植物細胞樣品-觀察的多種方法的光學顯微鏡

  早期使用顯微鏡觀察的樣品通常是活的，或者說至少短時間是活的。
固定和染色技術隨著顯微鏡的進步而發(fā)展。

  由于顯微鏡光學的改進，光學系統(tǒng)的局限性確定了樣品制備的必要
性。顯微鏡研究者根據光學的局限性作出了適當的讓步。放大、數值孔
徑值、分變率限度、工作距離和色彩偏差糾正被認作為相關因素。

  另外，各種照明方法包括亮視野、暗視野、相差和熒光相繼被引人
主流顯微鏡。隨著這些類型顯微鏡的利用，人們接受了這樣一個事實：
即樣品需要制備成能滿足顯微鏡光學局限的要求。通常大多數這些的制
備需要固定樣品。

  現(xiàn)在已經能通過各種分子的、生化的、免疫學和顯像技術直接觀察
活體的已知類型分子的動力學特性。例如，廣泛使用的綠色熒光蛋白
（green fluorescent protein ， GFP）標記方法就能直接觀察活體細
胞的特殊結構成分。不過，為了在顯微鏡視野下觀察活的和健康的哺乳
動物細胞，還存在一些與培養(yǎng)基的溫度和pH等相關的技術問題。當觀察
非哺乳動物細胞或植物細胞時，這不是一個重要問題。

  按經典分類，活細胞實驗能分成兩類：確定自然行為的發(fā)育學研究
和研究調控因子效應的誘導性改變。體內體外現(xiàn)象之間的關系對于哺乳
動物活細胞研究極為重要。在活細胞顯微鏡觀察期間精確地模擬分離樣
品的宿主條件十分重要。

活細胞顯微鏡觀察的多種方法。

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