培養(yǎng)液pH值變化太快 

可能原因

建議解決方法

1.CO2張力不對

按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度，2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞對應(yīng)CO2濃度為5%到10%。

2.培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊

松開瓶蓋1/4圈。

3.NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖力不足

改用不依賴CO2培養(yǎng)液。加HEPES緩沖液至10到25mM終濃。

4.培養(yǎng)液中鹽濃度不正確

在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle′s鹽配制的培養(yǎng)液，在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks鹽配制的培養(yǎng)液。

5.細(xì)菌、酵母或真菌污染

丟棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌。

 培養(yǎng)細(xì)胞死亡 

可能原因

建議解決方法

1. 培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2

檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2

2. 培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大

檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度

3. 細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷

取新人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞的保存細(xì)胞種

4. 培養(yǎng)液滲透壓不正確

檢測培養(yǎng)液滲透壓。注意：大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞能耐受滲透壓為260– 350   mOsm/kg。加入額外試劑如HEPES或藥物都有可能影響培養(yǎng)液滲透壓。

5. 培養(yǎng)液種有毒代謝產(chǎn)物堆積

換入新鮮培養(yǎng)液

細(xì)胞影響因素

1.細(xì)胞的表面積與體積之比以及細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)體積之間的平衡：細(xì)胞通過它的表面不斷地與周圍環(huán)境或鄰近細(xì)胞進(jìn)行物質(zhì)交換，這么它就必須有足夠的表面積，否則它的代謝作用就很難進(jìn)行。但細(xì)胞的體積由于生長而逐漸增大時(shí)，表面積與體積的比例就會變得越來越小，物質(zhì)交換適應(yīng)不了細(xì)胞的需要，這可以引起細(xì)胞的分裂，以恢復(fù)適宜的比例。同樣的，細(xì)胞核中的遺傳信息指引和控制范圍有限，細(xì)胞核對太大范圍的細(xì)胞質(zhì)的調(diào)控作用就會相對減少。

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