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無菌操作實(shí)驗(yàn)稀釋及滴定計(jì)數(shù)-細(xì)胞研究顯微鏡

無菌操作連續(xù)稀釋及滴定計(jì)數(shù)
一、目的：利用稀釋后的菌液滴定至培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，之后計(jì)數(shù)其生菌數(shù)。
 三、原理：從高濃度稀釋至低濃度，可藉由滴定后的菌落數(shù)，計(jì)算出菌的濃度及數(shù)量。
 四、材料： 
1.無菌培養(yǎng)皿  2.稀釋液 3.振蕩器  4.無菌操作臺(tái) 5.NA agaer  6. 恒溫培養(yǎng)箱
 7.E.coli 菌液  8.安全吸球 9.移液管  10.酒精燈 11.95%酒精  12.打火機(jī)  13.簽字筆 
 14.試管 四、方法： 1. 10 倍連續(xù)稀釋：
取0.5ml 樣品+4.5ml 稀釋液(0.85%NaCl+0.1%agar)→混合均勻(振蕩)→共6管
2.滴定計(jì)數(shù)法(Drop method)：取50μl 適當(dāng)稀釋倍數(shù)之稀釋液→滴入四區(qū)域之a(chǎn)gar plate→
滴干后37℃培養(yǎng)→計(jì)數(shù)(隔天中午前觀察) 3. 樣品原液：E.coli，求得菌濃度