細(xì)胞簡(jiǎn)介:
臍帶血是胎兒娩出、臍帶結(jié)扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液,通常是廢棄不用的。臍帶血中含有非常豐富的造血干細(xì)胞,可以重建人體造血和免疫系統(tǒng),可用于造血干細(xì)胞移植,治療血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng),以及遺傳代謝性及先天性疾病。因此,臍帶血已成為造血干細(xì)胞的重要來(lái)源,已經(jīng)被廣泛地應(yīng)用于臨床,是寶貴的人類生物資源。
本公司生產(chǎn)的人臍帶血干細(xì)胞采用密度梯度離心法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105/T25方瓶,細(xì)胞純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)基信息:
我們推薦使用欽誠(chéng)生物研制的人臍帶血干細(xì)胞專用完全培養(yǎng)液作為體外培養(yǎng)人臍帶血干細(xì)胞的培養(yǎng)基。
二、使用方法
1、您收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作:
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時(shí)或過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮完全培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%胰蛋白酶消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml完全培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細(xì)胞完全貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%胰蛋白酶消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入完全培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過(guò)夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無(wú)結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無(wú)菌離心管中,滴加入完全培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;
3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
三、注意事項(xiàng)
1、培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月;
2、在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作;
3、該細(xì)胞只可用于科研;
人臍帶血干細(xì)胞信息由上海欽誠(chéng)生物科技有限公司為您提供,如您想了解更多關(guān)于人臍帶血干細(xì)胞報(bào)價(jià)、型號(hào)、參數(shù)等信息,歡迎來(lái)電或留言咨詢。除供應(yīng)人臍帶血干細(xì)胞外,上海欽誠(chéng)生物科技有限公司還可為您提供Acetate Buffer(乙酸緩沖液),1M,pH5.5、Acrylamide Solution(丙烯酰胺溶液),30% 、Acetate Buffer(乙酸緩沖液),1M,pH5.0等產(chǎn)品,公司有專業(yè)的客戶服務(wù)團(tuán)隊(duì),是您值得信賴的合作伙伴。