FAIMS Pro

相信很多老師對于賽默飛的FAIMS Pro(High-field asymmetric waveform ion mobility spectrometry，高場非對稱波形離子遷移譜)接口已經(jīng)非常熟悉和了解了。FAIMS Pro（圖一）是一種在大氣壓條件下分離離子的技術(shù)，安裝在大氣壓離子源與MS真空腔的入口之間，通過電極上的補償電壓除去蛋白質(zhì)組學樣品中一價離子對檢測帶來的干擾，降低背景噪音，從而擴大蛋白鑒定的深度。

圖1 Exploris 480 質(zhì)譜儀 配置FAIMS Pro 和Easy nLC 1200（點擊查看大圖）

FAIMS Pro接口一經(jīng)推出，就收到了廣泛好評。從 2018 年下半年發(fā)布以來，已發(fā)表了?47?篇同行評議的文章，覆蓋?19?個不同的研究應(yīng)用領(lǐng)域，包括肽段、蛋白和蛋白復合物分析，集中在發(fā)現(xiàn)/表征和非標定量（LFQ）及標記定量（TMT）等相關(guān)的應(yīng)用（圖二）。

圖2 FAIMS Pro 發(fā)表文章匯總

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今天我們要隆重介紹的是全新一代的FAIMS接口，F(xiàn)AIMS Pro Duo。那么接下來讓我們看看FAIMS Pro Duo都有哪些新表現(xiàn)。

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增強選擇性，超高靈活性

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為了滿足分析各個實驗室與日俱增的對復雜樣品，不同種類化合物的定性和定量需求，F(xiàn)AIMS Pro Duo在保留前一代對多肽蛋白類化合物分析性能的基礎(chǔ)上增加了對于小分子化合物的分析定量能力，使FAIMS Pro Duo的應(yīng)用場景不單局限于蛋白質(zhì)組學樣品分析，更可以應(yīng)用到常規(guī)定量分析。

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FAIMS Pro Duo相比較于前一代FAIMS Pro 保留了之前所有的低流速性能，并擴展支持高流速應(yīng)用，Z ui大適用流速達到了1mL/min。其采用優(yōu)化的的圓柱形幾何形狀，大大增加了離子傳輸?shù)劫|(zhì)譜儀的概率，縮短了停留時間，同時允許每個數(shù)據(jù)采集方法進行多個?CV 設(shè)置。拆裝速度快，不需要破壞真空，組裝僅需兩分鐘，單向wan美對齊，無需微調(diào)，不需要使用標準品進行校正（圖三）。

圖3 FAIMS Pro Duo 內(nèi)部結(jié)構(gòu)

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升級之后的FAIMS Pro Duo不僅可以搭載在蛋白質(zhì)組學常用的質(zhì)譜平臺Exploris240，480，三合一質(zhì)譜Eclipse以及Fusion Lumos上。FAIMS Pro Duo也可以搭載到Exploris 120，以及三重四極桿平臺TSQ Altis和Quantis上，更方便于常規(guī)流速下的定量分析（圖四）。

圖4 FAIMS Pro Duo 可適用的應(yīng)用及LC-MS系統(tǒng)

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CV優(yōu)化，降低噪音，助力靶向定量

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由于不同的價態(tài)或者分子量的化合物其Z ui優(yōu)條件下的CV都各有差異。所以針對于定量實驗，F(xiàn)AIMS Pro Duo 增加了CV優(yōu)化的功能。不管是使用直接進樣或者是在線的色譜分離方法都可以直接對一種或者多種化合物進行調(diào)諧和CV優(yōu)化（圖五），大大簡化了FAIMS Pro Duo接口與 Thermo Scientific質(zhì)譜儀的設(shè)置和使用，縮短方法開發(fā)的時間。

圖5 色譜分離的方法優(yōu)化CV值

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FAIMS Pro Duo去除基質(zhì)干擾的能力在化合物定量下限濃度附近表現(xiàn)更為明顯（圖六）。當化合物濃度接近定量限時，如果目標化合物出峰附近有基質(zhì)干擾峰，這時基質(zhì)干擾峰會影響目標化合物的檢測，出現(xiàn)色譜峰信噪比低，積峰困難等情況。我們可以通過使用FAIMS Pro Duo的自動CV優(yōu)化功能，對目標化合物的CV電壓進行優(yōu)化，用FAIMS Pro Duo去除掉部分的雜質(zhì)離子，從而提升目標化合物的信噪比，進一步降低定量LOQ。

圖6 FAIMS Pro Duo可以增加LOQ的信噪比，降低定量下限（點擊查看大圖）

以上就是FAIMS Pro Duo的新特性，它在保留了前一代FAIMS Pro在蛋白質(zhì)組學里去除雜質(zhì)干擾，擴大蛋白鑒定深度上的良好表現(xiàn)，進一步增加了它在定量分析上的適用性。最重要的是它還支持從FAIMS Pro的現(xiàn)場升級，感興趣的老師快來聯(lián)系我們吧！

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