細(xì)胞生長曲線測定，這些問題你遇到過么？

下圖是一個典型的細(xì)胞生長曲線圖

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細(xì)胞增殖的研究方法有很多，主要包括：BrdU，EdU，CCK8，MTT等方法。其中測定細(xì)胞生長曲線是檢測細(xì)胞絕對生長數(shù)的常用方法，也是判定細(xì)胞活力的重要指標(biāo)，是細(xì)胞生物學(xué)特性的基本參數(shù)之一。因為細(xì)胞太小，無法測單個細(xì)胞的生長狀態(tài)，所以測細(xì)胞群體的生長曲線。

在做細(xì)胞生長曲線測定過程中，我們經(jīng)常遇到以下幾個問題：

1、如何選擇細(xì)胞接種數(shù)？

答：可根據(jù)細(xì)胞傳代培養(yǎng)過程中接種數(shù)及細(xì)胞生長周期進(jìn)行計算，細(xì)胞接種數(shù)因細(xì)胞的不同而不同。

2、細(xì)胞生長曲線測定時為什么要做重復(fù)孔？

答：測定細(xì)胞生長曲線細(xì)胞計數(shù)時選擇 3 個復(fù)孔，每孔分別計三次，取其平均值，目的是減小操作誤差。

3、細(xì)胞生長曲線測定周期是幾天？

答：一般是一個星期。

4、為什么繪制的細(xì)胞生長曲線沒有達(dá)到平臺期？

答：可能有以下原因：一是細(xì)胞接種密度過低；二是細(xì)胞培養(yǎng)時間過短；三是細(xì)胞生長狀態(tài)不好，使其不能正常增殖。

5、為什么細(xì)胞計數(shù)第一天，細(xì)胞數(shù)沒有增加反而減少？

答：一般細(xì)胞傳代后，會有一個生長緩慢的潛伏期，細(xì)胞不增殖，而細(xì)胞會有正常的死亡，故細(xì)胞數(shù)不增加反而減少。

6、細(xì)胞生長曲線還有其他方法繪制嗎？

答：當(dāng)然有。我們提到最多的是直接計數(shù)的方法，除此以外還有相對計數(shù)的方法，該類方法首先要繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)定細(xì)胞數(shù)和某個變量的函數(shù)關(guān)系，然后我們只需要測定每天這個變量的值便可以計算出細(xì)胞數(shù)。常用的是 MTT、CCK8 等比色的方法

實驗室細(xì)胞培養(yǎng)

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WIGGENS全尺寸CO2培養(yǎng)箱。培養(yǎng)箱內(nèi)設(shè)置多層活動托板，可用于T瓶，培養(yǎng)皿，微孔板等靜態(tài)培養(yǎng)；培養(yǎng)箱內(nèi)有電源插口，可以放置搖床，磁力攪拌器等用于細(xì)胞的動態(tài)培養(yǎng)。底部有專用的滾瓶機(jī)滾輪槽，方便使用滾瓶機(jī)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

WIGGENS 的下列產(chǎn)品，可以放在CO2培養(yǎng)箱中使用，拓展CO2培養(yǎng)箱功能和提高利用效率：

1、 WIGGENS二氧化碳培養(yǎng)箱專用振蕩器，解決了二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)的振蕩問題。獨創(chuàng)的防腐蝕，分體式設(shè)計等，滿足二氧化碳培養(yǎng)箱動態(tài)培養(yǎng)解決方案。

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振蕩器在培養(yǎng)箱中的擺放位置

2、CELLine微型細(xì)胞工廠專用于連續(xù)，超高密度培養(yǎng)。既可以用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)或貼壁細(xì)胞培養(yǎng)。

CELLine二室技術(shù)示意圖

3、滾瓶機(jī)用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)

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4、飛旋瓶用于懸浮細(xì)胞和貼壁微載體細(xì)胞培養(yǎng)，專用磁力攪拌器提供飛旋瓶攪拌動力。