，對(duì)一些
較大的或較厚的玻片，需要長(zhǎng)達(dá)數(shù)月甘油膠才會(huì)變硬。
  如上所述，甘油膠的優(yōu)點(diǎn)之一是在包埋時(shí)角質(zhì)層還可以處理。當(dāng)玻片
置于加熱盤(pán)時(shí)，可將角質(zhì)層在玻片上攤開(kāi)。而且，葉的下角質(zhì)層通常還較
牢固地粘在一起.需要機(jī)械分離.當(dāng)把它們移到玻片上加熱的甘油膠中時(shí)，
最好用細(xì)針將其分開(kāi)。
  角質(zhì)層在固定前還可以染色.但在染色時(shí)，由于角質(zhì)層非常容易碎，所
以很容易受到破壞。4種染色劑都有明顯不同的特征。最常用染色劑有:傅
斯麥棕、甲基綠、亞甲藍(lán)和番紅T，其中稗斯麥棕能產(chǎn)生最自然的色彩。所
有這些染色劑都要在1%的水溶液中使用，并需要染幾分鐘。如果有必要，
還要放在40℃條件下。染色以后.角質(zhì)層要用水和熱的甘油沖洗。不同的種
類(lèi)，即使采自同一采集地點(diǎn)，染色效果也會(huì)不同。

(本文由上海光學(xué)儀器廠編輯整理提供, 未經(jīng)允許禁止復(fù)制http://www.sgaaa.com)