??????建立生理相關的體外模型對于進一步了解神經(jīng)疾病的機制以及靶向藥物開發(fā)至關重要。iPSC衍生的神經(jīng)元顯示出對化合物篩選和疾病建模的巨大希望，然而目前已經(jīng)開發(fā)出使用三維（3D）培養(yǎng)物作為對神經(jīng)元細胞的測定開發(fā)的有效方法。3D細胞培養(yǎng)被認為是更接近人類組織的重演方式，包括結(jié)構(gòu)、細胞組織、細胞- 細胞和細胞- 基質(zhì)相互作用等領域。

???????3D 細胞培養(yǎng)模式較傳統(tǒng)的單層細胞培養(yǎng)模式能夠更加真實地反應出細胞相互作用和化合物篩選過程中其生理變化的過程。采用手動操作進行相應檢測分析會復雜而繁瑣，而且隨著樣品量增加變得越來越困難。自動化系統(tǒng)能夠以更加精準、更高通量的方式進行3D 細胞成像分析，ImageXpress?Micro Confocal共聚焦高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)將會成為您的得力研究助手。

???????目前，比較常見的的兩種3D細胞球培養(yǎng)模式包括3DProSeedTM水凝膠和微流控OrganoPlate?平臺培養(yǎng)系統(tǒng)。水凝膠通過摻入MMP切割位點來幫助細胞遷移，并包含RGD細胞粘連基序以支撐細胞的粘附作用。這種水凝膠預制板使用方法簡便，同時能很好地兼容自動化設備（圖1）。OrganoPlate?是一個高通量平臺，結(jié)合了最新的3D細胞培養(yǎng)技術、Phaseguides?和微流體技術，它包含96個適合長期培養(yǎng)活細胞的組織芯片，適用于篩選目的，并且與標準實驗室設備或自動化系統(tǒng)兼容，如ImageXpress?Micro Confocal共聚焦高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)（圖2）。

圖1：圖解3DProSeedTMsurface工作原理以及在模具中培養(yǎng)神經(jīng)元細胞的過程

圖2：OrganoPlate中培養(yǎng)的神經(jīng)元細胞。在充滿基質(zhì)膠的OrganoPlate培養(yǎng)槽內(nèi)對接種的iCell神經(jīng)元細胞進行透射光成像。細胞以每芯片30,000個細胞的密度培養(yǎng)72h，然后用20X平場熒光物鏡進行透射光成像。

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