相差光學(xué)顯微鏡用于觀察細(xì)胞不同結(jié)構(gòu)之間細(xì)微差別

使用明視野顯微鏡并不能夠清楚觀察未染色的活細(xì)胞及其內(nèi)部結(jié)構(gòu)
，這是因為細(xì)胞與水環(huán)境或細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)之間的對比度太小。不過
細(xì)胞的不同結(jié)構(gòu)之間確實存在密度上的細(xì)微差別，從而能夠?qū)⑼ㄟ^
其中的光線有所改變。相差光學(xué)顯微鏡(以下簡稱“相差顯微鏡”)
可以很容易的將這種細(xì)微的改變轉(zhuǎn)化成為可檢測出的光強(qiáng)變化。因
此這種顯微鏡非常適用于觀察活細(xì)胞。

  與普通光學(xué)顯微鏡相比，相差顯微鏡有另外兩個部件：一個是
位于物鏡后聚焦面的相板；另外一個是與相板相匹配的位于聚光器
上的環(huán)形光闌，它是一個黑色圓盤，上面帶有一個透明圈。相板上
有一環(huán)狀區(qū)域，經(jīng)過其中的光線不會發(fā)生改變，而經(jīng)過環(huán)狀區(qū)域以
外的其他區(qū)域的光線則會被延遲1“波長(入)。

實驗方法

  1．制備枯草芽孢桿菌水浸片。
  2．將標(biāo)本置于載物臺上。
  3．先轉(zhuǎn)至10倍物鏡，同時將環(huán)形光闌也調(diào)至10倍位置，用粗調(diào)
節(jié)旋鈕和細(xì)調(diào)節(jié)旋鈕將物像調(diào)至清晰。
  4．將目鏡取下，換上合軸調(diào)整望遠(yuǎn)鏡，調(diào)整至亮環(huán)與暗環(huán)都
清晰，固定合軸調(diào)整望遠(yuǎn)鏡。
  5．調(diào)節(jié)聚光器至兩環(huán)相互重疊。
  6．將目鏡重新安上，用細(xì)調(diào)節(jié)旋鈕將圖像調(diào)節(jié)清晰并觀察。
  7．按同樣的方法分別用40倍物鏡和油鏡觀察，同時要將環(huán)形光
闌也調(diào)至相應(yīng)位置。記錄觀察結(jié)果。
  8．按照相同的步驟在40倍物鏡下觀察釀酒酵母。

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