近年來,檢驗(yàn)部門對(duì)跳值問題反饋較多,如HBsAg,Anti-HBcll,比如傳染病項(xiàng)目,比如一些高靈敏度的項(xiàng)目,比如TnI,TSH,HIV等項(xiàng)目。
定義價(jià)值的定義和表現(xiàn)
跳轉(zhuǎn)值被定義為由樣本和檢測系統(tǒng)引起的非再現(xiàn)假陽或初始假陽性。試驗(yàn)結(jié)果表現(xiàn)為RLU偏高,經(jīng)過反復(fù)測試,結(jié)果趨于正常;而且這種現(xiàn)象的再現(xiàn)性較低,與系統(tǒng)的精度無關(guān)。
樣本管首次測量跳值的表現(xiàn)形式,RLU值偏高。
跳值現(xiàn)象同時(shí)發(fā)生在各種使用不同方法的儀器上,例如ELISA,放射免疫檢測,化學(xué)發(fā)光,電化學(xué)發(fā)光。
肌鈣跳值概率國際制造商:
廠家&試劑跳躍概率(95%置信區(qū)間)跳躍概率(95%置信區(qū)間)
A0.10%(0.01%–0.19%)0.48–1.95%②
B0.44%(0.25%–0.63%)1.40%③
R0.06%(0.00%–0.13%)/
S0.10%(0.01%–0.19%)/
跳值原因
目前,跳轉(zhuǎn)值的原因尚不十分清楚。各廠家和相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道的解釋主要集中在分析樣本凝血時(shí)間、凝血溫度、離心條件、樣本采集管等前因素。
1.病人本身(潛在干擾物質(zhì))。
2.采血管材料,添加劑(不同廠家采血管質(zhì)量不同,對(duì)免疫項(xiàng)目影響不同)。
3.樣本體積(樣本體積過小可能導(dǎo)致樣本針吸入凝膠血細(xì)胞等)。
4.采血后是否按說明書要求顛倒混合。
5.樣品的運(yùn)輸方式(樣品運(yùn)輸時(shí),必須按照相應(yīng)的州、聯(lián)邦和國際關(guān)于樣品和感染物的運(yùn)輸規(guī)定進(jìn)行包裝和標(biāo)簽。樣品可以在環(huán)境溫度下,2-8℃(冰袋)或-20℃或者在較低的溫度(干冰)中運(yùn)輸。不要超過上面列出的存儲(chǔ)時(shí)間限制。建議在運(yùn)輸前從凝塊、血清分離膠或紅細(xì)胞中分離樣本)。
6.儀器運(yùn)行過程中的電信號(hào)干擾。
7.樣本凝血的時(shí)間★
評(píng)估項(xiàng)目:HIV
凝血時(shí)間凝血小于5min凝血20~30min凝血1h以上
初測陽性數(shù)2020
復(fù)測陽性數(shù)000
初測陽性率50%5%0%
總樣本數(shù)404080
凝血效果是否對(duì)跳躍值有明顯的影響。如果實(shí)驗(yàn)中使用的普通真空管不含添加劑,則一般制造商手冊(cè)中要求的凝血時(shí)間為1h或90min以上;如果使用含有促凝劑的血清管,需要按照說明書要求凝血20~30min。
8.樣品的離心和轉(zhuǎn)速★
評(píng)估項(xiàng)目:HIV
離心條件3500rpm離心5min3500rpm離心15min
初測陽性數(shù)41
復(fù)測陽性數(shù)0
異常值概率0.72%0.28%
總樣本數(shù)558357
增加離心時(shí)間可以大大降低異常值的概率。
嚴(yán)格按照制造商的說明書推薦離心時(shí)間和離心速度。
此外,其他注意事項(xiàng):采血體積達(dá)標(biāo),添加劑管抽血后及時(shí)混合均勻是影響樣本凝血質(zhì)量的因素。
改善措施
1.控制采血樣本的質(zhì)量
①確保真空采血管的質(zhì)量
?、诓裳?~10次的溫和混合可以促進(jìn)血塊的快速完全凝結(jié)
?、劢ㄗh在離心前保持垂直,減少血管標(biāo)本的攪拌,減少溶血的可能性,防止凝血過程中產(chǎn)生的纖維蛋白附著在離心管蓋上,離心后推到凝膠上方污染血清.
2.將樣本轉(zhuǎn)移到微量杯中進(jìn)行檢測
對(duì)于樣本量較少的標(biāo)本,需要轉(zhuǎn)移到微量杯進(jìn)行測試。樣品轉(zhuǎn)移時(shí),應(yīng)使用移液器避免傾倒,避免吸收血小板和血細(xì)胞
3.離心時(shí)間和速度
離心時(shí)間和速度應(yīng)嚴(yán)格按照制造商的說明設(shè)置
4.復(fù)測所有陽性樣本樣本
5.加強(qiáng)儀器維護(hù)
總結(jié)
任何測試平臺(tái)的跳轉(zhuǎn)值問題都是不可避免的,即使所有的試劑耗材都是原裝的和預(yù)處理操作規(guī)范。這個(gè)問題也不能完全解決。為了確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,建議重新測試所有陽性樣品,可以大大降低跳躍的可能性,有效控制實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量,避免醫(yī)院與患者之間不必要的醫(yī)療糾紛。