加州大學(xué)舊金山分校的科學(xué)家們利用CRISPR-Cas9基因編輯系統(tǒng)創(chuàng)造了第一個(gè)對(duì)免疫系統(tǒng)功能性“隱身”的多能干細(xì)胞，這是生物工程的一項(xiàng)壯舉，有助于幫助實(shí)驗(yàn)室研究防止干細(xì)胞移植排斥的出現(xiàn)。這些“通用”干細(xì)胞比為每位患者量身定制的干細(xì)胞更有效地完成個(gè)性化醫(yī)療，實(shí)現(xiàn)再生醫(yī)學(xué)。

這一研究成果公布在2月18日的Nature Biotechnology雜志上，由加州大學(xué)舊金山分校心臟外科主任Julien I.E. Hoffman博士等人領(lǐng)導(dǎo)完成， Hoffman博士說(shuō)，“科學(xué)家經(jīng)常吹噓多能干細(xì)胞的治療潛力，比如說(shuō)它可以形成任何成體組織，但是免疫系統(tǒng)不這么認(rèn)為，它一直都是安全有效進(jìn)行干細(xì)胞治療的主要障礙之一?！?p>免疫系統(tǒng)一方面能保護(hù)我們免受外來(lái)入侵物的傷害，如果沒(méi)有它，我們?nèi)梭w無(wú)法正常運(yùn)行；但另外一方面，這也意味著移植的器官，組織或細(xì)胞會(huì)被認(rèn)作是具有潛在危險(xiǎn)的外來(lái)物，因此會(huì)引發(fā)強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)，導(dǎo)致移植排斥，這也就是臨床上所說(shuō)的“組織相容性不匹配（histocompatibility mismatched）”。

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為此我們只能服用抑制免疫活性并減少排斥反應(yīng)的藥物。但不幸的是，這些免疫抑制劑使患者更容易感染和患上癌癥。

干細(xì)胞移植領(lǐng)域科學(xué)家曾經(jīng)認(rèn)為排斥問(wèn)題可以通過(guò)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSCs）解決，這種干細(xì)胞是由完全成熟的細(xì)胞（如皮膚或脂肪細(xì)胞）重新編程得來(lái)的，可以發(fā)育成任何構(gòu)成身體組織和器官的細(xì)胞。如果將來(lái)自iPSCs的細(xì)胞移植到捐獻(xiàn)原始細(xì)胞的同一患者體內(nèi)，那么人們會(huì)認(rèn)為移植的細(xì)胞是“自我”，不會(huì)發(fā)生免疫攻擊。

但實(shí)際上，iPSC的臨床應(yīng)用已證明這很困難。由于尚未了解的原因，許多患者的細(xì)胞被證明無(wú)法進(jìn)行重編程，而且為每位進(jìn)行干細(xì)胞治療的患者生產(chǎn)iPSC既昂貴又耗時(shí)。

“iPSC技術(shù)存在許多問(wèn)題，但最大的障礙是質(zhì)量控制和可重復(fù)性。我們不知道是什么讓一些細(xì)胞能夠重新編程，但大多數(shù)科學(xué)家認(rèn)為這還是不太可靠。因此，大多數(shù)個(gè)體化iPSC治療方法已被放棄?！?p>為此，研究人員嘗試通過(guò)創(chuàng)建“通用”iPSC來(lái)回避這些問(wèn)題，在最新研究中，他們發(fā)現(xiàn)在僅僅三個(gè)基因的活性被改變后，將iPSC移植到具有完全免疫系統(tǒng)功能組織相容性不匹配的受體后能夠避免排斥。

“這是第一次有人設(shè)計(jì)出可以普遍移植，在免疫功能正常的受體中存活而不會(huì)引起免疫反應(yīng)的細(xì)胞，”作者表示。

具體來(lái)說(shuō)，研究人員首先利用CRISPR刪除兩個(gè)基因，這兩個(gè)基因?qū)τ谥饕M織相容性復(fù)合體（MHC）I類和II類蛋白質(zhì)家族的正常功能至關(guān)重要。MHC蛋白質(zhì)位于幾乎所有細(xì)胞的表面，攜帶幫助免疫系統(tǒng)區(qū)分入侵者與本體的分子信號(hào)。缺少M(fèi)HC基因的細(xì)胞不會(huì)出現(xiàn)這些信號(hào)，因此它們不會(huì)標(biāo)記外來(lái)者。然而，缺失MHC蛋白的細(xì)胞會(huì)成為自然殺傷（NK）細(xì)胞這種免疫細(xì)胞的靶標(biāo)。

加州大學(xué)舊金山分校的Lewis Lanier教授是一位信號(hào)學(xué)專家，其研究組曾發(fā)現(xiàn)CD47（一種細(xì)胞表面蛋白）能作為針對(duì)巨噬細(xì)胞的“別吃我”信號(hào)，對(duì)NK細(xì)胞也有很強(qiáng)的抑制作用。

研究人員認(rèn)為CD47可能是完全關(guān)閉排斥反應(yīng)的關(guān)鍵，因此他們將CD47基因加載到一種病毒中，傳遞給MHC蛋白缺失的小鼠和人體干細(xì)胞。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)了他們的假設(shè)，CD47確實(shí)是這個(gè)難題的缺失部分。當(dāng)研究人員將三重修飾過(guò)的小鼠干細(xì)胞移植到具有正常免疫系統(tǒng)的錯(cuò)配小鼠時(shí)，結(jié)果沒(méi)有觀察到排斥反應(yīng)。然后，他們又將類似調(diào)整過(guò)的人類干細(xì)胞移植到所謂的人源化小鼠體內(nèi)，這些小鼠的免疫系統(tǒng)已經(jīng)被人體免疫系統(tǒng)的成分所取代，也沒(méi)有排斥反應(yīng)。

此外，研究人員利用這些干細(xì)胞中分化出各種類型的人類心臟細(xì)胞，并將它們?cè)俅我浦驳饺嗽椿∈篌w內(nèi)。干細(xì)胞分化的心肌細(xì)胞能夠?qū)崿F(xiàn)長(zhǎng)期存活，甚至開(kāi)始形成基本的血管和心肌，這為修復(fù)衰竭心臟帶來(lái)了希望。

“我們的技術(shù)解決了干細(xì)胞和干細(xì)胞衍生組織的排斥問(wèn)題，這是干細(xì)胞治療領(lǐng)域的一大進(jìn)步，”Deuse說(shuō)。 “我們的技術(shù)可以使更多的患者受益，其生產(chǎn)成本遠(yuǎn)低于其它任何個(gè)性化方法。我們只需要制造我們的細(xì)胞一次，得到的產(chǎn)品可以廣泛應(yīng)用。