利用計(jì)數(shù)板和電子計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)細(xì)胞-微生物計(jì)量圖像顯微鏡

  利用計(jì)數(shù)板和電子計(jì)數(shù)器進(jìn)行直接計(jì)數(shù)不能區(qū)分死活細(xì)胞，根
據(jù)活細(xì)胞能進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖這一特點(diǎn)，人們?cè)O(shè)計(jì)了許多活菌計(jì)數(shù)方法
。一般是將適當(dāng)稀釋的樣品涂布在瓊脂培養(yǎng)基表面，培養(yǎng)后活細(xì)胞
能形成清晰的菌落，通過(guò)計(jì)算菌落數(shù)就可知道樣品中的活菌數(shù)。若
使用專(zhuān)門(mén)的菌落計(jì)數(shù)器，計(jì)數(shù)結(jié)果會(huì)更精確。平板涂布和傾倒平板
均可用于活菌計(jì)數(shù)。
  平板計(jì)數(shù)簡(jiǎn)單、靈敏，廣泛應(yīng)用于食品、水體及土壤樣品中活
的細(xì)菌和其他微生物的計(jì)數(shù)，但計(jì)數(shù)結(jié)果也受一些因素的影響。若
樣品中細(xì)胞聚集成團(tuán)，沒(méi)有有效地分散，就會(huì)導(dǎo)致計(jì)數(shù)結(jié)果偏低，
由于不可能絕對(duì)保證每個(gè)菌落來(lái)源于一個(gè)細(xì)胞，平板計(jì)數(shù)法得到的
結(jié)果稱(chēng)為菌落形成單位，CFU并不完全等同于樣品中的活菌數(shù)。在
平板計(jì)數(shù)過(guò)程中，樣品的稀釋度控制在使每個(gè)平板上菌落數(shù)在30-3
00個(gè)范圍內(nèi)時(shí)，能得到最好的結(jié)果。當(dāng)然，若使用的培養(yǎng)基不能滿(mǎn)
足樣品中所有微生物各自的營(yíng)養(yǎng)需求，計(jì)數(shù)結(jié)果也會(huì)偏低。在使用
傾倒平板技術(shù)進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)時(shí)，若溶化的瓊脂培養(yǎng)基溫度過(guò)高，會(huì)
殺死或損傷一些對(duì)溫度較為敏感的細(xì)胞，因此乎板涂布技術(shù)所得的
計(jì)數(shù)結(jié)果有時(shí)會(huì)高于由傾倒平板法獲得的結(jié)果。涂布平板和傾倒平
板技術(shù)
  微生物數(shù)量還可由濾膜培養(yǎng)法獲得，首先使樣品濾過(guò)一種特制
的，孔徑小于細(xì)菌個(gè)體的濾膜(membranefilter)，然后將濾膜置于
培養(yǎng)基上或浸潤(rùn)有液體培養(yǎng)基的墊狀物上培養(yǎng)，通過(guò)計(jì)算在濾膜上
形成的菌落數(shù)就可知樣品中的活菌數(shù)

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