由日本宮崎大學(xué)醫(yī)學(xué)部的澤口朗教授率領(lǐng)的研究團(tuán)隊,充分發(fā)揮低真空電子顯微鏡對于光學(xué)顯微鏡用的切片在不做任何減輕荷電處理下就能進(jìn)行觀察的特點(diǎn),開發(fā)了在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)研究領(lǐng)域有重大意義的蛋白酶和基因的定位標(biāo)記新方法。關(guān)于闡述該方法的論文被刊載在了Nature旗下的一本開放獲取期刊「Communications Biology」上面。
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之前被大家熟知的包埋后標(biāo)記法是要首先結(jié)合金納米顆粒進(jìn)行抗體的調(diào)制,然后將包埋在樹脂里面的觀察對象作成超薄的切片然后進(jìn)行抗體的標(biāo)記。這一過程需要很長的時間和熟練的技巧。本次新開發(fā)出來的研究方法是要將光學(xué)顯微鏡中被廣泛使用的石蠟切片或者凍結(jié)切片,通過酵素抗體法標(biāo)識二氨基聯(lián)苯胺(DAB)后,通過0.01%氯金酸溶液處理后在DAB標(biāo)識部分形成金納米顆粒(平均粒子徑=6 nm),然后再37℃下將其保存12小時,通過維持高濕度的環(huán)境下培育金納米顆粒(平均粒子徑=47 nm)實(shí)現(xiàn)可視化的具有劃時代意義的新方法,因此備受關(guān)注。
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論文中證明了15年前被標(biāo)記DAB的切片上有進(jìn)行過金納米顆粒的形成以及培養(yǎng),使用電子顯微鏡對在庫房保存的光學(xué)電子顯微鏡標(biāo)本進(jìn)行了再論證,還記載了CLEM(Correlative Light and Electron Microscopy)免疫電子顯微鏡標(biāo)記和in-situ hybridization電子顯微鏡標(biāo)記的實(shí)際案例。低真空掃描電子顯微可以說填補(bǔ)了光學(xué)顯微鏡與電子顯微鏡之間的空白,新的方法利用了這個特性,今后會在醫(yī)學(xué)?生物學(xué)研究方面廣泛的應(yīng)用,對于加速及促進(jìn)生物組織、構(gòu)成細(xì)胞的組織及機(jī)能等的研究將會發(fā)揮巨大作用。
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一直以來有使用蛋白質(zhì)的抗體以及標(biāo)識RNA的In Situ Hybridization法等多種手法,本次發(fā)表的內(nèi)容是通過培養(yǎng)Nanogold顆粒然后使用電子顯微鏡來進(jìn)行可視化定位的新方法。本次論文發(fā)表的研究過程中,日立的透射電子顯微鏡和臺式電子顯微鏡發(fā)揮了重大作用。
日立透射電子顯微鏡HT7800? ? ? ? ? ? ? ?日立臺式掃描電子顯微鏡TM4000 II
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Communications Biology?volume?4, Article?number:?710?(2021)
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日立科學(xué)儀器(北京)有限公司是世界500強(qiáng)日立集團(tuán)旗下日立高新技術(shù)有限公司在北京設(shè)立的全資子公司。本公司秉承日立集團(tuán)的使命、價值觀和愿景,始終追尋“簡化客戶的高科技工藝”的企業(yè)理念,通過與客戶的協(xié)同創(chuàng)新,積極為教育、科研、工業(yè)等領(lǐng)域的客戶需求提供專業(yè)和優(yōu)質(zhì)的解決方案。
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我們的主要產(chǎn)品包括:各類電子顯微鏡、原子力顯微鏡等表面科學(xué)儀器和前處理設(shè)備,以及各類色譜、光譜、電化學(xué)等分析儀器。為了更好地服務(wù)于中國廣大的日立客戶,公司目前在北京、上海、廣州、西安、成都、武漢、沈陽等十幾個主要城市設(shè)立有分公司、辦事處或聯(lián)絡(luò)處等分支機(jī)構(gòu),直接為客戶提供快速便捷的、專業(yè)優(yōu)質(zhì)的各類相關(guān)技術(shù)咨詢、應(yīng)用支持和售后技術(shù)服務(wù),從而協(xié)助我們的客戶實(shí)現(xiàn)其目標(biāo),共創(chuàng)美好未來。